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三法三穴调节nogoa和NgR促进SNI大鼠运动功能恢复的机理研究

三法三穴调节NogoA和NgR促进SNI大鼠运动功能恢复的机理研究

引用

作者：李易真北京中医药大学

学位级别：硕士

[目的]本研究以坐骨神经损伤(Sciatic Nerve Injury,SNI)为例,建立坐骨神经夹持损伤模型,研究周围神经损伤。基于行为学、形态学与分子生物学的综合评价,通过三法三穴推拿干预SNI模型大鼠,探究推拿对SNI模型大鼠脊髓运动神经元存活情况... 详细信息

[目的]本研究以坐骨神经损伤(Sciatic Nerve Injury,SNI)为例,建立坐骨神经夹持损伤模型,研究周围神经损伤。基于行为学、形态学与分子生物学的综合评价,通过三法三穴推拿干预SNI模型大鼠,探究推拿对SNI模型大鼠脊髓运动神经元存活情况及小胶质细胞活化状态的影响,继而从脊髓神经再生抑制通路角度,观察推拿是否可以通过抑制Nogo-NgR信号通路中关键蛋白Nogo-A及NgR的表达,抑制生长锥回缩,促进轴突再生。通过研究三法三穴推拿干预促进神经元轴突再生,促进运动功能恢复的机理,探讨推拿治疗周围神经损伤的科学内涵,进而为临床周围神经损伤类疾病的推拿治疗提供理论基础。[方法]建立SNI模型大鼠,使用按摩推拿手法模拟仪,对殷门、承山、阳陵泉三穴进行定性定量点、拨、揉三法干预。运用坐骨神经功能指数评价大鼠的精细动作恢复情况,斜板试验评价大鼠的后肢肌力恢复情况。运用免疫荧光示踪观察脊髓运动神经元存活情况,荧光染色法观察小胶质细胞标记物CD11b的活化状态,以探究推拿对脊髓形态变化的影响;运用分子生物学技术检测脊髓腹角Nogo-A及NgR的表达情况。通过对行为学,形态学和分子生物学结果进行综合分析,评价推拿对SNI大鼠坐骨神经运动功能恢复的影响,并从脊髓神经活性物质形态变化和神经再生抑制通路角度探讨推拿的起效机制。[结果]1.推拿可以促进SNI大鼠运动功能的恢复1.1.坐骨神经功能指数(SFI)造模后7d,模型组SFI表现与假手术组相比显著降低(P0.05)。干预第10d,与模型组比较,推拿组大鼠斜板结果有升高趋势(P>0.05)。经推拿干预15d和20d时,模型组斜板结果仍明显低于假手术组(Pnogoa表达水平无显著性差异(P>0.05);干预20d后,与假手术组相比,模型组nogoa表达水平呈升高趋势(P>0.05),模型组与推拿组nogoa表达水平无显著性差异(P>0.05)。免疫组化法检测结果显示:干预Od,与假手术组相比,模型组nogoa表达水平无显著性差异(P>0.05);干预20d后,与假手术组相比,模型组nogoa表达水平呈升高趋势(Pnogoa表达水平无显著性差异(P>0.05)。Western-blot法检测结果显示:干预0d,与假手术组相比,模型组NgR表达水平升高(P<0.05);干预20d后,推拿组比模型组NgR表达水平降低(P<0.05)。免疫组化法检测结果显示:干预Od,与假手术组相比,模型组NgR表达水平升高(P<0.05);干预20d后,推拿组比模型组NgR表达水平降低(P<0.05)。[结论]1.三法三穴推拿干预可以促进SNI大鼠精细动作及后肢肌力的恢复,增加SNI大鼠脊髓腹角运动神经元的数量,降低脊髓腹角小胶质细胞的活化程度。证明推拿对神经纤维的恢复有促

关键词： nogoa受体神经束路示踪推拿轴突抑制通路坐骨神经损伤

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