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隐绿原酸通过nf-κb/jmjd3信号轴介导巨噬细胞极化治疗牙周炎

隐绿原酸通过NF-κB/JMJD3信号轴介导巨噬细胞极化治疗牙周炎

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作者：方华龙南昌大学

学位级别：硕士

牙周炎是由局部因素引起的,以牙龈炎症和牙槽骨丢失为主要特征的感染性疾病。牙周炎常规治疗方法是菌斑控制、龈上洁治及龈下洁治,并辅助药物治疗。最常用的抗菌药物对机体治疗效果欠佳并有毒副作用,导致其不能长期使用。因此,亟待寻找... 详细信息

牙周炎是由局部因素引起的,以牙龈炎症和牙槽骨丢失为主要特征的感染性疾病。牙周炎常规治疗方法是菌斑控制、龈上洁治及龈下洁治,并辅助药物治疗。最常用的抗菌药物对机体治疗效果欠佳并有毒副作用,导致其不能长期使用。因此,亟待寻找一种新的替代疗法治疗牙周炎。大量研究证明,隐绿原酸具有明显的抗炎作用,但隐绿原酸在牙周炎中的作用和具体机制尚不清楚。本研究拟构建牙周炎经典细胞模型探索隐绿原酸治疗牙周炎的作用机制,供临床转化应用。目的:构建牙周炎模型探索隐绿原酸治疗牙周炎的作用及机制。方法:***-8检测不同浓度隐绿原酸对RAW264.7细胞的毒性。2.流式细胞术检测隐绿原酸对巨噬细胞M1极化标志物CD16/32表达水平的影响。3.转录组学分析隐绿原酸干预巨噬细胞M1极化模型后炎症基因表达变化;q RT-PCR进一步验证差异基因的表达水平。4.免疫荧光染色法和蛋白免疫印记法检测隐绿原酸对巨噬细胞M1极化模型中nf-κb/jmjd3信号轴的影响。结果:1.0μM-20μM浓度范围内,隐绿原酸对RAW264.7细胞活性影响较小,细胞存活率大于80%。2.隐绿原酸可抑制巨噬细胞M1极化标志物CD16/32表达。3.隐绿原酸干预M1极化模型后进行转录组学分析,筛选出的差异基因进行KEGG富集分析,结果显示药物干预的基因主要富集在突触囊泡周期、aposi肉瘤相关疱疹病毒感染、长期退化、nf-κb信号通路、破骨细胞分化等通路上;测序结果和q RT-PCR实验均显示,隐绿原酸可抑制促炎因子IL-1β和i NOS表达。4.免疫荧光染色法和蛋白免疫印记法结果显示,隐绿原酸可抑制nf-κb(p65)核转位并下调jmjd3表达。结论:隐绿原酸可通过抑制nf-κb/jmjd3信号轴调控巨噬细胞M1极化,从而发挥抗炎作用治疗牙周炎。

关键词：隐绿原酸牙周炎巨噬细胞M1极化 nf-κb/jmjd3信号轴

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