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nk/t细胞淋巴瘤患者外周血EB病毒检测价值分析

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中国实验血液学杂志 2017年第2期25卷 460-464页

作者：张静岳磊李颖璐南阳医学高等专科学校第一附属医院检验科河南南阳473000 南阳医学高等专科学校第一附属医院肿瘤内科河南南阳473000

目的:探讨nk/t细胞淋巴瘤患者外周血EB病毒的检测价值。方法:检测85例nk/t细胞淋巴瘤患者EB病毒阳性情况以及EBV DNA载量,并分析EB病毒阳性与临床分期、短期预后、远期预后的相关性。结果:nk/t细胞淋巴瘤患者EB病毒阳性率较高,为80.0%;... 详细信息

目的:探讨nk/t细胞淋巴瘤患者外周血EB病毒的检测价值。方法:检测85例nk/t细胞淋巴瘤患者EB病毒阳性情况以及EBV DNA载量,并分析EB病毒阳性与临床分期、短期预后、远期预后的相关性。结果:nk/t细胞淋巴瘤患者EB病毒阳性率较高,为80.0%;外周血白细胞EBV DNA拷贝数明显高于外周血血浆EBV DNA拷贝数(P细胞EBV DNA拷贝数与外周血血清EBV DNA拷贝数并无统计学差异(P>0.05);外周血血浆与外周血血清EBV DNA拷贝数并无统计学差异(P>0.05);EBV+组患者Ann Arbor分期Ⅰ-Ⅱ期患者所占比例明显低于EBV-组(Pnk/t细胞淋巴瘤和评估患者预后的参考指标,有一定的临床应用价值。

关键词： nk/t细胞淋巴瘤 EB病毒外周血EB病毒 EB病毒检测

nk/t细胞淋巴瘤的病理组织学、免疫表型及基因研究

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中华血液学杂志 2003年第10期24卷 505-509页

作者：钟博南张晓华李敏曹海光李宁刘春雨顾依群高子芬北京大学病理系 100083 天津市第一中心医院北京市和平里医院

目的　筛选高效、方便、经济的对nk/t细胞淋巴瘤更进一步分类与诊断的检测方法。方法　收集了诊断为nk/t细胞淋巴瘤的 34例患者石腊包埋标本 ,2 7例发生于结外 ,7例发生在淋巴结。用多种抗体研究其免疫表型。EB病毒EBER探针原位杂交方... 详细信息

目的　筛选高效、方便、经济的对nk/t细胞淋巴瘤更进一步分类与诊断的检测方法。方法　收集了诊断为nk/t细胞淋巴瘤的 34例患者石腊包埋标本 ,2 7例发生于结外 ,7例发生在淋巴结。用多种抗体研究其免疫表型。EB病毒EBER探针原位杂交方法检测病毒感染。PCR方法检测t细胞受体β和γ基因的克隆性重排。结果　在 34例结外淋巴瘤患者中 ,18例CD56阳性 ,16例tIA 1阳性。2例皮肤淋巴瘤患者中所有的瘤细胞Ki 6 7均阳性。在EB病毒RNA检测中 ,12例发生于上呼吸消化道的病例阳性 ,包括鼻部的 9例 ,以及鼻外的 3例。同样在 2例胃肠道淋巴瘤及 1例皮肤淋巴瘤患者中检测到EBER。 2 2例上呼吸消化道淋巴瘤患者中有 2例检测到了tCRβ或γ基因克隆性重排 ,所有胃肠道和皮肤淋巴瘤患者均检测到了tCR基因重排。 2例其他部位结外淋巴瘤及 7例结内淋巴瘤患者中有 5例显示tCR基因的克隆性重排。结论　大多数上呼吸消化道nk/t细胞淋巴瘤起源于nk细胞 ,只有一小部分为t细胞来源。然而 ,在皮肤及胃肠道中 ,nk样t细胞肿瘤更多见。在淋巴结中 ,nk细胞淋巴瘤很少。由于nk及nk样t细胞淋巴瘤的组织学改变相似 ,在进行nk细胞标志物、细胞毒性颗粒蛋白检测的同时必须检测tCR基因重排才会得到准确诊断。tCR的基因重排检测仍是鉴别nk和nk?

关键词： nk/t细胞淋巴瘤病理组织学免疫表型基因研究

nk/t细胞淋巴瘤基因组中EBV DNA整合检测及分析

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中国肿瘤临床 2018年第23期45卷 1194-1200页

作者：王欣张旭东陈清江王冠男胡俊霞吴少璇马咪静尹美凤杨万秋董萌丁梦杰张明智朱利楠郑州大学第一附属医院肿瘤科郑州市450052 郑州大学第一附属医院淋巴瘤诊疗中心郑州市450052 郑州大学第一附属医院病理科郑州市450052 新乡医学院第三附属医院肿瘤科

目的:明确nk/t细胞淋巴瘤(nk/t cell lymphoma,nktCL)基因组中是否存在EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)DNA整合,初步分析nktCL细胞系基因组中EBV DNA整合信息。方法:利用PCR法扩增EBV DNA和原位杂交法检测EBER表达,验证由郑州大学第一... 详细信息

目的:明确nk/t细胞淋巴瘤(nk/t cell lymphoma,nktCL)基因组中是否存在EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)DNA整合,初步分析nktCL细胞系基因组中EBV DNA整合信息。方法:利用PCR法扩增EBV DNA和原位杂交法检测EBER表达,验证由郑州大学第一附属医院生物样本库提供的5例EBV(+)及4例EBV(-)nk/t样本EBV感染情况。测序全基因组DNA样本并进行生物信息学分析。利用全基因组序列比对捕获EBV整合序列;使用Blast比对样本EBV fasta文件与EBV fasta库。采用CRESt软件提取softclip reads,过滤paired reads并对过滤后的reads进行染色体分布的统计。使用IGV比对染色体部分区域reads分布情况,采用PCR法扩增EBV DNA高频整合区域并行sanger测序。结果:5例EBV(+)nk/t样本中均检测出EBV DNA和EBER表达,4例EBV(-)nk/t样本则未能检出。样本的测序深度、覆盖深度、覆盖率和比对率均满足后续研究要求。比对结果显示捕获的序列为病毒序列。EBV(+)nktCL细胞系Snk、YtS和EBV(+)鼻腔NtKCL组织的reads数目最多,且在2号染色体上呈非随机性富集。chr2:30234084-30234483 400 bp区域存在EBV DNA整合,并导致chr2p23.1位点的插入缺失。结论:EBV(+)nktCL细胞在chr2p23.1位点存在EBV DNA的高频整合,提示可能影响相关基因表达。

关键词： nk/t细胞淋巴瘤 EBV DNA整合生物信息学分析基因表达

nk/t细胞淋巴瘤患者外周血PD-1/PD-L1表达水平与预后关系的研究

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NK/T细胞淋巴瘤患者外周血PD-1/PD-L1表达水平与预后关系的研究

作者：于欣玫四川大学

学位级别：硕士

目的:nk/t细胞淋巴瘤(nk/t cell lymphoma,nktCL)属于少见类型非霍奇金淋巴瘤,其发病率存在明显地域差异性,东亚地区(如我国)发病率明显高于欧美地区。nk/t细胞淋巴瘤具有一些不同于B细胞淋巴瘤的特点,如好发于结外、与EB病毒呈高度相关... 详细信息

目的:nk/t细胞淋巴瘤(nk/t cell lymphoma,nktCL)属于少见类型非霍奇金淋巴瘤,其发病率存在明显地域差异性,东亚地区(如我国)发病率明显高于欧美地区。nk/t细胞淋巴瘤具有一些不同于B细胞淋巴瘤的特点,如好发于结外、与EB病毒呈高度相关性,其侵袭性高、进展快的疾病特点严重限制了患者的生存时间,且目前并无标准治疗方案。故寻找精准合适的预后因子,早期对患者进行危险分层显得尤为重要。PD-1/PD-L1作为重要的免疫检查点,主要表达于免疫细胞或肿瘤细胞膜上。其负性调控t淋巴细胞的增殖和活性,帮助肿瘤细胞逃避免疫监视,从而有助于肿瘤生长,故其表达情况可能与患者预后相关。课题组前期实验对nk/t细胞淋巴瘤患者的外周血从多个层面检测了PD-1/PD-L1表达情况,本研究进一步探讨其表达情况与治疗反应率、复发/难治和预后的关系。材料和方法:1.研究对象为前期实验纳入的45例经病理证实确诊为nktCL的患者。2.课题组前期实验已测得上述病例外周血CD4+和CD8+t细胞PD-1蛋白(PD-1/CD4,PD-1/CD8)表达水平、外周血单个核细胞(PBMC)内PD-1和PD-L1 mRNA表达情况及血浆可溶性PD-L1蛋白(sPD-L1)水平;收集患者初诊时的临床资料(基本信息、一般情况、实验室检查、病理资料、影像学资料)和治疗情况(化疗方案、是否联合放疗、是否使用其它特殊药物等);通过住院系统、门诊系统及电话随访患者治疗反应、疾病进展、是否更换治疗方式、生存情况等。3.应用ROC曲线、Xtile、中位数确定外周血PD 1/PD-L1表达的临界值,从而分为高、低表达组;采用卡方检验评估各高、低表达组与中期治疗反应率和是否复发/难治的关系;采用Kaplan-Miere进行生存分析并行log-rank检验,比较各临床特征、治疗方式、中期疗效评估及外周血PD-1/PD-L1表达情况对总体生存(OS)和无进展生存(PFS)的影响,预后多因素分析采用Cox 比例风险回归模型。结果:***患者中期评估治疗总体反应率(overall response rate,ORR)的比较:外周血PD-1/CD8高表达组(20/22=90.9%)ORR优于低表达组(14/23=60.9%)(P=0.046),而外周血 PD-1/CD4、PBMC 的 PD-1/PD-L1 mRNA、sPD-L1的高表达组和低表达组ORR差异均无统计学意义。***-L1高表达组(9/20=45%)的患者复发/难治的比例高于低表达组(2/25=8%)(P=0.012);PBMC 的 PD-L1 mRNA 高表达组(5/9=56%)的患者复发/难治的比例高于低表达组(6/36=17%)(P=0.046)。而PD-1/CD4、PD-1/CD8和PBMC的PD-1 mRNA高、低表达组的患者间复发/难治的比例差异无统计学意义(P>0.05)。***-Miere生存分析显示,sPD-L1高表达组的2年总体生存(overall survival,OS)和无进展生存(progression-free survival,PFS)(50%,47.1%)劣于低表达组(96%,95.8%),P 值分别为 0.001,t细胞PD-

关键词： nk/t细胞淋巴瘤总体反应率总体生存无进展生存预后外周血 PD-1 PD-L1

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nk/t细胞淋巴瘤累及肺及肠道病变一例

中华核医学与分子影像杂志 2017年第8期37卷 500-501页

作者：潘青青罗亚平中国医学科学院、北京协和医学院北京协和医院核医学科 10073

患者男,42岁,因发热2个月余就诊,最高体温 38.0 ℃,有时伴畏寒、寒战.血常规检查：白细胞17（4~10;括号中为正常参考值,下同）×10^9/L,血红蛋白及血小板、肝肾功能、血红细胞沉降率正常.抗核抗体、抗可提取性核抗原、抗中性粒细胞胞质... 详细信息

患者男,42岁,因发热2个月余就诊,最高体温 38.0 ℃,有时伴畏寒、寒战.血常规检查：白细胞17（4~10;括号中为正常参考值,下同）×10^9/L,血红蛋白及血小板、肝肾功能、血红细胞沉降率正常.抗核抗体、抗可提取性核抗原、抗中性粒细胞胞质抗体、G试验、血隐球菌抗原均正常,超敏C型反应蛋白51.3 （0~3.0） mg/L,结核菌素t细胞斑点试验140（0~24）斑点形成细胞/106外周血单个核细胞,血CA125 525 （0~35） kU/L,余肿瘤标志物正常.胸部Ct发现双肺多发结节及不规则囊性病变,支气管镜检查未见明显异常.临床曾给予盐酸莫西沙星、伊曲康唑等药抗感染治疗,患者发热无好转且发热峰值升高,并逐渐出现左侧腹部疼痛,伴腹胀,查大便潜血阳性.

关键词： nk/t细胞淋巴瘤肠道病变双肺抗中性粒细胞胞质抗体血常规检查抗可提取性核抗原外周血单个核细胞红细胞沉降率

nk/t细胞淋巴瘤患者的鼻腔菌群特点及其潜在临床应用价值探讨

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NK/T细胞淋巴瘤患者的鼻腔菌群特点及其潜在临床应用价值探讨

作者：时壮壮郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的nk/t 细胞淋巴瘤(Natural killer/t cell lymphoma,nktCL)是一种罕见的高度侵袭性的淋巴瘤亚型,好发于亚洲及南美洲人群,其恶性程度高,预后差,与Epstein-Barr virus(EBV)感染密切相关,但具体发病机制仍待进一步阐明。此外,根... 详细信息

背景与目的nk/t 细胞淋巴瘤(Natural killer/t cell lymphoma,nktCL)是一种罕见的高度侵袭性的淋巴瘤亚型,好发于亚洲及南美洲人群,其恶性程度高,预后差,与Epstein-Barr virus(EBV)感染密切相关,但具体发病机制仍待进一步阐明。此外,根据原发病灶解剖部位的不同,nktCL分为上呼吸消化道原发nktCL(upper aerodigestive tract,UAt-nktCL)和非上呼吸消化道原发 nktCL(non-upper aerodigestivetract,NUAt-nktCL)两种临床亚型。其中,超过 80%的 nktCL 属于UAt-nktCL亚型,其主要累及鼻腔及其邻近区域,常见首发症状有鼻塞、流涕、鼻出血等,极易误诊为鼻部炎性疾病。此外,NUAt-nktCL仅占nktCL的10-20%,但该亚型临床表现多样,常侵犯皮肤、胃肠道、睾丸等,其恶性程度更高,预后更差。尽管目前对于该疾病的诊治取得很大进步,但是由于该疾病发病初期缺乏特异的临床表现,常常导致患者不能得到及时的诊断与治疗。在人类的鼻腔中栖息着复杂的微生物群体,并且致病菌定植于上呼吸道是后续发生侵袭性疾病的重要前提。近年来,随着高通量测序技术的发展,大量研究表明人体微生物与人体的免疫、炎症、代谢等生理病理过程密切相关,并在恶性肿瘤、炎症性疾病、自身免疫性疾病、代谢性疾病以及神经退行性疾病等多种疾病的发生发展中扮演重要角色,其中,幽门螺杆菌感染与胃黏膜相关组织边缘区淋巴瘤之间的关系更是构成了微生物驱动恶性肿瘤发生发展的范例。值得注意的是,越来越多的研究指出鼻腔菌群失调与慢性鼻-鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)、哮喘、肉芽肿性多血管炎等疾病密切相关,进一步表明了鼻腔菌群在人类的健康与疾病中具有重要作用。然而,目前关于人体鼻腔微生物与nktCL发生发展之间关系的研究十分有限,因此揭示nktCL患者的鼻腔菌群特点,对进一步探索鼻腔微生物在nktCL发生发展中的作用及其潜在临床应用价值将具有十分重要的意义。通过本研究,我们旨在:①初步揭示nktCL患者的鼻腔菌群特点;②评估鼻腔菌群在nktCL患者临床诊疗中的价值;③为今后进一步阐明nktCL的发病机制提供新的思路。材料与方法入组人群:分别于郑州大学第一附属医院肿瘤科和鼻科采用无菌植绒拭子采集nktCL患者(nkt组,n=46)、慢性鼻-鼻窦炎患者(CRS组,n=25)的鼻前孔菌群样本,其中所有nktCL患者的诊断均经我院至少2名病理科医师病理诊断证实,排除标准包括:①除nktCL以外,患有其他类型恶性肿瘤;②近2周内应用抗生素、益生菌和益生元等明显影响人体微生物组成的药物或制剂;③临床信息不完整;④拒绝签署知情同意书。依据PEt/Ct、Ct或MRI检查来确定肿瘤原发部位,同时收集采样时患者的临床基线资料,包括:性别、年龄、体重、身高、吸烟史、既往疾病史、B症状、临床分期、ECOG评分、PInk-E评分、血常规、血生化、血浆EBV和乳酸脱氢酶水平。所有慢性鼻-鼻窦炎患者均接受鼻窦Ct或MRI和鼻内镜检查,并经鼻科副高及以上职称医师做出慢性鼻-鼻窦炎的诊断而无其他鼻咽部恶性疾病。健康对照(healthycontrols,HC组,n=24)来自于本院健康体检者,既往无恶性肿瘤、急慢性鼻部炎症病史。本研究依据世界医学协会伦理规范进行,并经郑州大学第一附属医院伦理审查委员会批准,所有参与本研究的受试者均表示知情同意并签署知情同意书。采样方法:采样方法主要按照《人类微生物组计划操作手册》中的步骤进行(https://***/hmp/doc/***),样本采集后置于不含酶的2ml无菌管,并立即置于4℃冰盒中运送,于20min内送至-80℃超低温冰箱冻存直至DNA提取。DNA提取:按照说明书要求,采用Swab Genomic DNA Kit(BGI-LH-302-03,中国)试剂盒提取DNA。16S 核糖体 RNA V4 区测序:利用 515F(5’-GtGCCAGCMGCCGCGGtAA-3’)和 806R(5’GGACtACHVGGGtWtCtAAt-3’)作为 PCR 扩增引物进行 V4区细菌16S核糖体RNA基因扩增。扩增基于Illumina HiSeq 2500平台,根据标准的Illumina流程产生2 × 250 bp的双端序列。测序数据处理:对下机数据进行质控过滤,剩余高质量的Clean data用于后期分析;通过reads之间的重叠关系将reads拼接成tags;将tags聚类成操作分类单元(OtUs)并与数据库比对、物种注释;基于OtUs和注释结果进行样品物种多样性分析,组间

关键词： nk/t细胞淋巴瘤鼻腔菌群慢性鼻-鼻窦炎生物标志物 16S rRNA测序

nk/t细胞淋巴瘤患者外周血EB病毒含量检测及其临床意义

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NK/T细胞淋巴瘤患者外周血EB病毒含量检测及其临床意义

作者：刘阳郑州大学

学位级别：硕士

目的：探讨外周血中游离EBV-DNA检测在nk/t细胞淋巴瘤患者中的预后意义。方法：统计于我院治疗的结外nk/t细胞淋巴瘤,鼻型患者56例，应用荧光定量PCR技术检测外周血中游离EBV-DNA拷贝数，将血浆EBV-DNA含量检测>0copies/ml为阳性，分别... 详细信息

目的：探讨外周血中游离EBV-DNA检测在nk/t细胞淋巴瘤患者中的预后意义。方法：统计于我院治疗的结外nk/t细胞淋巴瘤,鼻型患者56例，应用荧光定量PCR技术检测外周血中游离EBV-DNA拷贝数，将血浆EBV-DNA含量检测>0copies/ml为阳性，分别比较阳性组患者和阴性组患者在疾病分期、B症状以及疗效之间的差异。结果：45例阳性患者中有30例（66.7%）为晚期（Ⅲ/Ⅳ期）患者，11例阴性患者中3例（27.3%）为晚期（Ⅲ/Ⅳ期）患者，两组比较差异有统计学意义（Pnk/t细胞淋巴瘤患者外周血中游离EBV-DNA检测具有一定的预后指导意义。

关键词： nk/t细胞淋巴瘤血浆 EBV-DNA检测

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nk/t细胞淋巴瘤2例报告并文献复习

NK/T细胞淋巴瘤2例报告并文献复习

作者：邹长武暨南大学

学位级别：硕士

目的探讨nk／t细胞淋巴瘤的临床特点、诊断及治疗。方法分析2例nk／t细胞淋巴瘤的临床特点、诊断及治疗过程,并进行文献综述。结果2000年1月1日到2009年12月31日之间,我院共诊断治疗2例nk／t细胞淋巴瘤,其中鼻、鼻型nk／t细胞淋巴瘤各1... 详细信息

目的探讨nk／t细胞淋巴瘤的临床特点、诊断及治疗。方法分析2例nk／t细胞淋巴瘤的临床特点、诊断及治疗过程,并进行文献综述。结果2000年1月1日到2009年12月31日之间,我院共诊断治疗2例nk／t细胞淋巴瘤,其中鼻、鼻型nk／t细胞淋巴瘤各1例。病例一主要表现为鼻腔肿物、异型淋巴样细胞浸润、大片凝固性坏死,异型淋巴样细胞表达CD56、CD45RO、胞浆CD3、tIA-1、颗粒酶B, EBER阳性。病例二主要表现为皮肤肿块、溃疡,可见异型淋巴样细胞浸润以血管为中心及血管破坏,异型淋巴样细胞表达CD45RO、胞浆CD3、tIA-1、颗粒酶B,CD56阴性,EBER阳性。病例一对化疗的反应较好,随访结束时已存活7年余。尽管采用多种化疗方案及自体干细胞移植,病例二治疗效果很差,最终死于感染性休克、败血症,共存活13个月。结论nk／t细胞淋巴瘤是一种少见的非霍奇金淋巴瘤,根据其发病部位可分为鼻nk／t细胞淋巴瘤和鼻型nk／t细胞淋巴瘤,早期临床表现不典型。鼻nk／t细胞淋巴瘤主要累及鼻腔等面部中线部位,表现为鼻部肿物,可出现面部畸形;鼻型nk／t细胞淋巴瘤主要累及皮肤、胃肠道等部位,其临床表现取决于受累部位。nk／t细胞淋巴瘤累及骨髓少见,一般无局部淋巴结受累。nk／t细胞淋巴瘤的诊断主要依靠临床表现、病理、nk或t细胞免疫学标记、细胞毒性颗粒相关蛋白和EBER检测,诊断依据主要有以下几条：①出现鼻腔肿物或皮肤肿块、溃疡等受累部位症状和体征;②病理检查见异型淋巴样细胞浸润;③nk细胞标记(CD56、胞浆CD3、CD2)或t细胞标记(CD45RO、CD43、胞膜CD3)阳性;④细胞毒颗粒相关蛋白(tIA-1、颗粒酶B和穿孔素)阳性;⑤EBER阳性。nk／t细胞淋巴瘤的理想治疗方案仍在探索中。迄今的研究观察表明,放疗是治疗早期鼻nk／t细胞淋巴瘤的较好手段;鼻型和晚期鼻nk／t细胞淋巴瘤主要依靠化疗,以左旋门冬酰胺酶为基础的方案疗效较好;目前多采取放疗化疗联合使用;造血干细胞移植(HSCt)是治疗nk／t细胞淋巴瘤可供选择的重要手段之一。

关键词： nk/t细胞淋巴瘤诊断治疗

nk/t细胞淋巴瘤多药耐药细胞系中侧群细胞生物学特性研究

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NK/T细胞淋巴瘤多药耐药细胞系中侧群细胞生物学特性研究

作者：董萌郑州大学

学位级别：硕士

背景与目的淋巴瘤是一类起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤,主要侵犯淋巴结或结外淋巴器官。根据病理学、遗传学、免疫学和临床特点的不同,分为霍奇金淋巴瘤(Hodgkins lymphoma,HL)与非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkins lymphoma,NHL)。nk/t细胞... 详细信息

背景与目的淋巴瘤是一类起源于淋巴造血系统的恶性肿瘤,主要侵犯淋巴结或结外淋巴器官。根据病理学、遗传学、免疫学和临床特点的不同,分为霍奇金淋巴瘤(Hodgkins lymphoma,HL)与非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkins lymphoma,NHL)。nk/t细胞淋巴瘤(nk/t cell lymphoma,nktCL)约占NHL的10%,在亚洲人群中发病率较高,在我国更为多见,占全部淋巴瘤的21.38%。主要侵犯鼻腔、鼻咽、鼻窦、皮肤、睾丸、骨髓等器官,部分病患伴发B症状,例如消瘦、盗汗、发热等。该疾病恶性程度高,病程凶险,临床进展快,易复发与耐药,预后极差。因此,在近年的肿瘤相关研究中,多药耐药的研究成为淋巴瘤治疗一个热点。侧群(Side population,SP)细胞是由Goodell在分离骨髓干细胞时,发现居于多数细胞一侧的少量细胞具有多向分化、无限增殖及自我更新等生物学特性。肿瘤细胞中的SP细胞不仅具有上述生物学特性,而且比非SP细胞具有更强的成瘤能力、侵袭能力及耐药性。nktCL临床治疗效果差与细胞表达多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因密切相关,这些基因导致肿瘤细胞对化疗药物敏感性下降,造成肿瘤的耐药与复发。MDR基因多为AtP结合盒式蛋白(AtP-binding cassette,ABC)转运体家族成员,它们以AtP依赖的、主动运输的方式将细胞内的底物转运出细胞,限制细胞内底物浓度,与肿瘤细胞多药耐药性相关。因此,本研究拟通过分选nk/t细胞淋巴瘤耐药株中的SP细胞,并研究其生物学特性以及ABCG2蛋白和RNA的表达情况,探索nktCL多药耐药的相关机制。方法构建nk/t细胞淋巴瘤细胞系Snk-6耐阿霉素细胞株Snk-6/ADM,并检测其多药耐药性。分选Snk-6/ADM细胞株中的侧群细胞Snk-6/ADM-SP,并通过CCK8法、流式细胞术检测Snk-6/ADM-SP的增殖、细胞周期、细胞表面分子标志物和多药耐药等生物学特性。并通过Real time-PCR、Western Blot技术测定Snk-6/ADM-SP细胞中的ABC相关基因及蛋白的表达情况。结果1、Snk-6/ADM的耐药指数(Resistance Index,RI)=5.158。Snk-6和Snk-6/ADM对吉西他滨、阿霉素、顺铂、培门冬酶的半数抑制率(Inhibition of concentration 50%,IC50)分别为0.076±0.016、0.067±0.00,57.268±0.225、37.49±0.639,5.19±0.541、23.63±1.157,4.569±0.652、5.338±0.403。2、Snk-6/ADM-SP细胞株对吉西他滨、阿霉素、顺铂、培门冬酶的IC50值分别为0.089±0.014、63.55±1.847、61.09±1.502、5.534±0.207。Snk-6/ADM-SP增殖和凋亡速度较慢(p细胞群体比例与Snk-6、Snk-6/ADM相似。4、Snk-6/ADM-SP细胞系较Snk-6、Snk-6/ADM细胞系高表达ABCG2mRNA和蛋白(pnk/t细胞淋巴瘤多药耐药细胞系侧群细胞是一类成熟nk/t细胞、多药耐药性更强。2、nk/t细胞淋巴瘤的多药耐药性与高表达ABCG2基因和蛋白高表达相关。

关键词： nk/t细胞淋巴瘤侧群细胞多药耐药生物学特性