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J亚群禽白血病病毒NX0101株gp85基因在同一个体不同脏器中准种多样性分析

J亚群禽白血病病毒NX0101株gp85基因在同一个体不同脏器中准种多...

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作者：高亚龙山东农业大学

学位级别：硕士

禽白血病是引起禽类产生肿瘤的主要疫病之一,其病原是反转录病毒科α反转录病毒属的禽白血病病毒(Avain leukosis virus,ALV)。根据病毒囊膜糖蛋白的抗原结构、病毒宿主范围及在细胞培养上不同毒株之间的相互干扰作用,将ALV分为A～J10... 详细信息

禽白血病是引起禽类产生肿瘤的主要疫病之一,其病原是反转录病毒科α反转录病毒属的禽白血病病毒(Avain leukosis virus,ALV)。根据病毒囊膜糖蛋白的抗原结构、病毒宿主范围及在细胞培养上不同毒株之间的相互干扰作用,将ALV分为A～J10个亚群,其中A、B、C、D、E和J6个亚群存在于鸡群中。A、B和J亚群为鸡群中引发肿瘤的主要外源性ALV,而在鸡群中较少见由C、D亚群外源性ALV引发的肿瘤,E亚群病毒为内源性白血病病毒,对鸡的致病性很低或无致病。打Roloff 1868年第一次报到出淋巴白血病至今,禽白血病已经遍布于世界各个地方,甚至被认为此病几乎涉及所有商品代鸡群,成为严重危害禽类养殖业的最厉害的禽病之一。因为该病呈渐进性发生和持续的低死亡率,所以在相当长的一段时间都没能够引起研究人员的足够重视。直到1997-1998年,J亚群禽白血病在世界范围内爆发,给禽类养殖业也造成了非常大的经济损失,禽白血病才开始引起了相关业界的重视。然而因为该病是以垂直传播为主,使它难以控制,使得鸡群在产蛋、增重两个方面受到严重影响。特别是生病鸡抵抗力降低,容易感染多种鸡病,给鸡群的饲养管理带来巨大的困难。为研究J亚群禽白血病病毒NX0101株gp85基因在白羽肉鸡不同脏器、不同肿瘤组织的变异。选取一例全身弥漫性肿瘤尤其是肝脏、肾脏、肺部肿瘤病例的白羽肉鸡,取其左侧肾脏长出的大块肿瘤、肝脏、右侧肾脏、肺浸出液和攻毒毒株接种DF1,进行IFA检测,对各脏器组织和带毒细胞分别提取DNA,PCR扩增、每个脏器挑取10个阳性克隆进行测序,比较其与原始毒株NX0101 gp85的同源性及分析gp85在同一机体不同脏器的变异规律。左侧肾脏的大块肿瘤、肝脏、右侧肾脏、肺中病毒的gp85与原始毒株NX0101gp85基因平均同源性为95.6%、94.9%、95.7%、94.4%。攻毒毒株、左侧肾脏的大块肿瘤、右侧肾脏和肺自身10个克隆间的平均同源性分别为99.5%、99.3%、98.7%、99.2%和98.9%。左侧肾脏的大块肿瘤克隆与肝脏、右侧肾脏、肺克隆间的平均同源性分别为96.1%、98.1%、96%,肝脏克隆与右侧肾脏、肺克隆的平均同源性分别为96.3%、96.5%,右侧肾脏克隆与肺克隆的平均同源性为95.8%。攻毒毒株10个克隆与原始毒株相比共有8个稳定的突变位点,在整个gp85和110～120aa141～151aa和189～194aa三个高变区的ns/s值均在2.5以下,为随机突变。而各脏器克隆有31个稳定的突变位点,而且大部分稳定突变位点在三个高变区之内,各脏器克隆在整个gp85的ns/s值在2.83～7.29之间,在三个高变区的ns/s值更是高至10以上。NX0101在机体内各脏器感染复制后gp85发生很大的变异,但不同的脏器其变异程度不同,即使在同一脏器不同的阳性克隆间的gp85基因也有一定差异。脏器间病毒gp85基因的差异性要比同一脏器克隆间的大很多。禽白血病病毒感染不仅在群体中表现出多样性,在个体感染不同脏器间也存在明显的多样性。

关键词： J亚群禽白血病病毒 gp85 准种基因变异 ns/s

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