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作者：孙萌山西医科大学

学位级别：硕士

目的:本实验通过观察PM2.5水溶成分、脂溶成分及水溶和脂溶混合成分对大鼠离体肾动脉血管环静息张力的影响,对氯化钾(KCL)及血栓烷素(U46619)收缩血管,乙酰胆碱(Ach)和硝普钠(SNP)舒张血管作用的影响,探究PM2.5水溶成分和有机成分对大... 详细信息

目的:本实验通过观察PM2.5水溶成分、脂溶成分及水溶和脂溶混合成分对大鼠离体肾动脉血管环静息张力的影响,对氯化钾(KCL)及血栓烷素(U46619)收缩血管,乙酰胆碱(Ach)和硝普钠(SNP)舒张血管作用的影响,探究PM2.5水溶成分和有机成分对大鼠肾动脉的收缩-舒张反应的影响及其可能的作用机制。方法:采用蒸馏水或有机溶剂分别提取PM2.5的水溶成分和脂溶成分,经大鼠尾静脉分别注射PM2.5水溶成分、脂溶成分和混合成分,连续染毒10d。采用DMT和PowerLab系统记录大鼠肾动脉血管环的张力,血清学检测大鼠nos/no系统变化。观察:(1)与对照组比较, PM2.5各染毒组肾动脉血管环对KCl和U46619引起的收缩反应变化;(2)与对照组比较, PM2.5各染毒组肾动脉血管环对乙酰胆碱(Ach)和硝普钠(SNP)的舒张反应差异;(3)与对照组比较,PM2.5各染毒组的血清NO、AngⅡ、enos的含量及血清inos活性的变化。结果:(1)与对照组比较, PM2.5各染毒组加强KCl和U46619对肾动脉血管环引起的收缩反应,但无统计学意义(P>0.05)。(2)与对照组比较, PM2.5各染毒组均减弱乙酰胆碱(ACH)对肾动脉血管环的舒张作用(P0.05)。(4)与对照组比较,PM2.5各染毒组的血清NO含量均显著增高(Pnos含量显著降低(P>0.05),而水溶成分组和脂溶成分组无显著性差异;各染毒组血清inos活性均显著性增高(Pnos含量显著降低。(5)PM2.5水溶成分、脂溶成分及混合成分在体染毒的血清inos活性均显著性增高。(6)PM2.5水溶成分、脂溶成分及混合成分在体染毒的血清AngⅡ含量均显著性减少。(7)PM2.5各染毒组对血管的作用可能与该作用可能与PM2.5损伤内皮功能及血管内皮nos/no系统表达异常有关

关键词： PM2.5 肾动脉血管环收缩舒张 nos/no

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内源性HO/CO系统和nos/no系统在肝肺综合征发病中作用的实验研究

内源性HO/CO系统和NOS/NO系统在肝肺综合征发病中作用的实验研究

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作者：张黎童山西医科大学

学位级别：硕士

目的:本文旨在探讨HO/CO系统与nos/no系统在肝肺综合征发牛发展中的变化及作用,以及探讨两系统之间的相互作用。方法:采用复合因素致肝硬化模型。选用雄性Wistar大鼠,分别在饲养第0、4、6、8周末,动态观察HO/CO系统及nos/no系统的变化... 详细信息

目的:本文旨在探讨HO/CO系统与nos/no系统在肝肺综合征发牛发展中的变化及作用,以及探讨两系统之间的相互作用。方法:采用复合因素致肝硬化模型。选用雄性Wistar大鼠,分别在饲养第0、4、6、8周末,动态观察HO/CO系统及nos/no系统的变化。肝脏病理组织学观察确定肝硬化分期,肺脏病理组织学观察肝肺综合征的形成。免疫组织化学检测及图像分析观察肺脏HO-1(血红素加氧酶),enos(固有型NO合成酶),inos(诱导型NO合成酶)的动态表达;测定外周血浆中的LPS(内毒素)、ALT(丙氨酸氨基转移酶)、MDA(丙二醛)COHb(碳氧血红蛋白)含量以及肺组织匀浆中COHb,NO(一氧化氮)的动态变化。选用雄性Wistar大鼠,分别在饲养第4周末,使用CO抑制剂ZnPP,NO非特异抑制剂L-NAME及NO特异抑制剂AG干预,于6周末,8周末取样,通过肺脏血管扩张及细胞凋亡的观察,初步探讨HO/CO系统与nos/no系统在肝肺综合征中的作用及两系统间的相互关系。结果:1、肝硬化大鼠肝肺综合征模型建立:肝脏病理组织学观察结果证实,4周末为肝纤维化病变期,6周末为肝硬化病变早期,8周末为肝硬化病变期,此期肝细胞变性坏死较其它期严重。肺脏病理组织学观察结果证实6周末组可见水肿、出血、淤血、毛细血管扩张及巨噬细胞聚集等变化,于肝硬化晚期出现肺脏气体交换障碍,从而证明肝硬化动物发牛了肝肺综合征。2、肠源性内毒素血症(IETM)的形成:和正常组比较,血浆内毒素(LPS)水平在4、6、8周末各点呈递增趋势,于8周末时维持在较高水平,模型组各时间点与正常组比较结果均有统计学差异,P＜0.05。3、反映HO/CO系统有关结果表明:和正常组比较,血浆COHb逐渐增高,到第6周末时达到高峰,8周末时逐渐下降。肺组织匀浆COHb于4、6周逐渐增高,到第8周末时达到高峰。肺组织HO-1免疫组化结果与肺组织匀浆COHb一致。模型组各时间点,和正常组比较结果均有统计学差异,P＜0.05。使用HO-1抑制剂ZnPP后有效抑制CO的产生,通过肺血管外径检测,抑制剂6周,8周组与模型组同期相比肺血管扩张明显,结果有统计学差异,P＜0.05。说明肝硬化期CO有抑制肺血管扩张的作用。抑制剂8周组与模型8周组相比肺组织细胞凋亡增加,结果有统计学差异,P＜0.05。表明CO在肝硬化晚期对肝脏细胞有保护作用。4、反映nos/no系统有关结果表明:和正常组比较,肺组织匀浆NO逐渐增高。肝脏enos和inos的免疫组化结果表明,随着肝脏病变加重,由enos合成的NO在4、6周呈递增趋势,6周末下降;由inos合成的NO在4、6、8周呈递增趋势,8周上升至高峰。使用inos抑制剂AG后于第6周AG组充分抑制肺组织血管扩张,nos非特异抑制剂L-NAME组与模型组无明显差异。第8周AG组与L-NAME组的肺血管均较模型组明显扩张。表明肝硬化早期inos诱导产生的NO,促进肺血管扩张;肝硬化晚期NO抑制肺组织毛细血管的再生。第8周与模型组相比抑制剂组肺细胞凋亡减少,AG组更加明显,结果有统计学差异,P＜0.05,表明NO在肝硬化晚期对肝脏细胞的损伤作用5、反映nos/no系统对HO/CO系统作用有关结果表明:使用inos抑制剂AG与nos非特异抑制剂L-NAME后于第6、8周充分抑制血浆、肺组织CO的产生,结果有统计学差异,P＜0.05。实验表明在肝硬化早期及晚期肺组织局域NO促进CO的产生。6、反映HO/CO系统对nos/no系统作用有关结果表明:使用HO.1抑制剂ZnPP后于第6、8周充分抑制血浆、肺组织NO的产牛,结果有统计学差异,P＜0.05。实验表明在肝硬化早期及晚期肺组织局域CO促进NO的产生。1、肝硬化大鼠伴有IETM,实验提示IETM与TNF-a的增高密切相关。血浆LPS与血浆MDA和肺组织COHb、NO含量相关分析结果提示,IETM可通过TNF-a的激活促进HO-1及nos酶的分泌和合成增多,使肺组织局域CO及NO增加。增加的CO发挥抑制肺部血管异常扩张,抑制肺组织细胞的坏死;而增加的NO有促进肺部血管异常扩张,促进了肺组织细胞坏死的作用。2、分析HO-1抑制剂组及nos抑制剂组肺组织匀浆NO与COHb含量,可以看出肝硬化肝肺综合征时CO与NO二者发挥着相辅相成的作用。

关键词：肝肺综合征 IETM nos/no HO/CO

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人参皂苷Rb1调节脑微血管nos/no改善脑细胞膜通透性

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现代生物医学进展 2019年第8期19卷 1430-1435页

作者：马琪张小玲王春亚郭蕾赵玉杰侯彦丽骆燕妮王小闯西安交通大学第二附属医院重症医学科陕西西安710014

目的:探究人参皂苷Rb1在脂多糖(LPS)诱导的人脑微血管细胞模型中对脑细胞膜通透性的影响。方法:采用噻唑蓝比色法(MTT)及乳酸脱氢酶(LDH)释放检测不同浓度人参皂苷Rb1对LPS刺激人脑微血管内皮细胞系(HBMEC)存活率的影响;采用EVOM法检测H... 详细信息

目的:探究人参皂苷Rb1在脂多糖(LPS)诱导的人脑微血管细胞模型中对脑细胞膜通透性的影响。方法:采用噻唑蓝比色法(MTT)及乳酸脱氢酶(LDH)释放检测不同浓度人参皂苷Rb1对LPS刺激人脑微血管内皮细胞系(HBMEC)存活率的影响;采用EVOM法检测HBMEC细胞通透性;采用Griess法、ELISA法及DAF-FM DA荧光探针分别检测NO、ONOO^-含量及enos、inos活性;Western blot法检测p-enos(ser1177)、inos蛋白的表达水平。结果:与正常对照组比较,LPS(5μg/m L)可明显降低HBMEC细胞存活率(Pnos (ser1177)蛋白的表达水平,而显著升高inos蛋白表达水平(Pnos(ser1177)蛋白的表达水平,降低inos蛋白的表达水平(Pnos活性,升高enos活性继而减少NO水平及ONOO^-含量,显著降低LPS导致的脑细胞膜通透性升高。

关键词：人参皂苷Rb1 人脑微血管内皮细胞细胞膜通透性 nos/no

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PM_(2.5)不同成分在体染毒对大鼠肾血管环收缩-舒张反应及nos/no的影响

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中西医结合心脑血管病杂志 2011年第5期9卷 564-566页

作者：孙萌吕吉元张明升张涌庞卫乾山西医科大学山西医科大学药理教研室

目的探究PM2.5水溶成分和脂溶成分对大鼠肾动脉收缩-舒张反应的影响及其作用机制。方法采用蒸馏水或有机溶剂分别提取PM2.5的水溶成分和脂溶成分。将大鼠随机分为3组,分别尾静脉注射PM2.5水溶成分、脂溶成分和混合成分,连续染毒10 d。采... 详细信息

目的探究PM2.5水溶成分和脂溶成分对大鼠肾动脉收缩-舒张反应的影响及其作用机制。方法采用蒸馏水或有机溶剂分别提取PM2.5的水溶成分和脂溶成分。将大鼠随机分为3组,分别尾静脉注射PM2.5水溶成分、脂溶成分和混合成分,连续染毒10 d。采用DMT和PowerLab系统记录大鼠肾动脉血管环的张力;血清学检测大鼠nos/no系统变化。结果与对照组比较,PM2.5各染毒组加强氯化钾(KCl)和U46619对肾动脉血管环的收缩反应,但无统计学意义(P>0.05),对乙酰胆碱(Ach)的舒张作用减弱(Pnos含量显著降低(Pnos活性均显著性增高(P<0.05)。结论 PM2.5水溶成分、脂溶成分及混合成分在体染毒加强KCl和U46619对肾动脉血管环的收缩反应,无统计学意义;减弱Ach对肾血管环的舒张效应,该作用可能与PM2.5损伤内皮功能有关。

关键词： PM2.5 肾动脉血管环收缩舒张 nos/no

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逍遥散及其组方抗抑郁作用与5-HT1A/2A分子机制的实验研究

逍遥散及其组方抗抑郁作用与5-HT1A/2A分子机制的实验研究

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作者：张崇燕成都中医药大学

学位级别：硕士

逍遥散出自宋代《太平惠民和剂局方》,全方由柴胡、白芍、当归、白术、茯苓、薄荷、生姜、甘草8味药组成,具有疏肝解郁、养血健脾之功效。近年来关于逍遥散用于抑郁症治疗的临床、实验报道逐年增多,但对于其抗抑郁作用的组方研究却鲜有... 详细信息

逍遥散出自宋代《太平惠民和剂局方》,全方由柴胡、白芍、当归、白术、茯苓、薄荷、生姜、甘草8味药组成,具有疏肝解郁、养血健脾之功效。近年来关于逍遥散用于抑郁症治疗的临床、实验报道逐年增多,但对于其抗抑郁作用的组方研究却鲜有报道。本课题基于前期研究基础,依据逍遥散组方原理,将其拆方为君药组与去君药组(柴胡、全方去柴胡)、臣药组与去臣药组(当归伍白芍、全方去归芍)、君臣药组与去君臣药组(柴胡+归芍、全方去柴胡+归芍),首先采用小鼠自主活动、小鼠悬尾实验、小鼠强迫游泳实验、大鼠慢性温和不可预知应激(CUMS)模型行为学实验,对逍遥散及其组方的抗抑郁作用进行评价;其次采用8-OH-DPAT诱导小鼠5-HT行为症候群实验、DOI诱导的小鼠甩头实验、实时荧光定量PCR(染料法)测定CUMS模型大鼠海马、皮质5-HT1A/2A受体mRNA表达,以及测定CUMS模型大鼠血清nos、NO水平和肝脏MDA、SOD水平来探讨逍遥散及其组方的抗抑郁作用机制,以期进一步明确逍遥散抗抑郁作用的主要配伍药物,为精简复方提供一定的实验依据,另外,从分子水平进一步完善其抗抑郁作用的5-HT系统调控机制。结果表明：1.逍遥散与其君药、臣药、君臣药配伍组具有良好的抗抑郁作用。(1)逍遥散、柴胡、归芍、柴胡+归芍能显著缩短小鼠悬尾实验、小鼠强迫游泳实验中的不动时间,并在有效剂量下,不影响开场实验中小鼠的活动次数和站立次数;(2)连续给药5周,逍遥散、柴胡、柴胡+归芍不同程度地改善CUMS程序对模型大鼠在体重、糖水偏爱以及活动量上造成的消极影响。2.逍遥散与其君药、臣药、君臣药配伍组的抗抑郁作用与影响5-HT1A／2A受体功能有关。(1)逍遥散、柴胡、归芍、柴胡+归芍能够提高8-OH-DPAT诱导小鼠5-HT行为症候群四项实验指标(躯体平展、后肢外展、竖尾、震颤)的评分;(2)柴胡单次给药可明显减少DOI诱导的小鼠甩头次数;连续给药7d,柴胡、柴胡+归芍可明显降低DOI诱导的小鼠甩头次数;(3)连续给药5周,归芍对CUMS模型大鼠海马5-HT1A受体mRNA表达呈现提高趋势,而柴胡+归芍则对皮质5-HT2A受体mRNA的表达呈现降低趋势。3.逍遥散与其君药、臣药、君臣药配伍组的抗抑郁作用与影响nos/no通路及抗氧化作用有关。(1)连续给药5周,逍遥散、柴胡、归芍、柴胡+归芍对CUMS模型大鼠血清nos活力降低具有明显对抗效应,能提高模型大鼠血清NO含量;(2)连续给药5周,逍遥散、柴胡+归芍能明显降低CUMS模型大鼠肝脏MDA含量,对SOD活性有一定提高趋势。综上,逍遥散与其君药、臣药、君臣药配伍组具有良好的抗抑郁作用,可以认为柴胡、当归、白芍为逍遥散发挥抗抑郁作用的主要配伍药物,其机制可能与影响脑内5-HT1A／2A受体功能、提高nos活力、升高NO含量及抗氧化作用有关,研究结果为逍遥散复方的进一步精简提供了药理学实验依据。

关键词：逍遥散组方研究抗抑郁 5-HT1A/2A受体 nos/no 抗氧化

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