检索结果-南通市图书馆

生物化学与生物物理进展 1997年第5期24卷 414-418页

作者：曾宪春蒋达和李文鑫 B.PERBAL 武汉大学生命科学学院武汉430072 LaboratoiredOncologieviraleetMoleculaire

nov基因是最近发现的一种新的细胞癌基因 ,在细胞的增殖、癌变及胚胎发育过程中可能起着重要的调节作用 .文章综述了nov基因的发现、结构功能、表达调节特点以及与相关基因的关系 .

关键词： nov基因肿瘤细胞癌基因

nov基因的表达与脑的种系发育分化平行相关

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动物学报 2001年第6期47卷 654-658,T001页

作者：苏炳银蔡文琴张成岗 Bernard Perbal 第三军医大学组织胚胎学教研室重庆400038 Laboratoired’OncologieViraleetMoleculaire

用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学方法研究了鲢、鸡、牛、犬和猫脑肾母细胞瘤过度表达基因阳性神经元的比较发育。结果显示 ,低等脊椎动物鲢脑仅有少量novmRNA阳性神经元 ,分布于延髓的迷走神经背核、三叉神经背核、丘脑前核、... 详细信息

用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学方法研究了鲢、鸡、牛、犬和猫脑肾母细胞瘤过度表达基因阳性神经元的比较发育。结果显示 ,低等脊椎动物鲢脑仅有少量novmRNA阳性神经元 ,分布于延髓的迷走神经背核、三叉神经背核、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑阳性神经元除广泛分布于脑干外 ,小脑、丘脑的多数核团、下丘脑的背侧核、腹侧核和后核以及大脑纹状体等多数脑区也有一定分布。哺乳动物牛、犬和猫脑中novmRNA阳性神经元广泛分布 ,在脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。以上结果表明 ,在从低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中nov基因的表达也从低级中枢向高级中枢扩展 ,提示该基因的表达与脑的种系发育、脑功能的分化平行相关。

关键词：鲢鸡哺乳动物脑发育脑分化肾母细胞瘤过度表达基因 mRNA 原位杂交组织化学比较发育 nov基因

nov基因真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达

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第三军医大学学报 2005年第12期27卷 1187-1189页

作者：李成仁蔡文琴苏炳银张成岗第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆市神经科学研究所重庆400038

目的　获得nov基因真核表达载体并检测其在细胞中的表达。方法　利用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)方法,从新鲜大鼠大脑组织的总cDNA中扩增出1165bp的nov基因的cDNA编码区序列,然后用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3... 详细信息

目的　获得nov基因真核表达载体并检测其在细胞中的表达。方法　利用逆转录多聚酶链反应(RT PCR)方法,从新鲜大鼠大脑组织的总cDNA中扩增出1165bp的nov基因的cDNA编码区序列,然后用HindⅢ和BamHⅠ双酶切后定向克隆入真核表达载体pcDNA3 1 Myc His(+ ) lacZ质粒中,用脂质体法将载体转染入COS 7细胞中,用Westernblot和免疫细胞化学方法检测其表达情况。结果　nov基因cDNA已经正确克隆到真核表达载体pcDNA3 .1 Myc His(+ ) lacZ质粒中;体外转染入COS 7细胞中后,可见转染细胞有nov蛋白的表达。结论　本实验所构建的重组质粒为nov基因的作用研究提供了有利的分子工具。

关键词： nov基因 RT-PCR 基因克隆

nov基因修饰神经干细胞移植对损伤大鼠脊髓功能恢复的影响

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第三军医大学学报 2003年第1期25卷 33-35页

作者：李成仁李巍蔡文琴苏炳银陈德英第三军医大学基础医学部组织学与胚胎学教研室重庆400038

目的　观察nov基因修饰神经干细胞 (NSCs)移植对损伤大鼠脊髓功能的治疗作用。方法　 40只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )、NSCs组 (C组 )和nov NSCs组 (D组 ) ,每组 10只 ;将NSCs悬液注入C组切断脊髓处 ,D组注入等量... 详细信息

目的　观察nov基因修饰神经干细胞 (NSCs)移植对损伤大鼠脊髓功能的治疗作用。方法　 40只Wistar大鼠随机分为对照组 (A组 )、损伤组 (B组 )、NSCs组 (C组 )和nov NSCs组 (D组 ) ,每组 10只 ;将NSCs悬液注入C组切断脊髓处 ,D组注入等量的nov基因修饰NSCs悬液 ,B组注射等量的生理盐水。术后 2个月 ,采用BBB评分和皮层体感诱发电位 (CSEP)观察大鼠脊髓功能的恢复程度。结果　①术后 2月BBB评分B、C、D组大鼠有所恢复 ,但都未达到正常水平 ;C组和D组的大鼠恢复较好 ,评分较高 ,与B组有显著性差异 ;其中D组比C组恢复要好。②脊髓损伤后 ,各组的CSEP波均消失 ,术后 2月除B组外C组和D组的波形均有不同程度的恢复 ,但潜伏期延长 ,其中C组比D组更长 ,两者之间有显著性差异。

关键词： nov基因神经干细胞移植功能恢复肾母细胞瘤过度表达基因神经干细胞脊髓损伤 SCI

nov基因与Ki-67、VEGF、p27和COX-2在肾透明细胞癌中的相关性

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山东大学学报（医学版） 2013年第10期51卷 29-32页

作者：解放刘帅刘征牛志宏山东大学附属省立医院泌尿外科济南250021

目的研究肾母细胞瘤过表达基因(nov/CCN3)在肾透明细胞癌(ccRCC)中与增殖细胞核抗原Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p27、环氧合酶2(COX-2)的相关性。方法用过表达nov质粒pEGFP-C1-nov转染人肾透明细胞癌细... 详细信息

目的研究肾母细胞瘤过表达基因(nov/CCN3)在肾透明细胞癌(ccRCC)中与增殖细胞核抗原Ki-67、血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期依赖性激酶抑制因子p27、环氧合酶2(COX-2)的相关性。方法用过表达nov质粒pEGFP-C1-nov转染人肾透明细胞癌细胞株786-O,实时定量PCR(RT-PCR)技术测定转染了过表达nov质粒的细胞(实验组)、转染了空载体的细胞(空载组)及未行质粒转染的786-O细胞(空白组)中Ki-67、p27、VEGF和COX-2 mRNA表达的差异。应用免疫组化染色法对组织芯片行nov及Ki-67、VEGF、p27、COX-2染色,得到量化资料并行相关性分析。结果 RT-PCR结果显示,实验组细胞与空白组细胞比较nov mRNA水平增高(Pnov的表达与Ki-67、VEGF的表达呈负相关(r分别为-0.686、-0.646,Pnov在肾透明细胞癌中对增殖和进展的作用可能与影响Ki-67、VEGF、p27、COX-2的表达相关。

关键词：肾透明细胞癌 nov基因 Ki-67 血管内皮生长因子 p27 环氧合酶2

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大鼠学习记忆能力与nov基因表达的关系

生理学报 2000年第4期52卷 290-294页

作者：苏炳银蔡文琴熊鹰张成岗 B.Perbal 第三军医大学组织胚胎学教研室重庆400038 第三军医大学生理学教研室重庆400038 Universite Paris Ⅶ ParisFrance

采用主动回避法进行大鼠学习记忆训练 ,选出学习成绩好和差的大鼠 ,用原位杂交、免疫细胞化学结合图像分析方法观察nov基因表达的差异。结果显示 ,novmRNA和nov蛋白阳性神经元主要分布于海马、扣带皮质和联合皮质锥体层、基底神经节和... 详细信息

采用主动回避法进行大鼠学习记忆训练 ,选出学习成绩好和差的大鼠 ,用原位杂交、免疫细胞化学结合图像分析方法观察nov基因表达的差异。结果显示 ,novmRNA和nov蛋白阳性神经元主要分布于海马、扣带皮质和联合皮质锥体层、基底神经节和下丘脑等脑区。好成绩组nov蛋白免疫反应最强 ,阳性细胞最多 ,差成绩组nov基因的表达比假性条件反射组的表达稍强。novmRNA的表达在各组之间无明显的差异。以上结果提示 ,nov基因可能参与学习记忆的调控过程 ,这种调控发生在nov蛋白翻译水平。

关键词： nov基因大鼠学习记忆

nov基因增强OECs促神经再生作用及其差异表达蛋白分离的研究

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nov基因增强OECs促神经再生作用及其差异表达蛋白分离的研究

作者：梁涛第三军医大学

学位级别：硕士

与周围神经系统(peripheral nervous system,PNS)的再生和功能恢复不同,中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤后不能再生。长期以来,研究者们试用了多种方法以促进中枢神经系统损伤后的再生,如给予神经生长因子、去除胶质瘢痕... 详细信息

与周围神经系统(peripheral nervous system,PNS)的再生和功能恢复不同,中枢神经系统(central nervous system,CNS)损伤后不能再生。长期以来,研究者们试用了多种方法以促进中枢神经系统损伤后的再生,如给予神经生长因子、去除胶质瘢痕、移植干细胞等。此外,基因治疗也是一种广泛应用于促CNS再生的方法,在这一过程中,一些新基因被发现有着很大的应用前景,肾母细胞瘤过度表达基因(Nephroblastoma Overexpression gene,nov)就是其中之一。nov是1991年发现的一种原癌基因,其所编码产物(nov蛋白)是一种胰岛素样生长因子(Insulin-like Growth Factor,IGF)结合蛋白(IGF- binding protein,IGFBPs),属于IGF家族的成员。有资料表明nov基因与动物中枢神经系统的损伤和修复之间存在一定的关系,可能参与CNS损伤后的再生和修复过程。近年,神经科学工作者在CNS损伤方面的研究中对又一种胶质细胞产生了极大的兴趣,这种被称作嗅球成鞘细胞(olfactory ensheathing cells , OECs)的胶质细胞是介于施万氏细胞和星型胶质细胞之间的一类细胞,在中枢和外周神经内可具有施万细胞类似的细胞内成髓鞘功能,在脊髓损伤和神经退行性病变中可诱导髓鞘生长。从OECs新功能的发现至今,它已经成为把胶质细胞和CNS再生相联系的一个热点,但是以OECs作为受体细胞携带目的基因的研究还少见报道。基因修饰的OECs移植治疗CNS损伤结合了OECs和nov的共同优点,具有研究价值。为了确定nov对OECs增殖分化的影响以及nov基因工程化OECs对CNS再生和功能修复的影响,把nov基因促进中枢的再生与嗅球成鞘细胞修复脊髓损伤作用结合起来,寻找一种修复中枢神经损伤的新方法,本文就此进行了系列研究.(1) 嗅球成鞘细胞体外取材培养与体外生长特性,细胞增殖,活性研究;(2)nov质粒扩增、转染和表达,观察nov对OECs增殖分化的作用;(3)nov基因转染前后OECs的双向电泳分析,寻找差异点,为后期差异蛋白鉴定打基础。希望转染后OECs恒定表达nov,通过OECs和nov的共同作用,可能为CNS再生修复提供更适合的微环境。主要结果如下: 1、倒置显微镜下,接种24小时后大部分OECs贴壁呈球状,周围有云状物质分布,培养3天后的OECs呈梭状,主要呈双极,三极,蹼状的生长锥样结构明显,2～14天的细胞纯度可达95%以上,且细胞纯度不随培养时间的延长而明显下降。 2、纯化后培养2天,细胞主要呈双极,三极,细胞走向基本一致,形态近似Schwann细胞,8天时细胞走向基本一致。 3、OECs免疫细胞化学染色及纯度检测:未纯化前培养8天,P75免疫反应细胞胞体较突起着色为深,细胞走向极为不一,纯化后培养2天的细胞几乎均呈阳性,胞膜着色较深,形态呈三角或条梭状,细胞走向不一,背景干净。 4、低温保存过的嗅鞘细胞复苏后生长良好,活性,形态呈梭形,与冻存前一致。活细胞数量达80%以上。 5、对pcDNA3.1-nov质粒扩增,对获得的cDNA测序,证明获得产物完全符合设计要求。在此基础上成功地将其转染到OECs细胞,用免疫细胞化学技术和 Western-blot方法检测到nov的表达。 6、与nov修饰的OECs联合培养背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)有许多DRG细胞向外迁移,细胞折光性强,突起较长而纤细,并形成复杂的网络。未修饰的OECs组只有少量的细胞迁移和突起生长,细胞迁移和突起生长都很局限。空白对照组DRG仅有细胞迁移。 7、利用双向电泳技术分离转染前后OECs表达的差异蛋白,为下一步差异蛋白鉴定提供线索。综上所述,嗅球成鞘细胞的生长受不同因素影响,细胞纯度不随培养时间的延长而明显下降。nov基因修饰嗅球成鞘细胞表达差异蛋白,为将来质谱鉴定差异蛋白及寻找新的再生因子提供线索。

关键词： nov基因嗅球成鞘细胞(OECs) 神经生长因子神经损伤施万氏细胞背根神经节双向电泳(2-DE)

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鸡肾癌nov基因亚克隆及其表达

武汉大学学报（自然科学版） 1994年第6期40卷 99-103页

作者：蒋达和李文鑫武汉大学生命科学学院武汉430072

采用ＤＮＡ重组技术将鸡肾癌ｎｏｖ基因的外显子４和部分外显子３、５的ｃＤＮＡ亚克隆于表达载体ｐＥＴ－３ｄ质粒中，并在大肠杆菌ＢＬ２１中诱导表达，免疫沉淀法和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明，ｎｏｖ基因表达的ＮＯＶ融合... 详细信息

采用ＤＮＡ重组技术将鸡肾癌ｎｏｖ基因的外显子４和部分外显子３、５的ｃＤＮＡ亚克隆于表达载体ｐＥＴ－３ｄ质粒中，并在大肠杆菌ＢＬ２１中诱导表达，免疫沉淀法和ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明，ｎｏｖ基因表达的ＮＯＶ融合蛋白分量约２．５×１０＾４，与序列推测的分子量基本相符。

关键词： nov基因基因表达融合蛋白免疫沉积肾肿瘤癌

nov基因真核表达载体的构建及在大鼠真皮多能干细胞中的表达

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中华神经医学杂志 2008年第4期7卷 353-356页

作者：刘雁平李露斯王涛徐文岳屈纪富第三军医大学西南医院神经内科重庆400038 第三军医大学西南医院急救部重庆400038 第三军医大学基础医学部病原生物学教研室重庆400038

目的构建肾母细胞瘤过度表达（nov）基因真核表达载体并检测其在真皮多能干细胞中的表达。方法利用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法，以新生大鼠大脑组织总RNA为模板，扩增出1l178bp的nov基因的cDNA编码区序列，然后用Hind Ⅲ和BamH... 详细信息

目的构建肾母细胞瘤过度表达（nov）基因真核表达载体并检测其在真皮多能干细胞中的表达。方法利用逆转录-多聚酶链反应（RT-PCR）方法，以新生大鼠大脑组织总RNA为模板，扩增出1l178bp的nov基因的cDNA编码区序列，然后用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切后定向克隆入真核表达载体pEGFP-N1质粒中，用脂质体法将重组质粒转染入大鼠真皮多能干细胞中，荧光显微镜观察转染产物．RT—PCR法检测转染细胞中nov基因表达。结果nov基因cDNA正确克隆到真核表达载体pEGFP-N1质粒中；重组质粒体外转染入大鼠真皮多能干细胞后，可见转染细胞有绿色荧光表达，转染细胞中检测到nov基因。结论构建成功nov基因重组质粒，并能在大鼠真皮多能干细胞中稳定表达，为nov基因及真皮多能干细胞的作用研究提供了有利的分子工具。

关键词： nov基因逆转录-多聚酶链反应基因克隆真皮多能干细胞

nov基因修饰神经干细胞移植促进脊髓损伤大鼠脊髓功能的恢复

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NOV基因修饰神经干细胞移植促进脊髓损伤大鼠脊髓功能的恢复