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中国免疫学杂志 2021年第4期37卷 431-436页

作者：赵彩虹高玉亭郝慧琴(指导) 李振王泽刘进芦文静山西中医药大学中西医结合基础实验室晋中030619 山西中医药大学基础医学院晋中030619

目的:研究傅山风湿外治方(FS-med)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠notch1/jagged1通路表达的影响。方法:本实验建立雌性Wistar大鼠CIA模型,通过FS-med外敷治疗,ELISA检测血清中IFN-γ、IL-4和IL-6的表达,qRT-PCR和Western blot分别检测大... 详细信息

目的:研究傅山风湿外治方(FS-med)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠notch1/jagged1通路表达的影响。方法:本实验建立雌性Wistar大鼠CIA模型,通过FS-med外敷治疗,ELISA检测血清中IFN-γ、IL-4和IL-6的表达,qRT-PCR和Western blot分别检测大鼠关节中notch1、jagged1和Hes1的mRNA和蛋白表达水平,免疫组化检测大鼠关节组织中notch1、jagged1和Hes1的阳性信号并进行光密度值分析。结果:本实验成功构建CIA大鼠模型;CIA组大鼠血清中IFN-γ和IL-6的表达极显著高于Normal组和FS-med组(Pnotch1、jagged1和Hes1的mRNA和蛋白表达水平极显著高于Normal组和FS-med组(Pnotch1、jagged1和Hes1呈强阳性表达,极显著高于Normal组和FS-med组(Pnotch1/jagged1信号通路激活,调节Th1/Th2细胞因子平衡有关。

关键词：傅山风湿外治方类风湿关节炎胶原诱导性关节炎大鼠 notch1/jagged1通路

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傅山风湿外治方对CIA大鼠notch1/jagged1通路表达的影响

傅山风湿外治方对CIA大鼠Notch1/Jagged1通路表达的影响

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作者：赵彩虹山西中医药大学

学位级别：硕士

目的:旨在研究傅山风湿外治方（FS-med）对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠notch1/jagged1通路表达的影响。方法:将36只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为:健康组（Normal,n=12）、CIA模型组（CIA,n=12）、傅山风湿外治方治疗CIA组（FS-med,n=1... 详细信息

目的:旨在研究傅山风湿外治方（FS-med）对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠notch1/jagged1通路表达的影响。方法:将36只SPF级雌性Wistar大鼠随机分为:健康组（Normal,n=12）、CIA模型组（CIA,n=12）、傅山风湿外治方治疗CIA组（FS-med,n=12）。CIA组和FS-med组大鼠采用牛Ⅱ型胶原和弗氏完全/不完全佐剂建立CIA大鼠模型。造模成功后,Normal组和CIA组大鼠外敷空输液贴,FS-med组大鼠外敷FS-med药膏,2次/d,用药6周;每周测量并记录大鼠体重、关节直径和进行关节炎评分。6周后,3个实验组大鼠腹主动脉取血后,脱颈处死,取大鼠左右踝关节,左踝关节液氮冻存后放-80°C冰箱保存备用,右踝关节用4%多聚甲醛固定。ELISA检测血清中IFN-γ、IL-4和IL-6的表达;HE染色和Masson染色检测大鼠踝关节组织病理改变,qRT-PCR和Western Blot分别检测大鼠关节中notch1、jagged1和Hes1 m RNA和蛋白水平表达,免疫组化技术检测关节组织中notch1、jagged1和Hes1的阳性信号表达并进行光密度值分析。结果:1.不同实验组大鼠足外观、体重、关节直径、关节炎评分检测结果显示,造模后第14 d（给药前）,与Normal组比较,CIA组和FS-med组大鼠后足踝关节至趾关节明显肿胀,大鼠体重减轻,左踝关节直径和关节炎评分均极显著增高（P＜0.01）,提示造模成功。21d-56d（给药1-6周）,CIA组大鼠后足持续肿胀,关节变形,体重增长缓慢;与CIA组相比,FS-med组大鼠在此过程中踝关节及足趾肿胀程度明显缓解,体重缓慢增长,左踝关节直径和关节炎评分降低,随着时间的推移,作用愈加显著（P＜0.05）。2.不同实验组大鼠关节滑膜组织病理学检测结果显示,HE染色和Masson染色可见,Normal组踝关节组织结构完整,关节软骨面较为光滑,细胞排列整齐,潮线完整,软骨细胞分布规律,无增生、变性,滑膜光滑无增生,关节腔隙良好,未见炎症水肿,无明显病理变化。与Normal组相比,CIA组踝关节关节面粗糙、缺失,表层软骨变性失染,纤维化明显,大量的滑膜组织增生,血管翳形成,关节腔隙狭窄,炎性细胞浸润,软骨和骨严重破坏。与CIA组相比,FS-med组关节软骨形态得到改善,关节面仍不平整,但纤维组织增生、滑膜细胞增生减少,伴少量淋巴细胞浸润,关节腔隙明显得到改善,且骨组织破坏得到控制。3.不同实验组大鼠血清中细胞因子水平检测结果显示,与Normal组相比,CIA组大鼠血清中IFN-γ和IL-6表达极显著升高（P＜0.01）,IL-4表达极显著降低（P＜0.01）;与CIA组相比,FS-med组大鼠血清中IFN-γ和IL-6表达极显著降低（P＜0.01）,IL-4表达显著升高（P＜0.05）。4.不同实验组大鼠关节中notch1/jagged1通路相关基因表达结果显示,与Normal组相比,CIA组大鼠关节中notch1、jagged1和Hes1 m RNA和蛋白的表达极显著增高（P＜0.01）;与CIA组相比,FS-med组大鼠关节中notch1、jagged1和Hes1 m RNA和蛋白的表达极显著降低（P＜0.01）。5.不同实验组大鼠关节notch1、jagged1和Hes1免疫组化检测结果显示,notch1、jagged1和Hes1在不同实验组大鼠关节中均有不同程度的阳性表达;与Normal组相比,CIA组大鼠关节中notch1、jagged1和Hes1呈强阳性表达,AOD值极显著增加（P＜0.01）;与CIA组相比,notch1、jagged1和Hes1在FS-med组的阳性表达减少,AOD值极显著降低（P＜0.01）。结论:本研究证实FS-med对CIA大鼠具有良好的治疗效果,notch1/jagged1信号通路参与了RA的发生发展。FS-med可能通过抑制notch1/jagged1信号通路激活,调节Th1/Th2细胞因子平衡而达到治疗RA的目的。本实验对于了解FS-med治疗RA的作用机制具有重要意义,靶向抑制notch1/jagged1信号的活化可能成为治疗RA的新途径。

关键词：傅山风湿外治方类风湿关节炎 CIA大鼠 notch1/jagged1通路

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淫羊藿苷通过notch1/jagged1信号通路抑制人前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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中国医院药学杂志 2023年第15期43卷 1688-1693页

作者：潘绮曼詹嫣然陈桃芬付江波吕立国陈志强陈艳芬古炽明广州中医药大学第二临床医学院广东广州510405 广东省中医院泌尿外科广东广州510120 广东药科大学中药学院广东广州510006

目的:探讨淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷(icariin,ICA)对人前列腺癌细胞(prostate cancer cells,PC-3细胞)的侵袭、迁移和增殖的影响及作用机制。方法:运用不同浓度的ICA对PC-3细胞进行24,36,48 h的预处理后,采用MTT法筛选合适的受试浓度... 详细信息

目的:探讨淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷(icariin,ICA)对人前列腺癌细胞(prostate cancer cells,PC-3细胞)的侵袭、迁移和增殖的影响及作用机制。方法:运用不同浓度的ICA对PC-3细胞进行24,36,48 h的预处理后,采用MTT法筛选合适的受试浓度;采用流式细胞术检测ICA对PC-3细胞周期的影响;采用划痕实验和Transwell实验分别检测ICA对PC-3细胞的迁移能力和侵袭能力的影响;采用RT-PCR和Western blot分别检测ICA对PC-3细胞notch1、jagged1、Hes1、Hey1 mRNA及蛋白表达的调控作用。结果:不同浓度的ICA处理PC-3细胞24,36,48 h后,对PC-3细胞的增殖有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;流式细胞术检测结果表明ICA主要将PC-3阻滞在G0/G1期;划痕实验和Transwell实验结果显示ICA对PC-3细胞的迁移和侵袭能力有明显抑制作用;1×10^(-4)mol·L^(-1)的ICA作用于PC-3细胞48 h后,对notch1、jagged1、Hes1、Hey1 mRNA表达有明显抑制作用(Pnotch1、jagged1蛋白及Hes1、Hey1蛋白表达均有抑制作用(Pnotch1/jagged1通路的相关因子有关。

关键词：淫羊藿苷前列腺癌人前列腺癌细胞增殖迁移侵袭 notch1/jagged1通路

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