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运动训练对脑梗死大鼠运动功能及Nogo-A/ngr1/Rho-A表达的影响

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中国康复医学杂志 2013年第10期28卷 894-898,903页

作者：李超温红梅窦祖林张婵娟曾进胜中山大学附属第三医院康复科广州510630 中山大学附属第一医院神经科

目的:明确运动训练对脑梗死大鼠运动功能的改善及神经修复的影响,探讨轴突生长有关因子Nogo-A/ngr1/Rho-A通路在其中的作用机制。方法:采用电凝法建立肾血管性高血压大鼠的右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,随机分为3组:假手术组、运动训... 详细信息

目的:明确运动训练对脑梗死大鼠运动功能的改善及神经修复的影响,探讨轴突生长有关因子Nogo-A/ngr1/Rho-A通路在其中的作用机制。方法:采用电凝法建立肾血管性高血压大鼠的右侧大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,随机分为3组:假手术组、运动训练组、对照组;各组分别在造模后7d、14d、28d和52d进行大鼠前肢抓握力评定,并取材进行尼氏染色观察形态学变化,Western blot检测Nogo-A、ngr、Rho-A蛋白表达。结果:梗死后7d、14d、28d及52d四个时间点,训练组较对照组大鼠抓握力改善(Pngr的表达,运动训练14d和28d使下游信号分子Rho-A蛋白的表达减少,和对照组相比,差异均有显著性意义(Pngr/Rho-A蛋白水平减少其对神经轴突的抑制。

关键词：运动训练脑梗死 Nogo-A ngr Rho-A

三维球体间充质干细胞移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织Nogo-A及ngr表达的影响

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第二军医大学学报 2015年第10期36卷 1087-1091页

作者：刘明夏玉军张明付清松单守勤王洪霞青岛大学医学院人体解剖学教研室青岛266071 济南军区青岛第一疗养院青岛266071 青岛大学附属医院急诊神经内科青岛266071

目的探讨三维球体胎盘来源间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织Nogo-A及其受体ngr表达的影响。方法大鼠随机分为假手术组(Sham组)、溶剂对照组(Vehicle组)及治疗组(MSCs组),后两组应用线栓法制备大脑中动脉缺血模型,缺血2... 详细信息

目的探讨三维球体胎盘来源间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠缺血再灌注损伤脑组织Nogo-A及其受体ngr表达的影响。方法大鼠随机分为假手术组(Sham组)、溶剂对照组(Vehicle组)及治疗组(MSCs组),后两组应用线栓法制备大脑中动脉缺血模型,缺血2h后拔除鱼线再灌注,1d后MSCs组注射三维球体MSCs,Vehicle组注射等量培养液;移植后1、3、7d测定大鼠神经运动功能,取脑组织,应用RT-PCR法、蛋白质印迹法检测Nogo-A、ngr mRNA及蛋白表达。结果与Vehicle组相比,MSCs组大鼠7d神经运动功能有明显改善(Pngr mRNA及蛋白水平均较Vehicle组降低(Pngr水平有关。

关键词：脑缺血再灌注损伤间质干细胞移植 Nogo-A ngr

新生鼠缺氧缺血性脑损伤脑组织ngr mRNA和ngr蛋白表达及意义

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四川大学学报（医学版） 2007年第1期38卷 68-72页

作者：王华姚裕家陈大鹏四川大学华西第二医院新生儿科成都610041

目的观察N gR mRNA及N gR蛋白在缺氧缺血新生鼠脑组织中表达量的变化,并探讨其意义。方法采用经右侧颈总动脉结扎加缺氧处理7日龄SD大鼠制作缺氧缺血脑损伤(H IBD)模型,应用RT-PCR方法检测H IBD新生鼠脑组织N gR mRNA表达的变化;免疫组... 详细信息

目的观察N gR mRNA及N gR蛋白在缺氧缺血新生鼠脑组织中表达量的变化,并探讨其意义。方法采用经右侧颈总动脉结扎加缺氧处理7日龄SD大鼠制作缺氧缺血脑损伤(H IBD)模型,应用RT-PCR方法检测H IBD新生鼠脑组织N gR mRNA表达的变化;免疫组织化学方法检测N gR蛋白的分布及含量变化;W estern B lot检测N gR蛋白含量变化。结果H IBD新生SD大鼠脑中N gR mRNA与对照组相比,6 h开始升高,12 h达到峰值,24 h有所下降但仍持续在较高水平(P均<0.05);免疫组织化学方法观察到N gR蛋白在正常新生SD大鼠脑中分布广泛,大脑皮层及海马均有较多N gR分布;免疫组织化学方法和W estern B lot方法均发现H IBD新生SD大鼠脑中N gR蛋白6 h开始升高,24 h达到高峰,72 h仍持续在较高水平(P均<0.05),随即开始下降,与对照组的差异无统计学意义。结论缺氧缺血性损伤时,N gR mRNA和N gR蛋白含量升高与抑制神经元再生有一定关系,随即出现的含量下降可能与神经元细胞随缺氧缺血时间延长而出现坏死,数量进一步减少,进而使在神经元上表达的N gR随之减少有一定关系。

关键词： ngr RT-PCR 免疫组化 Western Blot

成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA/ngr/RhoA信号通路蛋白表达的影响

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中国康复医学杂志 2020年第12期35卷 1409-1415页

作者：胡艳郭铁成张香玉鲁银山张秀娟田峻华中科技大学同济医学院附属同济医院康复医学科武汉430030 武汉大学中南医院郑州大学第五附属医院

目的:观察成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA、ngr、RhoA蛋白表达的影响。方法:90只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PAS组,每组又分为7d、14d、28d三个亚组(n=10)。模型组和PAS组大鼠采用Longa线栓法制作MCAO... 详细信息

目的:观察成对关联刺激对缺血性脑卒中大鼠缺血半暗带区NogoA、ngr、RhoA蛋白表达的影响。方法:90只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PAS组,每组又分为7d、14d、28d三个亚组(n=10)。模型组和PAS组大鼠采用Longa线栓法制作MCAO模型,假手术组除不插入线栓外,其余操作与模型组和PAS组相同。PAS组于术后第1d开始给予0.05Hz、共90对脉冲的PAS治疗,每日1次,每次持续30min;模型组和假手术组不予任何干预措施,各时间点治疗结束后取缺血半暗带区脑组织,Western Blot和免疫荧光检测缺血半暗带NogoA、ngr、RhoA蛋白的表达和分布情况。结果:术后第7、14、28d,假手术组NogoA、ngr、RhoA蛋白的表达水平均最低,模型组在各时间点NogoA、ngr、RhoA含量均较假手术组明显升高(Pngr、RhoA的含量高于假手术组(Pngr、RhoA蛋白在术后28d的含量低于同组第7d、14d(Pngr/RhoA信号通路蛋白的表达,可能是PAS促进脑缺血大鼠神经再生,改善脑缺血大鼠的感觉运动功能障碍的内在分子机制之一。

关键词：脑缺血成对关联刺激 NogoA ngr RhoA

电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆功能及海马组织Nogo-A/ngr表达的影响

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中国康复医学杂志 2015年第3期30卷 219-223页

作者：陈吉祥林浴坤吴羽楠周一平林如辉陶静陈立典福建中医药大学康复医学院福州350108 福建省康复技术协同创新中心福建中医药大学

目的:观察电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆功能及海马组织Nogo-A/Ng R表达的影响,探讨电针治疗脑卒中后认知功能障碍的作用机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组均15只。模型组和电针组参照Longa线栓法建... 详细信息

目的:观察电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆功能及海马组织Nogo-A/Ng R表达的影响,探讨电针治疗脑卒中后认知功能障碍的作用机制。方法:将45只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组均15只。模型组和电针组参照Longa线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。电针组针刺"百会穴"和"神庭穴",共干预7天;假手术组和模型组在同等条件下饲养和抓取。利用Morris水迷宫实验评估大鼠的学习记忆功能;TTC染色法观察脑梗死体积;免疫印迹法检测脑梗死侧海马组织Nogo-A及其受体Ng R的表达。结果:与模型组相比,电针组大鼠逃避潜伏期和找到平台所经过的路程缩短,跨越平台次数增加(P<0.05);电针组大鼠脑梗死体积减小(P<0.05);电针组大鼠海马区Nogo-A及其受体Ng R的表达量降低(P<0.05)。结论:电针可改善脑缺血再灌注大鼠的学习记忆功能,其作用机制可能与抑制脑梗死侧海马组织中Nogo-A及其受体Ng R的表达有关。

关键词：电针脑缺血学习记忆 Nogo-A ngr

Olfactory ensheathing cell transplantation and inhibition of NogoA,ngr and RhoA expression in the damaged zone to ameliorate spinal cord injury

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Neural Regeneration Research 2010年第13期5卷 999-1003页

作者： Puwei Yuan Xijing He Guoyu Wang Yangquan Hao Deyu Liu Department of Orthopaedics Affiliated Hospital Shaanxi College of Traditional Chinese Medicine Xianyang 712046 Shaanxi Province China Second Department of Orthopaedics Second Hospital of Xi'an Jiaotong University Xi'an 710042 Shaanxi Province China

BACKGROUND： Olfactory ensheathing cell （OEC） transplantation promotes repair of spinal cord injury. Neural regeneration inhibits binding of the myelin protein Nogo to its receptor （ngr）, activates downstream inhibitory signal RhoA, and leads to axonal degeneration. OBJECTIVE： To determine the relationship between OECs transplantation for spinal cord injury and NogoA, ngr, and RhoA protein expression in the damaged zone. DESIGN, TIME AND SETTING： A randomized, controlled, animal experiment was performed from September 2006 to May 2007 at the Key Laboratory of Environment and Genes in Xi＇an Jiaotong University School of Medicine, China. MATERIALS： OECs were harvested from healthy, adult, male, Sprague Dawley rats aged 6 months. Mouse anti-rat NogoA, ngr, and RheA monoclonal antibodies were utilized for detection. METHODS： A total of 40 adult Sprague Dawley rats were randomly assigned to four groups： normal, model, OECs, and DF12, with 10 animals in each group. Transverse section spinal cord injury was established in the OECs and DF12 groups, followed by injection of 1μL OECs suspension （1×10^8/mL） or equivalent DF12 medium at 1 mm above and below the injury site. MAIN OUTCOME MEASURES： Immunohistochemistry and Western blot were utilized to detect NogoA, ngr, and RhoA expression in the spinal cord injury lesions. Morphological changes were observed by argyrophilia staining, and lower extremity function of the animals was assessed using Basso, Beattie, and Bresnahan scores. RESULTS： Eight weeks following OECs transplantation, a significant increase in new axons was observed in the OECs group, and nerve fibers crossed the injury site to repair spinal cord injury. Qualitative and quantitative results from the OECs group were superior to the model and DF12 groups. At 8 weeks after transplantation, Basso, Beattie, and Bresnahan scores were significantly greater in the OECs group compared with the model and DF12 groups （P 〈 0.01）, but expression of NogoA, ngr, and RhoA prote

关键词： olfactory ensheathing cells NogoA ngr RhoA cell transplantation spinal cord peripheral nerve injury neural regeneration

神经干细胞ngr基因沉默立体定向移植治疗大鼠脑损伤

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中国组织工程研究与临床康复 2010年第14期14卷 2539-2544页

作者：王东张建军马景鑑天津医科大学总医院天津市300052

背景:神经干细胞具有自我增殖能力和多向分化潜能,一定条件下可以分化成神经系统的各种细胞,因此在神经损伤修复方面有着良好的应用前景。而RNA干扰避免了永久基因沉默的弊病,最有希望与神经干细胞移植相结合治疗颅脑损伤。目的:检测是... 详细信息

背景:神经干细胞具有自我增殖能力和多向分化潜能,一定条件下可以分化成神经系统的各种细胞,因此在神经损伤修复方面有着良好的应用前景。而RNA干扰避免了永久基因沉默的弊病,最有希望与神经干细胞移植相结合治疗颅脑损伤。目的:检测是否可以通过沉默ngr基因的方法提高神经干细胞立体定向移植对重型颅脑损伤大鼠的治疗效果。方法:60只雄性Wistar大鼠制成重型液压颅脑损伤模型后随机区组法分为3组,每组20只。实验组:造模24h后向损伤的大鼠脑组织内注射ngr基因沉默的神经干细胞悬液6μL;对照组:同法注射等量的神经干细胞悬液;空白组:同法注射等量的不含干细胞的培养液。伤后24h,3d,1,2周行动物神经学缺损评分。2周后处死行免疫组织化学和苏木精-伊红染色。结果与结论:转染小分子干扰RNA后,与对照组相比,实验组ngr基因蛋白表达量明显降低,移植后1周和2周,接受神经干细胞移植的大鼠神经学缺损评分明显低于对照组(Pngr基因沉默后立体定向移植治疗大鼠脑损伤可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经学功能。

关键词：神经干细胞 ngr RNA干扰脑内移植颅脑损伤

ngr修饰的香豆素-6隐形脂质体的制备及其体外细胞摄取性质

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中国医院药学杂志 2014年第6期34卷 427-432页

作者：彭佩林爱华陈军王咏顾薇赖小纯广州中医药大学第二临床医学院广东广州510120 南京中医药大学药学院江苏南京210023

目的:应用ngr导向磷脂化合物修饰香豆素-6隐形脂质体以构建肿瘤新生血管靶向载体。方法:合成ngr导向磷脂化合物并进行了表征。采用薄膜法制备了不同比例ngr修饰的香豆素-6隐形脂质体,以包封率和泄漏率为指标,考察其稳定性;以人脐静脉血... 详细信息

目的:应用ngr导向磷脂化合物修饰香豆素-6隐形脂质体以构建肿瘤新生血管靶向载体。方法:合成ngr导向磷脂化合物并进行了表征。采用薄膜法制备了不同比例ngr修饰的香豆素-6隐形脂质体,以包封率和泄漏率为指标,考察其稳定性;以人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC,阳性细胞,CD13高表达)为靶细胞,用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜对载体体外细胞摄取性质进行了分析。结果:制得的不同比例ngr修饰的香豆素-6隐形脂质体的包封率均>90.0%,12 h的体外累积泄漏率ngr修饰后的香豆素-6隐形脂质体在HUVEC中的摄取率明显高于未经修饰的隐形脂质体,且以0.64%(摩尔比)的用量摄取效果最好,而人冠状动脉内皮细胞(HCAEC,阴性细胞,CD13无表达)对两者的摄取没有明显差异。激光共聚焦观察表明,脂质体摄取入胞后,香豆素-6主要分布在细胞质中。结论:ngr修饰的隐形脂质体能够实现血管内皮细胞靶向,且用量以0.64%摩尔比为最佳。

关键词： ngr 香豆素-6 隐形脂质体 HUVEC 主动靶向

兔抗Nogo-66受体(ngr)LRR片段抗体的制备和鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2006年第5期22卷 633-635页

作者：于盼盼朱慧琴陆佩华黄立东上海交通大学医学院神经生物学实验室上海200025

目的:制备兔抗Nogo66受体(ngr)片段LRR的抗体,并进行特性鉴定。方法:采用原核系统表达大鼠ngr的LRR片段,经纯化后免疫新西兰兔制备抗LRR的抗体,分别用Westernblot、免疫组化染色法检测抗体的效价和特异性。结果:获得高效价的兔抗大鼠LR... 详细信息

目的:制备兔抗Nogo66受体(ngr)片段LRR的抗体,并进行特性鉴定。方法:采用原核系统表达大鼠ngr的LRR片段,经纯化后免疫新西兰兔制备抗LRR的抗体,分别用Westernblot、免疫组化染色法检测抗体的效价和特异性。结果:获得高效价的兔抗大鼠LRR的抗体,该抗体能够识别大鼠脑和脊髓组织中的ngr分子。脊髓切片的免疫组化染色结果显示,ngr分子在神经元中广泛表达。结论:制备出能特异性识别天然ngr分子的抗体,为检测ngr分子并进一步研究其功能奠定了基础。

关键词：神经再生 ngr 抗体兔