检索结果-南通市图书馆

中国老年学杂志 2014年第19期34卷 5614-5617页

作者：王大鹏李强哈尔滨医科大学附属第二医院内分泌代谢病科黑龙江哈尔滨150086

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生物体内多种氧化还原反应的重要辅酶,也是许多NAD消耗酶的底物。烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(nmnat)是催化NAD生物合成的关键酶,它催化这一可逆反应向前进行,对维持体内NAD水平的稳态至关重要。近年来的研究... 详细信息

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生物体内多种氧化还原反应的重要辅酶,也是许多NAD消耗酶的底物。烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶(nmnat)是催化NAD生物合成的关键酶,它催化这一可逆反应向前进行,对维持体内NAD水平的稳态至关重要。近年来的研究发现,在nmnat催化下的NAD生物合成水平,不仅对于SIRT1的活性有重要影响,还能在沉默信息调节因子1(SIRT1)介导下改善生物体内的葡萄糖代谢。

关键词： nmnat NAD SIRT1

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

心脏nmnat过表达联合耐力运动对果蝇高脂膳食诱发脂毒性心肌症的影响

引用

首都体育学院学报 2020年第1期32卷 87-96页

作者：文登台郑澜陆凯刘宪楚后文其湖南师范大学体适能与运动康复湖南省重点实验室湖南长沙410012 鲁东大学山东烟台264025

利用UAS/hand-gal4系统构建果蝇心脏nmnat基因特异性过表达,研究心脏nmnat基因过表达联合耐力运动对高脂膳食诱发脂毒性心肌症的影响,并分析其分子机制。方法:雄性w^1118和nmnatUAS系果蝇分别与雌性hand-Gal4杂交,收集F1代心脏nmnat正... 详细信息

利用UAS/hand-gal4系统构建果蝇心脏nmnat基因特异性过表达,研究心脏nmnat基因过表达联合耐力运动对高脂膳食诱发脂毒性心肌症的影响,并分析其分子机制。方法:雄性w^1118和nmnatUAS系果蝇分别与雌性hand-Gal4杂交,收集F1代心脏nmnat正常表达(hand>w^1118)和过表达(hand>nmnat)处女蝇,饲养至15 d后开始进行耐力运动(E)和高脂膳食(HFD),并分为hand>w^1118、hand>w^1118+E、hand>w^1118+HFD、hand>w^1118+HFD+E、hand>nmnat、hand>nmnat+E、hand>nmnat+HFD、hand>nmnat+HFD+E共8组,每组410只。ELISA检测心脏TAG、NAD+、SIR2蛋白去乙酰化、SOD活力和MDA水平,qRT-PCR检测心脏相关基因mRNA表达,M-mode检测心脏功能情况。结果:hand>w^1118+HFD+E果蝇心脏的nmnat、dFoxo、bmm表达、NAD+水平、SIR2去乙酰化、SOD活力、缩短分数高于hand>w^1118+HFD(Pw^1118+HFD(Pnmnat果蝇心脏各指标与hand>nmnat+HFD相比较未见显著差异(P>0.05);hand>nmnat+HFD+E果蝇心脏的nmnat、dFoxo、bmm表达、心脏NAD+水平、SIR2去乙酰化、SOD活力、心脏缩短分数高于hand>nmnat+HFD(Pnmnat+HFD(Pnmnat过表达和耐力运动均能抵抗果蝇高脂膳食诱发的心脏脂质过度堆积、氧化损伤、减弱心脏收缩能力和增加纤维性振颤,其分子机制与心脏nmnat/NAD+/SIR2/dFoxo通路活性增强有关。心脏nmnat基因过表达联合耐力运动能更好地降低脂毒性心肌症的发生概率,其机制与二者联合对心脏nmnat/NAD+/SIR2/dFoxo通路活性上调的叠加作用有关。

关键词：耐力运动高脂膳食脂毒性心肌症 nmnat

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

NAD＋ Accumulation during Pollen Maturation in Arabidopsis Regulating Onset of Germination

引用

Molecular Plant 2013年第1期6卷 216-225页

作者： Shin-nosuke Hashida Hideyuki Takahashi Kentaro Takahara Maki Kawai-Yamada Kazuyoshi Kitazaki Kazuhiro Shoji Fumiyuki Goto Toshihiro Yoshihara Hirofumi Uchimiya Institute of Molecular and Cellular Biosciences (IMCB) University of Tokyo 1-1-1 Yayoi Bunkyo-ku Tokyo 113-0032 Japan Environmental Science Research Laboratory Central Research Institute of Electric Power Industry (CRIEPI) 1646 Abiko Chiba 270-1194 Japan Iwate Biotechnology Research Center (IBRC) Kitakami Iwate 024-0003 Japan Department of Environmental Science and Human Engineering Saitama University Sakura-ku Saitama 338-0825 Japan Institute for Environmental Science and Technology Saitama University 255 Shimo-Okubo Sakura-ku Saitama 338-8570 Japan

Although the nicotinamide nucleotides NAD（H） and NADP（H） are essential for various metabolic reactions that play major roles in maintenance of cellular homeostasis, the significance of NAD biosynthesis is not well under- stood. Here, we investigated the dynamics of pollen nicotinamide nucleotides in response to imbibition, a representative germination cue. Metabolic analysis with capillary electrophoresis electrospray ionization mass spectrometry revealed that excess amount of NAD＊ is accumulated in freshly harvested dry pollen, whereas it dramatically decreased immedi- ately after contact with water, importantly, excess of NAD~ impaired pollen tube growth. Moreover, NAD~ accumulation was retained after pollen was imbibed in the presence of NAD^-consuming reaction inhibitors and pollen germination was greatly retarded. Pollen deficient in the nicotinate/nicotinamide mononucleotide adenyltransferase （nmnat） gene, encoding a key enzyme in NAD biosynthesis, and a lack of NAD＊ accumulation in the gametophyte, showed precocious pollen tube germination inside the anther Iocule and vigorous tube growth under high-humidity conditions. Hence, the accumulation of excess NAD＊ is not essential for pollen germination, but instead participates in regulating the timing of germination onset. These results indicate that NAD＋ accumulation acts to negatively regulate germination and a decrease in NAD＋ plays an important role in metabolic state transition.

关键词： Arabidopsis nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) NAD biosynthesis NAD consumption nmnat pollengermination pollen longevity.

来源：

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶介导产生的NAD+在调节灵芝三萜合成和纤维素酶活性中的作用

烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶介导产生的NAD+在调节灵芝三萜合成和纤...

引用

作者：王胜利南京农业大学

学位级别：硕士

灵芝（Ganoderma lucidum）是一种名贵的药用真菌,具有十分重要的药理功能。灵芝三萜（又称灵芝酸Ganoderic acids,GAs）是灵芝中重要的活性成分。目前灵芝的基础研究十分薄弱,限制了灵芝产业的发展。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamid... 详细信息

灵芝（Ganoderma lucidum）是一种名贵的药用真菌,具有十分重要的药理功能。灵芝三萜（又称灵芝酸Ganoderic acids,GAs）是灵芝中重要的活性成分。目前灵芝的基础研究十分薄弱,限制了灵芝产业的发展。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide,NAD+）是一种重要的多功能分子。烟酰胺单核苷酸腺苷转移酶（nicontinamid mononucleotide adenylyl transferase,nmnat）是 NAD+合成途径中的关键酶。大量的研究表明,nmnat介导产生的NAD+在调控代谢与信号方面发挥着十分重要的作用。然而,担子菌中NAD+功能的报道却很少。首先,本研究发现热胁迫（heat stress,HS）、乙烯（ethylene）、茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）以及水杨酸（salicylic acid,SA）处理能使 WT（wild type）菌丝中NAD+的含量分别增加约90%、150%、74%和42%,nmnat的表达量分别增加约283%、442%、133%和 92%。与此同时,外源 150μMnmnat 抑制剂（gallotannin,GT）处理能使菌丝GAs的含量降低约30%,80μMnmnat激活剂（Epigallocatechin gallate,EGCG）和5 mM NAD+处理能使WT中GAs的含量分别增加约33%和42%。于是,本研究在灵芝中鉴定并克隆了nmnat基因,并命名为Glnmnat。该基因的cDNA全长为891 bp,编码296个氨基酸,蛋白大小为32.89 kDa,等电点是6.05。进化树和结构域分析发现灵芝的nmnat蛋白与其它担子菌的nmnat蛋白亲缘关系更近,且存在2个保守的腺苷三磷酸（adenosine triphosphate,ATP）结合位点和1个保守的色氨酸。其次,本研究构建了nmnat沉默效率分别为91%和86%的沉默菌株nmnati5和nmnati19以及nmnat表达量分别为5.5倍和6.2倍的过表达菌株OE::nmnat4和OE::nmnat19。当沉默灵芝nmnat时,GAs的含量降低约30%;而当过表达灵芝nmnat,GAs的含量则升高约40%。随后,我们发现nmnat沉默菌株中糖酵解（Embden-Meyerhof-Parnas,EMP）和三羧酸循环（tricarboxylic acid cycle,TCA）关键酶的活性和ATP的含量显著降低、腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）的磷酸化水平显著升高,nmnat过表达菌株中正好与之相反。进一步,在nmnat沉默菌株中外源添加 2 mM AMPK的抑制剂处理时,其GAs含量恢复到WT水平。在nmnat过表达菌株中外源添加2μM AMPK激活剂处理时,其GAs含量也恢复到WT水平。最后,本研究构建了nmnat-AMPK共沉默菌株,外源添加NAD+处理时,其GAs含量没有明显的变化。这些结果表明nmnat介导产生的NAD+能通过AMPK调控GAs的生物合成。最后,本研究还发现nmnat沉默菌株中活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）的含量降低约40%,钙离子（Ca2+）的浓度降低约50%;nmnat过表达菌株中ROS的含量升高约50%,Ca2+的浓度升高约50%。这些结果表明nmnat介导产生的NAD+能影响胞内ROS和Ca2+的稳态。此外,我们还发现nmnat沉默菌株中内切葡聚糖酶（carboxymethyl cellulase,CMCase）的活性降低约 40%,外切葡聚糖酶（pNPCase）的活性降低约70%;nmnat过表达菌株中CMCase的活性升高约60%,pNPCase的活性升高约100%。进一步,在nmnat沉默菌株中外源添加5 mM氯化钙（calcium chloride,CaC12）处理时,其CMCase和pNPCase的活性显著升高;在Anmnat过表达菌株中外源添加5 mM氯化镧（lanthanum chloride,LaCl3）处理时,其CMCase和pNPCase的活性显著降低。该结果表明nmnat介导产生的NAD+能通过Ca2+来调控纤维素酶的活性。

关键词：灵芝 NAD+ nmnat 灵芝三萜纤维素酶

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Nampt/Visfatin酶活性筛选模型的建立

Nampt/Visfatin酶活性筛选模型的建立

引用

作者：吕小群第二军医大学

学位级别：硕士

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)在各种细胞生理过程中起着至关重要的作用,对基因表达、DNA修复、钙离子动员、应激、凋亡、代谢、增殖、老化、寿命、内分泌等方面表现出深刻的影响,NAD的生物能量状态甚... 详细信息

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(Nicotinamide adenine dinucleotide, NAD)在各种细胞生理过程中起着至关重要的作用,对基因表达、DNA修复、钙离子动员、应激、凋亡、代谢、增殖、老化、寿命、内分泌等方面表现出深刻的影响,NAD的生物能量状态甚至决定了细胞的生死存亡,因而参与NAD生物合成和代谢的酶也成为各种疾病的药物发现中极具吸引力的靶标。在哺乳动物中,Nampt和nmnat是重要的NAD合成酶,烟酰胺NAM在Nampt催化作用下转化为烟酰胺单核苷酸NMN,随后NMN在nmnat作用下合成NAD。哺乳动物细胞中80%的NAD由该途径合成。我们的实验证明,BL21-CondonPlus (DE3)-RIL为nmnat表达适宜的宿主菌,可显著改善nmnat在大肠杆菌系统的表达效率。进一步对其诱导表达的温度、时间、IPTG浓度以及培养基的考察,确定了nmnat重组蛋白表达的最优条件:在2×YT培养基(37ug/ml氯霉素和75ug/ml卡那霉素)中于28℃、0.5mM IPTG诱导8h。利用Ni-NTA亲和层析柱纯化并获得具有较高纯度的目的蛋白,通过酶联荧光法测得nmnat具有较好的酶活性。nmnat的酶活性在肿瘤化学治疗、能量代谢和信号通路中起重要作用,然而目前极少有nmnat的酶活性调控分子报道。该部分的工作为我们筛选nmnat的活性调控分子奠定了一定基础。 Nampt是哺乳动物NAD生物合成途径的限速酶,具有促血管生长、抗细胞凋亡、参与机体炎症应答、促进多种细胞分化成熟等生理功能,是防治心脑血管疾病、癌症的新靶标。我们从原核大肠杆菌系统中成功表达并纯化得到Nampt重组蛋白,并建立了Nampt酶活性检测方法。酶产物NMN经过两步简单的化学反应转化为有荧光的衍生物,可在激发波长382nm、发射波长445nm检测到最大荧光信号。通过对检测反应各步骤的反应温度、时间,以及一系列Nampt酶学特性的分析,优化Nampt的活性检测方法,建立了Nampt的高通量筛选模型。模拟高通量筛选过程,统计数据表明加样过程整块96孔板的CV值为3.0%0.5,说明筛选过程合格,满足高通量筛选要求。为验证该筛选模型,我们对本实验室现有的包括Nampt抑制剂FK866在内的84个小分子化合物进行初筛,通过设计对照反应组进行复筛排除假阳性结果,确定FK866、zl-1、zl-3和单宁酸为有效的活性化合物,进一步测定它们的半抑制常数IC50值依次为0.9nM、17.8uM、6.72uM和1.3uM。高通量筛选是新药发现的重要手段之一,我们首次建立了Nampt酶活性筛选平台,期望利用该平台筛选出有效的Nampt酶活性调控分子,为癌症、脑卒中防治的新药研发提供先导化合物,促进Nampt的基础医学研究;同时为Nampt酶调控研究提供探针分子,促进Nampt的生理功能研究。

关键词： Nampt nmnat 重组蛋白高通量筛选酶活性

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：