检索结果-南通市图书馆

nfic通过激活SF3B1的转录抑制乳腺癌侵袭和迁移的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

NFIC通过激活SF3B1的转录抑制乳腺癌侵袭和迁移的研究

作者：王昭颖吉林大学

学位级别：硕士

背景:癌症作为全球第二大死因严重威胁人类生命和健康。癌症转移是癌症死亡的主要原因,癌细胞的上皮间质转化（EMT）促进了癌症的转移。Pre-mRNA的剪接调控细胞生长、分化与组织发育,剪接失调影响多种癌症的发生发展。剪接过程由剪接复... 详细信息

背景:癌症作为全球第二大死因严重威胁人类生命和健康。癌症转移是癌症死亡的主要原因,癌细胞的上皮间质转化（EMT）促进了癌症的转移。Pre-mRNA的剪接调控细胞生长、分化与组织发育,剪接失调影响多种癌症的发生发展。剪接过程由剪接复合体催化完成,剪接因子SF3B1（splicing factor 3 subunit 1）是剪接复合体中 U2 snRNP（Small nuclear ribonucleoprotein complex）的重要组分之一,SF3B1突变常见于慢性淋巴白血病（CLL）、骨髓增生异常综合征（MDS）等血液系统恶性肿瘤以及葡萄膜黑色素瘤、膀胱癌等实体瘤中,SF3B1突变通过RNA异常剪接造成基因表达失调从而导致基因功能的异常,SF3B1表达水平的变化也参与子宫内膜癌、肝癌等多种癌症的发生发展过程,调控SF3B1表达的上游调控因子尚不清楚。对SF3B1启动子区域的序列分析表明转录因子nfic可能参与了 SF3B1的转录调控,nfic在牙根发育、骨细胞分化、细胞增殖和凋亡以及乳腺癌等癌症中发挥重要的作用。然而,nfic调控SF3B1的分子机制及其对癌症发生发展的影响尚未见报道。目的:探究nfic调控SF3B1表达的分子机制及其在癌症侵袭转移的作用。方法:根据前期研究中SF3B1启动子区域的有效转录因子的结合位点序列,通过PROMO和JASPAR数据库预测出nfic可能是结合在SF3B1启动子区域的转录因子;过表达nfic后通过染色体免疫共沉淀探究nfic在SF3B1启动子区域的结合;构建带有SF3B1启动子区域目的结合位点的Luciferase表达载体,通过荧光素酶报告实验确定nfic对SF3B1的转录调控区域;在多种肿瘤细胞系中过表达和敲低nfic,通过Real-time PCR和Western blot分别在mRNA水平和蛋白水平验证其在癌症中对SF3B1的表达调控;通过Wound healing、Transwell等实验探究nfic通过调控SF3B1的表达对乳腺癌侵袭转移的作用;通过Western blot验证nfic调控SF3B1对上皮间质转化（EMT）相关标志物的表达;通过Kaplan-Meier Plotter分析nfic和SF3B1的表达高低对乳腺癌患者预后的影响。结果:两个数据库中预测出转录因子nfic结合在SF3B1启动子区域,CHIP实验中,过表达nfic后nfic在SF3B1启动子区域的富集增多,表明nfic可以结合在SF3B1启动子区域;转染SF3B1启动子区域Luciferase的活性增加,转染缺失了 SF3B1启动子区域转录因子结合位点的Luciferase活性降低,说明nfic通过结合在SF3B1启动子进而激活SF3B1的表达;过表达nfic后SF3B1上调,敲低nfic后SF3B1下调,表明nfic在多种类型肿瘤细胞中调控SF3B1的表达;过表达nfic抑制MDA-MB-231的侵袭和转移,过表达nfic同时敲低SF3B1之后细胞的迁移侵袭能力增加,表明nfic通过上调SF3B1抑制MDA-MB-231的侵袭和迁移;过表达nfic,EMT相关的上皮标志物E-Cadherin及钙粘蛋白Vinculin的表达上调,敲低SF3B1后E-cadherin和Vinculin又下调,说明nfic是通过上调SF3B1从而抑制EMT。Kaplan-Meier Plotter分析结果说明nfic和SF3B1高表达的病人在乳腺癌的治疗中预后较好。结论:nfic通过结合在SF3B1的启动子区域激活SF3B1的转录,并通过抑制EMT抑制乳腺癌的侵袭和转移。本论文相关工作为明确SF3B1在癌症中的作用和分子机制提供了新的见解,对以SF3B1为靶点的癌症治疗方法的开发有帮助作用。

关键词： SF3B1 nfic 乳腺癌侵袭迁移

出生后大鼠牙胚组织中nfic基因多种选择性剪接体的克隆研究

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

实用口腔医学杂志 2005年第3期21卷 307-309页

作者：邢向辉文玲英金岩组轩东英胡世颉西安第四军医大学口腔医学院儿童口腔科 710032 西安第四军医大学口腔医学院织病理学教研室 710032 西安第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心 710032

目的:研究nfic基因在牙齿发育中的作用。方法:提取出生后SD大鼠磨牙牙胚组织总mRNA, 反转录合成cDNA。根据NCBIGeneBank中nficcDNA序列,分别设计2对PCR引物,进行nfic基因部分序列的扩增,扩增产物与T载体进行T/A连接,然后转化高效感受态... 详细信息

目的:研究nfic基因在牙齿发育中的作用。方法:提取出生后SD大鼠磨牙牙胚组织总mRNA, 反转录合成cDNA。根据NCBIGeneBank中nficcDNA序列,分别设计2对PCR引物,进行nfic基因部分序列的扩增,扩增产物与T载体进行T/A连接,然后转化高效感受态大肠杆菌DH5α,挑取阳性克隆进行酶切鉴定,并对扩增产物进行序列测定。结果:P1、P2为引物进行PCR扩增,可见大小约350bp的特异扩增产物;以P3、P4为引物进行PCR扩增,电泳可见大小不同的3条特异扩增产物,经克隆后的序列测定,为大鼠nfic基因的3种可变剪接体。结论:nfic基因在大鼠牙齿发育后期、牙根的发育前期有表达,并且存在至少3种大鼠nfic基因选择性剪接体。

关键词： nfic 牙齿发育选择性剪接体

转录因子nfic在cAMP信号通路调控根尖牙乳头干细胞分化中的作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

安徽医科大学学报 2017年第2期52卷 190-193页

作者：梁妍张菁李颂安徽医科大学口腔医学院安徽医科大学附属口腔医院安徽省口腔疾病研究中心实验室合肥230032

目的通过慢病毒转染过表达nfic基因,研究nfic在cAMP信号通路促进根尖牙乳头干细胞(SCAPs)分化中的作用。方法采用酶消化法培养SCAPs,将SCAPs分别于普通矿化诱导液(对照组)、cAMP信号通路激动剂(Forskolin组)、转染空病毒载体协同Forskol... 详细信息

目的通过慢病毒转染过表达nfic基因,研究nfic在cAMP信号通路促进根尖牙乳头干细胞(SCAPs)分化中的作用。方法采用酶消化法培养SCAPs,将SCAPs分别于普通矿化诱导液(对照组)、cAMP信号通路激动剂(Forskolin组)、转染空病毒载体协同Forskolin(Forskolin+LV-empty组)、转染过表达nfic慢病毒协同Forskolin(Forskolin+ovnfic组)的矿化诱导液中培养。矿化诱导10 d后茜素红染色检测各组矿化结节形成情况,QPCR法检测7 d Runt相关基因2(RUNX2)、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)mRNA的表达。结果 Forskolin作用SCAPs后矿化结节形成增多,相关矿化基因表达增高,而Forskolin+ov-nfic组矿化结节进一步增多,矿化基因表达进一步上调。结论转录因子nfic能够促进cAMP信号通路介导的SCAPs分化。

关键词：根尖牙乳头干细胞 cAMP nfic 分化

转录因子nfic在小鼠痛觉神经元发育中的调控作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转录因子Nfic在小鼠痛觉神经元发育中的调控作用研究

作者：杨娟杭州师范大学

学位级别：硕士

疼痛是大多数疾病具有的共同症状。根据痛觉产生部位的不同,可将其分为皮肤痛、肌肉痛和内脏痛。此前有关痛觉形成机制的研究对象大多集中在体表,而在临床表现上,内脏痛症状更为常见,影响也更广泛。以往的研究发现,投射于体表组织的痛... 详细信息

疼痛是大多数疾病具有的共同症状。根据痛觉产生部位的不同,可将其分为皮肤痛、肌肉痛和内脏痛。此前有关痛觉形成机制的研究对象大多集中在体表,而在临床表现上,内脏痛症状更为常见,影响也更广泛。以往的研究发现,投射于体表组织的痛觉神经元绝大多数是非肽能神经元,而深层组织投射的痛觉神经元几乎全部是肽能神经元。因而对肽能神经元发生、发育及其调控机制的研究对阐明内脏痛等深层组织疼痛的发生机理具有重要的意义。已知转录因子Runx1决定非肽能神经元的发育,敲除该基因导致非肽能神经元显著减少、肽能神经元扩增。通过对Runx1基因敲除小鼠背根神经节(DRG)的表达谱微阵列分析,我们筛选出了受Runx1抑制、从而可能调控肽能神经元发育的转录因子nfic。首先对nfic在DRG中的表达模式进行了分析。在此基础上,对nfic基因敲除小鼠的DRG进行了表达谱微阵列检测。结果显示nfic敲除小鼠DRG中的CGRP表达水平下调约25%,原位杂交-免疫组化双染定量分析也证实了这一结果,提示nfic具有调节CGRP表达的功能。此外还筛选出可能受nfic调控的一系列下游基因,并通过原位杂交验证其在nfic突变小鼠DRG中的表达变化情况。nfic对Mrgpr家族成员的差异化调控结果提示,该转录因子可能在不同C类机械感受神经元的形成中发挥重要作用。

关键词：神经元发育 nfic 转录调控肽能神经元

1型糖尿病大鼠nfic与成骨成脂相关基因表达的探究及胰岛素的干预作用

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

1型糖尿病大鼠Nfic与成骨成脂相关基因表达的探究及胰岛素的干预...

作者：魏泽宁中国人民解放军医学院

学位级别：硕士

糖尿病(Diabetes mellitus, DM)是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。机体血糖增高是由于胰岛素分泌缺陷、生物作用受损或两者协同作用所致。血糖水平增高可导致机体各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害与功能障碍。1型... 详细信息

糖尿病(Diabetes mellitus, DM)是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。机体血糖增高是由于胰岛素分泌缺陷、生物作用受损或两者协同作用所致。血糖水平增高可导致机体各种组织,特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害与功能障碍。1型糖尿病(DM1)多发于儿童和青少年,表现为患者体内胰岛素绝对不足,必须依赖外源性胰岛素降低血糖。1948年Albright和Reifenstein首次提出了糖尿病型骨质疏松症(Diabetic Osteoporosis,DOP)这一概念,明确指出糖尿病患者血糖长期控制不良容易发生骨质疏松。糖尿病型骨质疏松症是指在糖尿病基础上并发骨量减少,骨脆性增加,骨显微结构受损的全身代谢性骨病。众所周知,骨组织的改建与成熟主要由骨形成和骨吸收两个过程不停地循环交替来完成。研究表明,DM1主要导致骨形成降低。骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells, MSCs)具有成骨分化和成脂分化的能力。成骨分化受到众多信号通路及相关转录调控因子的影响,其中nfic为核因子I(Nuclear factor-1, Nfi)家族的四个成员之一,过表达的nfic可促使成骨细胞分化增加,新骨形成。此外,nfic也可通过抑制过氧化物酶体增殖物激活受体Y (peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ)的表达,抑制BMSCs的成脂分化,显示出与年龄及激素水平相关的骨质疏松症样的表型。本实验主要研究：1、1型糖尿病大鼠模型建立及首次建模失败后的补救措施及其效果;2、糖尿病大鼠模型胰腺组织学改变及模型的稳定性;3、1型糖尿病大鼠nfic与其它成骨相关基因(Runx2、OSX、IGF-1、BMP-2)及成骨特异性标记基因(COL2A1、OC、ALP)的表达状况;4、1型糖尿病大鼠成脂基因PPARy的表达情况;5、nfic基因表达变化对成骨相关基因及成脂基因PPARγ表达的影响;6、胰岛素对1型糖尿病大鼠nfic及成骨成脂基因表达的干预作用。第一部分：1型糖尿病大鼠模型的制备、建模失败后补救措施及胰岛素对大鼠模型的治疗效果目的研究通过链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导建立1型糖尿病大鼠模型的方法及首次建模失败后的补救措施及效果,并对胰岛素对大鼠模型的干预作用进行初步探究。方法：健康6-8周龄雄性Wistar大鼠30只,随机分为2组,建模组25只,对照组5只。给予建模组大鼠一次性大剂量腹腔注射STZ(65mg/kg),同时对照组大鼠腹腔注射相同体积的柠檬酸缓冲液。72h后检测大鼠的血糖值判断建模是否成功。首次建模成功的大鼠随机分为两组,模型组和治疗组。治疗组于实验开始的第四天按(4-6U/kg/d)给予中效胰岛素皮下注射。对首次建模失败的大鼠常规饲养一周,再次腹腔注射STZ(65mg/kg),并命名为补救组,观察其成模状况。分别在建模后第0、2、4、6、8周测量大鼠的体重与血糖并观察其一般情况。于建模后第8周处死全部大鼠,取胰腺标本进行HE染色和胰岛素的免疫组化染色,观察胰腺组织的病理学改变。结果：1、体重状况：模型组与补救组大鼠体重降低或保持不变,对照组及治疗组大鼠体重增加明显。2、血糖状况：建模组有21只大鼠首次注射STZ 72h后,血糖值达到成模标准(随机血糖值≥16.7mmol/L),4只血糖值未达到成模标准,再次注射STZ72h后血糖值检测均达到成模标准。在建模成功组中随机选取20只均分为模型组和治疗组。持续观察8周,模型组大鼠均成模稳定,糖尿病症状明显,未见血糖转复正常。治疗组大鼠胰岛素治疗后,血糖由高血糖状态降为正常水平。对照组大鼠各项指标均未见异常。3、胰腺组织细胞学观察可见：对照组大鼠胰岛形态规则,细胞数目正常。与对照组相比,模型组、治疗组及补救组大鼠胰岛形态不规则,体积萎缩变小,胰岛内分泌细胞数量明显减少。补救组与模型组相比,其胰岛形态更不规则。与模型组相比,治疗组胰岛体积稍大,内分泌细胞排列更加整齐。4免疫组化观察：胰岛素胰腺免疫组化检测发现,与对照组相比,模型组和补救组胰岛素分布面积显著减少。补救组与模型组相比,其胰岛素分布面积略有增加。治疗组胰岛素分布面积略大于模型组。结论：一次性大剂量腹腔注射STZ可制备有效、稳定的1型糖尿病大鼠模型。首次建模失败后,适时再次注射STZ仍可制备高质量的1型糖尿病大鼠模型。胰岛素治疗可使1型糖尿病大鼠保持正常的血糖水平,在一定程度上对胰腺细胞产生治疗作用。第二部分：糖尿病大鼠nfic与其它成骨相关基因表达的探究及胰岛素的干预作用目的探究糖尿病大鼠nfic及成骨相关基因的表达变化及关系,研究胰岛素对糖尿病大鼠骨代谢的干预作用。方法 1型糖尿病大鼠模型制作同前,将大鼠分为3组,对照

关键词：链脲佐菌素 1型糖尿病模型糖尿病 nfic 成骨细胞成骨相关基因 Runx2 ALP OSX IGF-1 COL2A1 OC BMP-2 PPARγ 成脂分化胰岛素大鼠 mRNA

nfic基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-20a靶向关系的验证

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

天津医药 2016年第9期44卷 1065-1068页

作者：王珊李晓霞周杰王宝利天津医科大学代谢病医院内分泌研究所、卫生部激素与发育重点实验室 300070 天津医科大学基础医学院

目的构建核因子C(nuclear factor I-C,nfic)基因3′非编码区(3′UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证micro RNA-20a(miR-20a)与其潜在靶基因nfic的靶向关系。方法通过micro RNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-20a与nfic... 详细信息

目的构建核因子C(nuclear factor I-C,nfic)基因3′非编码区(3′UTR)荧光素酶报告质粒,利用双荧光素酶报告基因验证micro RNA-20a(miR-20a)与其潜在靶基因nfic的靶向关系。方法通过micro RNA靶基因预测软件Targetscan获取miR-20a与nfic基因3′UTR潜在的互补结合位点;PCR扩增出nfic基因3′UTR序列,将此序列克隆至荧光素酶报告载体p MIR-Report Luciferase;将重组荧光素酶报告质粒与miR-20a mimics(实验组)或NCmimics(对照组)共同转染293-AD细胞,收集细胞后通过双荧光素酶报告系统检测2组细胞的荧光素酶活性,从而对nfic与miR-20a的靶向调节关系进行鉴定。将miR-20a mimics和NC mimics分别转染骨髓基质细胞系ST2,裂解细胞提取蛋白后采用Western blotting检测nfic蛋白的表达水平。结果构建的重组荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确。双荧光素酶报告基因检测显示,与对照组相比,miR-20a可以抑制nfic 3′UTR报告基因载体的荧光素酶活性(Pnfic蛋白表达水平明显下调。结论成功构建了nfic基因3′UTR荧光素酶报告质粒,而miR-20a可以直接作用于nfic基因3′UTR,抑制其荧光素酶活性。

关键词：微RNAs 3′非翻译区 miR-20a nfic 骨髓基质细胞系荧光素酶报告基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

nfic基因的研究进展

口腔颌面修复学杂志 2016年第5期17卷 308-312页

作者：李传洁李亚男解放军总医院口腔医学中心硕士生北京100853 慈铭健康体检管理集团有限公司医师北京100101 解放军总医院口腔科副主任医师副教授北京100853

核因子I(Nfi)家族具有DNA结合蛋白特异结合位点,在动物生理学、生物化学和病理学上起着重要的作用,参与调控DNA复制和基因表达,Nfi蛋白与细胞生长状态变化、致癌过程和疾病状态均有密切关系。其中,nfic是核因子家族的一员,大量实验研究... 详细信息

核因子I(Nfi)家族具有DNA结合蛋白特异结合位点,在动物生理学、生物化学和病理学上起着重要的作用,参与调控DNA复制和基因表达,Nfi蛋白与细胞生长状态变化、致癌过程和疾病状态均有密切关系。其中,nfic是核因子家族的一员,大量实验研究发现其参与多种信号通路,本文总结了近来关于nfic的主要研究方向,进一步探讨nfic在各信号通路内的作用及相互联系。

关键词： nfic 牙根发育乳腺癌成骨分化成脂分化基因调控

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

nfic基因的研究进展

Nfic基因的研究进展

miR-550a-3靶向nfic表达调控肺癌细胞HCC827增殖、迁移和侵袭

中华口腔医学会口腔修复学专业委员会第十次全国口腔修复学...

作者：李传洁李亚男解放军总医院口腔科

关键词： nfic 牙根发育乳腺癌成骨分化成脂分化基因调控

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术 2023年第1期33卷 75-80,94页

作者：胥杰崔继涛狄红红周贵星滕州市中心人民医院呼吸与危重症二科山东滕州277500

[目的]探讨miR-550a-3靶向nfic表达调控肺癌细胞HCC827增殖、迁移和侵袭作用。[方法]检测40例肺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-550a-3和nfic mRNA表达,并分析nfic表达与肺癌患者病理特征的相关性。按Lipofectamine 2000方法分别将miR-NC... 详细信息

[目的]探讨miR-550a-3靶向nfic表达调控肺癌细胞HCC827增殖、迁移和侵袭作用。[方法]检测40例肺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-550a-3和nfic mRNA表达,并分析nfic表达与肺癌患者病理特征的相关性。按Lipofectamine 2000方法分别将miR-NC、miR-550a-3 mimics和miR-550a-3inhibitor转染到HCC827细胞,48h后检测细胞增殖、迁移和侵袭情况,同时检测细胞中miR-550a-3和nfic mRNA表达,并检测细胞中nfic、E-cadherin和N-cadherin蛋白表达。[结果]肺癌组织中miR-550a-3表达水平(1.83±0.19)高于癌旁组织(1.00±0.15),nfic mRNA表达水平(0.62±0.14)低于癌旁组织(1.00±0.10)(P0.05)。转染miR-550a-3后,miR-550a-3 mimics组细胞中miR-550a-3 mRNA、细胞增殖率、迁移细胞数、侵袭细胞数和N-cadherin水平较miR-NC组增加(Pnfic mRNA及蛋白、E-cadherin水平较miR-NC组降低(Pnfic mRNA及蛋白、E-cadherin水平较miR-NC组增加(Pnfic mRNA及蛋白表达,抑制HCC827增殖、迁移和侵袭。

关键词： miR-550a-3 nfic 肺癌细胞增殖细胞迁移细胞侵袭