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2，4-二硝基酚对大鼠脑缺血预处理后缺血再灌注损伤作用的探讨

2，4-二硝基酚对大鼠脑缺血预处理后缺血再灌注损伤作用的探讨

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作者：高金鹏中南大学

学位级别：硕士

目的:探讨脑缺血预处理联合2,4-二硝基酚治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。材料与方法:实验采用改良的四血管阻断法制备大鼠全脑缺血模型,SD大鼠随机分为四组,分别为假手术组、脑缺血再灌注组、脑缺预处理组和2,4-二硝... 详细信息

目的:探讨脑缺血预处理联合2,4-二硝基酚治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。材料与方法:实验采用改良的四血管阻断法制备大鼠全脑缺血模型,SD大鼠随机分为四组,分别为假手术组、脑缺血再灌注组、脑缺预处理组和2,4-二硝基酚治疗组。24只SD成年大鼠随机分为4组,每组6只。A组假手术组,仅进行相关血管的游离,不进行血管阻断的缺血处理;b组全脑9分钟缺血;C组全脑3分钟缺血预处理,再灌注72小时后行9分钟缺血;D组全脑3分钟缺血预处理,再灌注72小时后行9分钟缺血;其后1小时予以2,4-二硝基酚(DNP)。A,b,C,D组均在最后一次处理后再灌注7天断头取脑。在视交叉后1mm及4mm处冠状切面取切片行H-E染色,ngf-b免疫组化染色,细胞色素C免疫组化染色。分别观察海马区神经元的存活情况及ngf-b的表达和细胞色素C从线粒体膜间隙的释放,采用SPSS13.0软件对实验数据进行统计学分析。结果:H--E染色切片于光镜下计数海马CA1区存活神经元密度,并使用统计学软件SPSS13.0进行成组分析t检验;A组,无明显细胞坏死;b组,可见大量细胞坏死;C,D组可见部分细胞坏死,其中以D组存活细胞数目较多。ngf-b免疫组化染色切片观察见:A组微着色;b组着色稍加深;C、D组可见明显的棕黄色颗粒,着色明显。细胞色素C免疫组化染色切片观察见:A组微着色;C、D组部分着色,b组可见明显的棕黄色颗粒,着色明显。经过相应的全脑缺血处理和2,4-二硝基酚(DNP)处理后,各组神经元存活数目及ngf-b和细胞色素C表达强度有显著性差异。结论:(1)全脑3分钟缺血预处理后,再灌注72小时诱导的神经保护作用脑组织能对随后严重的脑缺血产生有效的保护作用;(2)在3分钟全脑预缺血后,分别再灌注72小时后再以2,4-二硝基酚(DNP)处理后,细胞色素C在脑组织中表达强度呈进一步下降趋势,2,4-二硝基酚(DNP)对缺血性脑损伤具有脑保护作用,且与缺血预处理诱导缺血保护作用有叠加效果。

关键词： 2,4-二硝基酚(DNP) ngf-b 细胞色素C的释放活性氧(ROS) 缺血预处理缺血耐受脑缺血再灌注 SD大鼠

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