检索结果-南通市图书馆

Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 2016年第2期9卷 126-129页

作者： Nevis Amin Maritza Pupo Alicia Aguilar Susana Vázquez Yamira Caballero Rolando Ochoa María G Guzmán Armando Acosta Implementation and Design of Clinical trials Clinical Research and Impact Evaluation Direction Finlay Institute ‘Pedro Kourí’Tropical Medicine Institute (IPK) PAHO/WHO Collaborating Center for the Study of Dengue and its Vector

Objective: To evaluate the recognition of ns4 b mimotope, as multiple antigen peptide(MAP), by dengue antibodies presents in serum samples from patients with different serotype infections. Methods: A MAP containing mimotope sequence was synthesized and used to evaluate the recognition of ns4 b mimotope as MAP by a panel of 66 human sera from dengue cases by an indirect ELISA assay. Results: The MAP differentiated between sera from dengue viruses infected patients and sera from healthy individuals and the best reactivity was shown by serum from dengue type 3 virus patients. The recognition was more intense with serum from patients with secondary infection. Conclusions: The findings suggest the potential use of ns4 b mimotope on the development of a multi-epitope diagnostic tool. These results are important for further immunogenicity studies.

关键词： MAP Antibodies ns4b Dengue virus

丙型肝炎病毒ns4b蛋白调控Hep3b细胞非折叠蛋白质反应研究

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

江西农业大学学报 2012年第1期34卷 165-169页

作者：张艳妮张庆华陈瑶刘好桔刘志文孔令保江西农业大学生物科学与工程学院江西南昌330045

研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)ns4b对Hep3b细胞非折叠蛋白质反应的影响。ns4b重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)ns4b通过脂质体转染Hep3b细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XbP1 mRNA剪接,Western blot鉴... 详细信息

研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)ns4b对Hep3b细胞非折叠蛋白质反应的影响。ns4b重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)ns4b通过脂质体转染Hep3b细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XbP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XbP1启动子活性。G418筛选和Western blot鉴定证实获得稳定表达ns4b的Hep3b细胞;在该细胞内,XbP1 mRNA剪接、ATF6切割、XbP1和Grp78启动子激活均被检测到。ns4b在Hep3b的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。

关键词：丙型肝炎病毒 ns4b Hep3b 非折叠蛋白质反应

日本乙型脑炎病毒ns4b蛋白与ns3解旋酶的相互作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

日本乙型脑炎病毒NS4B蛋白与NS3解旋酶的相互作用研究

作者：吕博敏华中农业大学

学位级别：硕士

日本乙型脑炎病毒(JEV)属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),是引起日本乙型脑炎的病原。该病毒能引起人出现明显的脑炎症状,怀孕母猪感染后会出现高热、流产、死胎和木乃伊胎,公猪则出现睾丸炎。目前,日本乙型脑炎病毒流... 详细信息

日本乙型脑炎病毒(JEV)属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus),是引起日本乙型脑炎的病原。该病毒能引起人出现明显的脑炎症状,怀孕母猪感染后会出现高热、流产、死胎和木乃伊胎,公猪则出现睾丸炎。目前,日本乙型脑炎病毒流行于亚洲25个国家或地区,全世界约有60%的人口生活在日本乙型脑炎病毒的流行区,日本乙型脑炎病毒带来的公共卫生问题仍然十分严峻。现阶段对JEV复制过程中复制复合体的形成机制及其作用机制尚不是十分明确,已知JEV的所有非结构蛋白均参与到复制复合体的构成,ns3解旋酶能够解旋双链RNA,而ns4b蛋白是黄病毒中唯一一个在内质网膜内外均有较长片段的一个非结构蛋白,对黄病毒复制复合体的形成具有关键作用。本研究通过确定JEV ns4b的拓扑结构,用免疫共沉淀实验及GST pull down实验,对ns4b膜外区与ns3解旋酶之间的相互作用进行了验证,并验证了过表达ns4b及ns4b膜外区蛋白对JEV复制的影响。研究的内容及结果如下:*** ns4b蛋白与ns3解旋酶的相互作用通过PCR扩增JEV ns4b基因和ns3解旋酶基因,将该基因连接至pcDNA3.1(+)、pcDNA4.0等真核表达载体上,并通过间接免疫荧光技术验证其表达情况。将验证表达的真核表达质粒共转染至HEK 293T细胞,36h后收集细胞样品,利用免疫共沉淀实验验证ns3解旋酶与ns4b蛋白之间的相互作用。结果表明,ns3解旋酶与ns4b之间确实存在互作。*** ns4b蛋白跨膜拓扑结构的的鉴定为确定ns4b蛋白的拓扑结构,我们采用TMHMM、Tmpred、HMMTOP、SOSUI、PHD、DAS等六种蛋白跨膜区分析软件对JEV ns4b的氨基酸序列进行分析,根据ns4b氨基酸序列的疏水性,确定ns4b蛋白含有5个疏水区。依据软件分析结果,对ns4b蛋白进行分段表达,将5个疏水区分别连接至pEGFP-C1载体上,并将其转染至Hela细胞中,利用间接免疫荧光技术验证其亚细胞定位,最终确定ns4b含有三段跨膜区,其中软件预测的疏水区1和疏水区2位于内质网膜内,并不参与ns4b的跨膜;第118-175位氨基酸是ns4b蛋白的膜外区,最有可能参与ns3的互作。*** ns4b蛋白膜外区与ns3解旋酶的相互作用扩增JEV ns4b蛋白的膜外区基因,并将其连接至真核表达质粒pEGFP-N1上,将该质粒与pcDNA3.1(+)-ns3 helicase共转染至HEK 293T细胞中,通过免疫共沉淀实验验证ns3解旋酶与ns4b膜外区的相互作用,结果显示,ns3解旋酶与ns4b的膜外区存在相互作用。扩增ns4b膜外区基因,并将其连接至原核表达载体pGEX-6p-1上,在大肠杆菌bL21(DE3)中表达的重组蛋白,通过GST亲和层析纯化获得较纯的ns4b膜外区蛋白,采用GST pull down实验验证ns4b与ns3解旋酶之间的直接相互作用,结果显示,ns3解旋酶与ns4b的膜外区之间的相互作用是直接作用。***4b蛋白对JEV复制的影响克隆ns4b的膜外区基因,并构建真核表达质粒pEGFP-N1-ns4b(118-175),将该质粒转染至Hela细胞中,24h后感染JEV P3毒株,收集感染后的样品,采用空斑实验验证ns4b膜外区对JEV病毒增殖的影响。结果显示,过表达ns4b及ns4b的膜外区在一定程度上能够抑制病毒复制,但其抑制率还需进一步确认。

关键词：日本乙型脑炎病毒(JEV) ns3解旋酶 ns4b 蛋白互作病毒复制

稳定表达乙型脑炎病毒ns2b/ns4b细胞系的构建及其在筛选互作蛋白中的初步应用

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

稳定表达乙型脑炎病毒NS2B/NS4B细胞系的构建及其在筛选互作蛋白...

作者：徐秋萍华中农业大学

学位级别：硕士

日本乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属,是一种典型的嗜神经病毒。该病毒主要经蚊虫传播,并严重危害人、畜健康。人类发病后死亡率高,且治愈后往往留下神经学后遗症。在猪群中,该病毒... 详细信息

日本乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis Virus,JEV)属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属,是一种典型的嗜神经病毒。该病毒主要经蚊虫传播,并严重危害人、畜健康。人类发病后死亡率高,且治愈后往往留下神经学后遗症。在猪群中,该病毒主要引起妊娠母猪流产、产死胎或木乃伊胎,公猪发生睾丸炎,育肥猪持续高热等,给养猪业造成巨大的经济损失。ns2b和ns4b蛋白是JEV的2个重要的非结构蛋白,它们的功能尚待解答。本研究旨在构建能稳定表达ns2b和ns4b蛋白的细胞系,并在此基础上,通过串联亲和层析(Tandem Affinity Purification,TAP)与质谱(Mass spectrometry analysis,MS)技术,筛选可能与它们相互作用的宿主蛋白,从而为深入阐明ns2b和ns4b的功能及其与宿主细胞相互作用机制的研究奠定基础。具体研究内容如下:1.构建细胞系利用RT-PCR方法扩增JEV ns2b和ns4b基因,并将之克隆至带嘌呤霉素(Puromycin)抗性基因的载体Psin-EF2-MCS-Pur中。然后利用慢病毒载体包装系统,与ps PAX2和p MD2.G共同转染293T细胞,收获的慢病毒粒子转导正常293T细胞,通过嘌呤霉素筛选纯化细胞系Cellline-ns2b和Cellline-ns4b。同时,用空载体包装病毒,相同方法获得对照组细胞系Cellline-vector。2.细胞系的验证对已经得到的慢病毒细胞系,采用三种方式进行验证:嘌呤霉素抗性实验;免疫荧光染色;Western blot验证。三种方法都证明了细胞系中目的蛋白能稳定、高效表达。3.筛选互作蛋白利用建立的细胞系,进行串联亲和层析实验,洗脱后的产物进行SDS-PAGE胶分离并进行银染处理,分析实验组和对照组产物条带的区别,并结合质谱分析的方法找出在293T细胞中与JEV ns2b和ns4b蛋白相互作用的宿主蛋白质。最终我们发现ns2b可能与宿主蛋白ADP/ATP转运酶2(ADP/ATP carrier protein,ANT2)相互作用。

关键词：日本乙型脑炎病毒 ns2b ns4b 细胞系相互作用

宿主细胞FHC与CSFV ns4b互作及对CSFV增殖的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

宿主细胞FHC与CSFV NS4B互作及对CSFV增殖的影响

作者：钱贵西北农林科技大学

学位级别：硕士

猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的猪瘟(Classical swine fever,CSF)广泛分布于很多国家和地区,曾给全世界养猪业造成了巨大的经济损失,世界动物卫生组织(OIE)将其规定为必须报告的动物传染病,我国将其列为一类动物疫... 详细信息

猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)引起的猪瘟(Classical swine fever,CSF)广泛分布于很多国家和地区,曾给全世界养猪业造成了巨大的经济损失,世界动物卫生组织(OIE)将其规定为必须报告的动物传染病,我国将其列为一类动物疫病。虽然猪瘟在少数发达国家和地区已被成功净化,但是猪瘟在全世界很多养猪国家和地区仍时有发生,我国采取疫苗接种与病猪扑杀相结合的防控措施,虽然取得了一定的效果,但猪瘟仍时有发生,以非典型、温和型猪瘟和持续带毒为主,严重制约着我国养猪业的健康发展。因此,我国仍需要探索出能够有效防控猪瘟病毒感染与传播的新方法和新途径。由于病毒有限的基因组,其在宿主细胞内的有效增殖及感染又必须利用宿主细胞内成分。因此,探究宿主细胞内成分对猪瘟病毒增殖的影响及作用机制具有重要科学意义。细胞凋亡是宿主抵抗病毒感染、抑制病毒增殖的重要途径。因此,很多病毒进化出了一套能够抑制或延迟宿主细胞凋亡的有效策略,从而实现有效的持续性感染。现有的研究表明猪瘟病毒感染体外培养的细胞不能引起细胞凋亡。重链铁蛋白(ferritin heavy chain,FHC)是一个公认的抗凋亡蛋白,但有关FHC在猪瘟病毒感染过程中的作用还未见报道。本文研究了宿主细胞FHC与CSFV ns4b互作及对猪瘟病毒增殖的影响,获得了以下结果:(1)细胞内FHC与CSFV ns4b之间存在相互作用。通过免疫共沉淀(Coimmunoprecipitation,Co-IP)和GST pull-down(glutathione S-transferase(GST)pull-down)证明FHC与CSFV ns4b蛋白可以发生相互作用;通过激光共聚焦证实了FHC和CSFV ns4b在PK-15细胞内存在共定位现象。(2)细胞内FHC促进CSFV的增殖。成功构建了慢病毒感染介导的FHC稳定过表达与稳定低表达的PK-15细胞系,并通过实时荧光定量PCR(real-time quantitive PCR,RTqPCR)、Western blot以及间接免疫荧光试验检测发现,FHC过表达会促进CSFV增殖,而FHC的稳定低表达会抑制CSFV增殖;ns4b蛋白的表达以及CSFV的感染都能够上调细胞内FHC的表达水平。(3)FHC在CSFV感染过程中起着抗凋亡作用。流式细胞仪检测细胞凋亡以及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,结果显示,FHC能够通过稳定细胞内ROS水平而抑制细胞凋亡,在CSFV感染过程中起着抗凋亡作用。以上研究结果表明,FHC是CSFV ns4b的一个互作蛋白,在CSFV增殖过程中起着正向的促进作用,并通过稳定细胞内ROS水平而抑制细胞凋亡。

关键词：重链铁蛋白猪瘟病毒 ns4b 细胞凋亡活性氧

CEND1通过结合ns4b抑制寨卡病毒的复制

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

CEND1通过结合NS4B抑制寨卡病毒的复制

作者：冯雨牵暨南大学

学位级别：硕士

目的:寨卡病毒（Zika Virus,ZIKV）是由虫媒传播的单链正股RNA病毒,属于黄病毒家族。2015年寨卡病毒于南美洲巴西大规模爆发并迅速传播至邻近50多个国家与地区,感染有几率引起胎儿小头症,成为国际性突发公共卫生事件,受到广泛的关注。... 详细信息

目的:寨卡病毒（Zika Virus,ZIKV）是由虫媒传播的单链正股RNA病毒,属于黄病毒家族。2015年寨卡病毒于南美洲巴西大规模爆发并迅速传播至邻近50多个国家与地区,感染有几率引起胎儿小头症,成为国际性突发公共卫生事件,受到广泛的关注。干扰素（Interferon,IFN）应答是宿主抵御病毒的初始和基本防御机制,寨卡病毒非结构蛋白ns4b可以通过阻碍IFN-β生成帮助寨卡病毒在宿主细胞内复制。细胞周期退出与神经元分化蛋白（cell cycle exit and neuronal differentiation 1,CEND1）是由两条22-23kd多肽链通过二硫键连接而成的神经元特异性蛋白,参与神经元分化的机制和细胞周期的调节。本文旨在探讨CEND1对寨卡病毒功能的影响,以及CEND1通过与ns4b相互作用发挥其抗病毒功能的具体机制。本文的为进一步研究CEND1蛋白抗病毒功能的分子机理提供了实验依据,为寻找新的抗寨卡病毒药物靶点奠定基础。方法:（1）通过分子克隆构建HA-CEND1及其6个截短质粒并转化入DH5α细菌中培养,使用质粒提取试剂盒提取得到所需质粒。将HA-CEND1质粒梯度转染进U251、A549及Hela细胞中,然后使用寨卡病毒感染,通过q RT-PCR、Western blot与Confocal实验探究CEND1对寨卡病毒功能的影响。（2）构建稳定表达CEND1的U251细胞系U251-CEND1然后使用寨卡病毒感染,通过q RT-PCR与Western blot实验进一步验证CEND1对寨卡病毒功能的影响。（3）构建干扰CEND1表达的Neuro-2a细胞系N2A-sh CEND1,使用寨卡病毒感染细胞后,通过q RT-PCR实验探讨干扰CEND1表达对寨卡病毒功能的影响。（4）将前面构建的HA-CEND1及其6个截短质粒分别与Flag-ns4b质粒共转入HEK293T细胞中,利用免疫共沉淀（co-immunoprecipitation,CO-IP）的方法确认CEND1与ns4b结合的具体区域。（5）通过q RT-PCR实验探讨寨卡病毒感染细胞N2A-sh CEND1后,干扰CEND1对细胞内IFN-β生成的影响。结果:（1）q RT-PCR、Western blot与Confocal实验结果表明在瞬转过表达CEND1的细胞系中,CEND1可以抑制寨卡病毒的m RNA水平和蛋白水平。（2）q RT-PCR和Western blot结果表明在稳定表达CEND1的细胞系中,CEND1可以抑制寨卡病毒的m RNA水平和蛋白水平。（3）q RT-PCR结果表明在干扰CEND1表达的细胞系中,CEND1可以促进寨卡病毒的m RNA水平。（4）免疫共沉淀实验表明CEND1的130-150aa片段能够与寨卡病毒非结构蛋白ns4b相互作用。（5）q RT-PCR结果表明干扰CEND1可以抑制细胞内IFN-β的上升。结论:细胞周期退出与神经元分化蛋白CEND1可以抑制寨卡病毒在细胞内的m RNA水平和蛋白水平。CEND1可与寨卡病毒非结构蛋白ns4b相互作用且结合区域为130-150aa。干扰CEND1可以抑制细胞内IFN-β的上升。该结果为进一步研究CEND1蛋白抗病毒功能的分子机理提供了实验依据。

关键词：寨卡病毒 ns4b CEND1 IFN-β

转染丙型肝炎病毒非结构蛋白ns4b对P53表达的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

川北医学院学报 2004年第1期19卷 14-16页

作者：李云李昌平徐建平邹义君泸州医学院附属医院消化科四川泸州646000

目的了解丙型肝炎病毒非结构蛋白ns4b对肝细胞内p5 3表达的影响 ,探讨其在肝癌发生中的作用 ,及其发生机制。方法使用脂质体介导法 ,转染丙型肝炎病毒非结构蛋白重组质粒PCXN2 ns4b及突变型p5 3基因重组质粒P5 3 CX2 2AN3进入Chang肝... 详细信息

目的了解丙型肝炎病毒非结构蛋白ns4b对肝细胞内p5 3表达的影响 ,探讨其在肝癌发生中的作用 ,及其发生机制。方法使用脂质体介导法 ,转染丙型肝炎病毒非结构蛋白重组质粒PCXN2 ns4b及突变型p5 3基因重组质粒P5 3 CX2 2AN3进入Chang肝细胞内 ,并用G4 18筛选获得稳定表达细胞 ,分别采用细胞化学法检测p5 3表达率。设置空白对照组、空白载体组、转染ns4b组 ,转染p5 3组、共转染ns4b及p5 3组。结果空白对照组无p5 3表达 ,空白载体组及转染ns4b组呈弱阳性表达 ,转染p5 3组及共转染组呈阳性表达 ,与空白对照组、空白载体组及转染ns4b组比较有显著差异 ,P ns4b可能抑制突变型p5 3表达 ,也可能阻止其进入细胞核。

关键词：转染丙型肝炎病毒非结构蛋白 ns4b P53 表达

丙型肝炎病毒非结构蛋白ns4b反式激活基因的克隆化研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

肝脏 2005年第1期10卷 24-26页

作者：刘妍成军王建军白桂芹王志凌郭风劲纪冬崔玉芳北京解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心全军病毒性肝炎防治研究重点实验室

目的　应用抑制性消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)技术构建丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白 4b(ns4b)转染细胞差异表达cDNA消减文库 ,克隆HCVns4b蛋白反式激活相关基因。方法　以HCVns4b表达质粒pcDNA3 .1( ) ns4b... 详细信息

目的　应用抑制性消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)技术构建丙型肝炎病毒 (HCV)非结构蛋白 4b(ns4b)转染细胞差异表达cDNA消减文库 ,克隆HCVns4b蛋白反式激活相关基因。方法　以HCVns4b表达质粒pcDNA3 .1( ) ns4b转染HepG2细胞 ,以空载体pcDNA3 .1( )为对照 ,制备转染后的细胞裂解液 ,提取mRNA并逆转录为cDNA ,进行抑制性消减杂交分析。将富集的二次PCR产物与T A载体连接 ,并转染大肠杆菌进行文库扩增 ,随机挑取克隆聚合酶链反应 (PCR)扩增后进行测序及同源性分析。结果　文库扩增后得到 3 3个阳性克隆 ,经菌落PCR分析显示其中 2 8个克隆含有大小不等的 2 0 0～ 10 0 0bp插入片段。测序及同源性分析显示 ,12种已知基因编码蛋白 ,包括一些与细胞周期、信号传导及肿瘤发生等细胞生长调节密切相关的蛋白编码基因 ,可能是ns4b反式激活靶基因。结论　成功构建了HCVns4b反式激活基因差异表达的cDNA消减文库 ,为进一步阐明HCVns4b反式调节的靶基因在肝炎。

关键词： ns4b 非结构蛋白反式激活基因克隆化研究丙型肝炎病毒(HCV) 聚合酶链反应(PCR) cDNA消减文库抑制性消减杂交分析反式激活相关基因 HepG2细胞反式激活靶基因分子生物学机制同源性分析基因编码蛋白蛋白编码基因

人胰腺细胞cDNA文库中丙型肝炎病毒ns4b结合蛋白基因的筛选

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华临床医师杂志（电子版） 2011年第9期5卷 2523-2526页

作者：温少芳张锦前孙荣华李卓高萍王琦刘顺爱成军首都医科大学附属北京地坛医院传染病研究所 100015

目的从人胰腺细胞cDNA文库中,采用酵母双杂交方法筛选HCV ns4b包膜蛋白的相互作用蛋白。方法人胰腺细胞cDNA文库先进行扩增,随后纯化及鉴定,然后将鉴定好的人胰腺细胞cDNA文库质粒转化入酵母菌株Y187。构建pGbKT7-ns4b作为诱饵质粒,随... 详细信息

目的从人胰腺细胞cDNA文库中,采用酵母双杂交方法筛选HCV ns4b包膜蛋白的相互作用蛋白。方法人胰腺细胞cDNA文库先进行扩增,随后纯化及鉴定,然后将鉴定好的人胰腺细胞cDNA文库质粒转化入酵母菌株Y187。构建pGbKT7-ns4b作为诱饵质粒,随之转化酵母菌株AH109,用色氨酸缺陷型培养基(SD/-Trp)筛选阳性菌落。配合两种重组酵母菌株AH109与Y187,用四缺培养基及X-α-gal筛选蓝色酵母菌落,提取相应质粒,电转化感受态菌DH5α后再提取质粒,测序仪测序,结果使用PUbMED进行序列比对。结果成功构建pGbKT7-HCV ns4b重组质粒,并从人胰腺cDNA文库中筛选出7种与HCV ns4b蛋白相结合的蛋白基因,包括CDK5RAP3、辅脂肪酶、胰石蛋白、凝乳蛋白、弹性蛋白酶2A、糜蛋白酶和胆盐刺激酯酶。结论 HCV ns4b蛋白可能通过与所筛选出前述蛋白中参与代谢过程的相关蛋白结合,影响糖、脂类代谢过程。

关键词：肝炎病毒属基因文库胰腺载体蛋白质类双杂交系统技术 ns4b

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

靶向ns4b抑制剂安非合韦的有关物质测定

化工时刊 2017年第8期31卷 7-10页

作者：陶鑫袁红焦丹丹常州寅盛药业有限公司江苏常州213003 苏州大学附属儿童医院江苏苏州215000

目的安非合韦为针对丙肝ns4b靶点的1类新药,采用HPLC法测定安非合韦的有关物质。方法采用Thermo bDS HYPERSIL C18(4.60×250 mm,5.0μm,用等度洗脱的方式,流动相为0.1%磷酸水溶液∶乙腈=5∶5,波长为210 nm,柱温40℃,流速1.0 m L·min^(... 详细信息

目的安非合韦为针对丙肝ns4b靶点的1类新药,采用HPLC法测定安非合韦的有关物质。方法采用Thermo bDS HYPERSIL C18(4.60×250 mm,5.0μm,用等度洗脱的方式,流动相为0.1%磷酸水溶液∶乙腈=5∶5,波长为210 nm,柱温40℃,流速1.0 m L·min^(-1)。结果安非合韦的峰能与相邻杂质峰完全分离。安非合韦定量限为0.029 98μg·m L^(-1),最低检出限为0.008 99μg·m L^(-1)。重复性和中间精密度良好。样品溶液在24 h内稳定。结论该方法可用于检测安非合韦的有关物质。

关键词：高效液相色谱法 ns4b 丙肝药物安非合韦有关物质