检索结果-南通市图书馆

中国病理生理杂志 2015年第10期 1786-1787页

作者： SONG Sha-sha ZHANG Min YI Zhi ZHANG Hong-yue SHEN Ting-ting YU Xiu-feng ZHANG Chen ZHENG Xiao-dong YU Lie MA Cui SHI Heng-yuan CAO Wei-wei ZHU Da-ling Department of Biopharmaceutical Sciences College of PharmacyHarbin Medical University ( Daqing) Biopharmaceutical Key Laboratory of Heilongjiang Province

AIM:To verify the mechanism of endothelial-to-mesenchymal transition(EndoM T)involved in pulmonary artery remodeling(PAR),and to investigate whether EndoM T in pulmonary artery hypertension(PAH)could be ***:The methods of multiple immunofluorescence staining,morphologic analysis,Western blotting and coimmunoprecipitation were applied to identify the role of EndoM T in the PAR and the molecular mechanisms participating EndoM ***:EndoM T occurred in the pathological

关键词： PDGF Down-regulating nep induces endothelial-to-mesenchymal transition via reciprocal regulation of PDGF-BB and TGF during pulmonary artery remodeling nep BB

基于PLUS土地利用模拟的阿克苏河流域nep时空格局研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

干旱区研究 2024年第6期41卷 1059-1068页

作者：李沛尧王新军许世贤高胜寒薛智暄衡瑞新疆农业大学新疆土壤与植物生态过程重点实验室新疆乌鲁木齐830052 兴林(北京)林业工程设计研究院有限公司北京100000 中国科学院新疆生态与地理研究所荒漠与绿洲国家重点实验室新疆乌鲁木齐830011

净生态系统生产力(nep)是评估陆地生态系统碳吸收量的重要指标,而土地利用/覆盖变化(LUCC)是影响区域碳吸收量变化的主要因素之一,分析LUCC与nep的变化趋势,对区域实现“双碳”目标具有重要意义。基于阿克苏河流域2000—2020年LUCC与MO... 详细信息

净生态系统生产力(nep)是评估陆地生态系统碳吸收量的重要指标,而土地利用/覆盖变化(LUCC)是影响区域碳吸收量变化的主要因素之一,分析LUCC与nep的变化趋势,对区域实现“双碳”目标具有重要意义。基于阿克苏河流域2000—2020年LUCC与MODIS遥感数据估算区域内各土地利用/覆盖类型的年均固碳速率,借助PLUS模型模拟未来40 a的LUCC,预测未来40 a流域nep时空变化趋势。结果表明:(1)近20 a流域内总nep呈上升趋势,上升速率为0.136 Mt C·(10a)-1,林地平均固碳速率最高;(2)未来40 a阿克苏河流域总碳吸收量在不断上升。林地面积的增加是阿克苏河流域碳吸收量上升的主要途径,生态保护工程的积极性对流域内碳吸收量起到关键作用。

关键词： nep LUCC模拟 PLUS模型阿克苏河流域

姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠Aβ42及其降解酶nep表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中药杂志 2011年第8期36卷 1079-1082页

作者：王蓬文王虹李瑞晟李勇任映朱志慧孙海芸杨金铎孙建宁北京中医药大学中药学院中药药理学实验室北京100102 北京中医药大学东直门医院中药药理学实验室北京100700

目的:观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠Aβ42及其降解酶nep表达的影响。方法:将3月龄的APP-swe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组、姜黄素高、中、低剂量组。灌胃3个月后,应用Morris水迷宫、免疫组织化学、Western b... 详细信息

目的:观察姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠Aβ42及其降解酶nep表达的影响。方法:将3月龄的APP-swe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、阳性对照组、姜黄素高、中、低剂量组。灌胃3个月后,应用Morris水迷宫、免疫组织化学、Western blot等方法进行检测。结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(Pnep表达,模型组小鼠大脑海马CA1区较正常对照组Aβ42阳性细胞明显增加(Pnep表达、降低Aβ42蛋白,进而改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的学习记忆能力。

关键词：姜黄素 APPswe/PS1dE9双转基因小鼠 Aβ42 nep Morris水迷宫

热释电探测器nep参数测量不确定度分析与计算

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

红外技术 2008年第4期30卷 192-195页

作者：孙娟刘莹娟夏丽昆杨登全昆明物理研究所云南昆明 650223 总装备部重庆军代局驻昆明地区军代室云南昆明 650223

阐述热释电探测器nep参数的测量原理和方法,分析热释电探测器nep测量不确定度的来源,计算nep实际测量中的测量不确定度,计算结果表明,测量环境和测量过程中探测器光敏元与辐射源的准直度是影响热释电探测器nep测量不确定度的主要因素,... 详细信息

阐述热释电探测器nep参数的测量原理和方法,分析热释电探测器nep测量不确定度的来源,计算nep实际测量中的测量不确定度,计算结果表明,测量环境和测量过程中探测器光敏元与辐射源的准直度是影响热释电探测器nep测量不确定度的主要因素,指出提高热释电探测器nep参数测量质量的措施。

关键词：热释电探测器 nep 测量不确定度

去势对雄性大鼠海马组织中TMP-21、IDE、nep表达的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

神经解剖学杂志 2018年第1期34卷 72-76页

作者：杜鹃王海东王畅张楠王斌康林崔慧先河北医科大学人体解剖学教研室石家庄050017 河北医科大学基础医学院石家庄050017

目的:观察去势对雄性SD大鼠海马组织中转运膜蛋白21(transmembrane protein 21,TMP-21)、胰岛素降解酶(insulin-degrading enzyme,IDE)、脑啡肽酶(neprilysin,nep)的表达影响,进一步探讨雄激素对TMP-21、IDE、nep表达的调节作用。方法:2月龄雄性SD大鼠随机分为假手术组(Sham)和去势手术组(GDX),术后30 d断头取脑剥离海马组织,一侧用于RT-PCR的方法检测TMP-21、IDE、nep的mRNA水平,另一侧用于Western Blot的方法检测TMP-21、IDE、nep的蛋白水平。结果:与Sham组相比,海马组织中GDX组TMP-21、IDE、nep的mRNA水平分别下降了约28%、63%、44%(Pnep mRNA水平和蛋白水平的显著降低,提示TMP-21、IDE、nep表达水平的降低可能与雄激素的减少相关。

关键词： TMP-21 IDE nep 去势雄激素海马大鼠

nep和CES1基因多态性对沙库巴曲缬沙坦治疗心衰患者疗效和安全性影响研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

NEP和CES1基因多态性对沙库巴曲缬沙坦治疗心衰患者疗效和安全性...

作者：罗红宇南华大学

学位级别：硕士

目的:本研究的目的是分析评价脑啡肽酶(neprilysin,nep)和羧酸酯酶1(carboxoxylates1,CES1)基因多态性与沙库巴曲缬沙坦治疗中国汉族心力衰竭(heart failure,HF)患者的疗效和安全性的相关性。方法:选择2021年2月-2022年5月在南华大学附... 详细信息

目的:本研究的目的是分析评价脑啡肽酶(neprilysin,nep)和羧酸酯酶1(carboxoxylates1,CES1)基因多态性与沙库巴曲缬沙坦治疗中国汉族心力衰竭(heart failure,HF)患者的疗效和安全性的相关性。方法:选择2021年2月-2022年5月在南华大学附属长沙市中心医院心内科住院需服用沙库巴曲缬沙坦的116例中国汉族心衰患者,采集病人的基本数据,包括性别、年龄、种族、疾病严重程度、合并药物、血压、疾病严重程度、肝肾功能以及心功能等。静脉外周血提取DNA,应用质谱测序对nep基因的rs989692,rs701109,rs3736187,rs9829757,rs1816558,rs6776185和CES1基因的rs2244613,rs71647871,rs8192935,rs115629050单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)进行基因分型,并应用logistic回归和单倍型分析评估沙库巴曲缬沙坦基因多态性与其疗效和安全性的相关性;并进一步将心衰患者分为射血分数降低的心衰(heart failure with reduced ejection fraction,HFr EF,LVEFnep rs701109基因多态性对沙库巴曲缬沙坦疗效有影响。nep和CES1基因多态性与症状性低血压之间无相关性。

关键词：沙库巴曲缬沙坦 nep CES1 遗传多态性心力衰竭

基于C-FIX模型的秦岭山区森林生态系统NPP、nep时空模拟研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

基于C-FIX模型的秦岭山区森林生态系统NPP、NEP时空模拟研究

作者：许明子西北大学

学位级别：硕士

秦岭横亘中国内陆中部地区,是中国南北地理气候标志性分野。在全球气候变化及严峻的温室效应的大背景之下,秦岭山区森林生态系统作为碳汇,在大尺度区域碳循环中发挥作用。本文以1998～2009年陕西省境内的秦岭山区森林生态系统作为研究对... 详细信息

秦岭横亘中国内陆中部地区,是中国南北地理气候标志性分野。在全球气候变化及严峻的温室效应的大背景之下,秦岭山区森林生态系统作为碳汇,在大尺度区域碳循环中发挥作用。本文以1998～2009年陕西省境内的秦岭山区森林生态系统作为研究对象,以同期的遥感数据、气象数据和其他数据等作为基础数据,以NPP光能利用率模型中的C-FIX模型作为研究方法,进行研究区植被净第一性生产力(Net Primary Production, NPP)和碳汇进行模拟和估算,根据模拟结果分析秦岭山区森林生态系统的NPP时空格局变化以及该地区的碳汇作用及能力。结论如下：(1)秦岭山区森林生态系统NPP空间分布及变化12年间研究区平均值为774.34 gC·m-2·a-1,平均年总量为54.65 TgC·a-1;研究初期(1988年)平均NPP值比研究末期(2009年)增加了9.22gC·m2·a-1,年总量增加了0.65 TgC·a-1,增长率为1.16%。12年间NPP值处于下降趋势的区域主要集中在秦岭南北分界线周边,南部的安康市辖区、岚皋县以及西部的汉中市辖区。除上述几处区域外,研究区NPP值基本都处于上升趋势,以西部略阳县、宁强县以及研究区北部边界处较为明显。整个研究区中增长量为10～15 gC·m-2·a-1的区域所占面积最大,为30.41%;增长量小于10gC·m-2·a-1的区域所占面积最小,仅为0.08%。(2)秦岭山区森林生态系统NPP时间序列变化12年间各年平均NPP值在709.27-852.22 gC·m-2·a-1区间内上下浮动;四季对全年NPP总量的贡献值由高到低排序分别为：夏季(30.23 TgC·a-1,55.33%)>春季(13.65TgC·a-1,24.98%)>秋季(9.43 TgC·a-1,17.27%)>冬季(1.32 TgC·a-1,2.42%)。各月平均NPP值在5.10-150.90 gC·m-2·month-1区间内上下浮动,一年中7月的NPP值达到最高(150.90 gC·m-2·a-1,19.49%),1月NPP值最低(5.10 gC·m-2·month-1,0.66%)。(3)秦岭山区森林生态系统不同植被类型NPP分布特征研究区内单位面积NPP最高的是常绿落叶阔叶混交林(804.45 gC·m-2·a-1),其次是常绿阔叶林(802.57 gC·m2·a-1),灌丛(797.65 gC·m-2·a-1);平均NPP最低的是落叶针叶林(588.40 gC·m-2·a-1),其次是草甸(711.56 gC·m-2·a-1)、耕地(747.37 gC·m-2·a-1);而落叶阔叶林(788.56 gC·m-2·a-1)、草丛(762.99 gC·m-2·a-1)和常绿针叶林(759.21gC·m-2·a-1)三者单位NPP值处于中间水平。(4)秦岭山区森林生态系统NPP对气候变化的响应NPP与当月、滞后一个月以及滞后两个月的气温均达到显著相关性,NPP受当月气温影响最大,同时对气温也存在一定的滞后性影响。NPP随着气温的升高而升高,气温是决定NPP值的重要因素之一。NPP与当月、滞后一个月的降水量达到显著相关性,而在滞后两个月时未达到显著相关性,NPP受当月降水量影响最大,同时对降水存在一定的滞后性影响,滞后一个月时影响较大,滞后两个月无明显影响。NPP随着降水量的增大而升高,降水量也是决定NPP值的重要因素,但其影响无气温的影响明显。(5)秦岭山区森林生态系统nep及碳汇\碳源变化在1998～2009年的平均水平上,秦岭山区森林生态系统中99.99%的区域表现为碳汇,只有0.01%的区域表现为碳源,其碳汇能力为54.32 TgC·a-1.四季多年nep平均值按照春、夏、秋、冬的顺序依次为：140.56 gC·m-2·a-1、334.65 gC·m-2·a-1、80.66 gC·m-2·a-1、-2.03 gC·m-2·a-1,四季多年平均nep年总量为9.92 TgC·a-1、23.62 TgC·a-1、5.69 TgC·a-1、-0.14 TgC·a-1。研究区在春、夏、秋三季中皆表现为碳汇作用,其碳汇能力按照高低排序为：夏季>春季>秋季;单在冬季时表现为碳源作用。连续12年的nep平均变化率为9.11%,表明秦岭森林生态系统的碳汇越来越大,符合本文预期。

关键词：秦岭森林生态系统 NPP nep C-FIX模型气候变化

全球喀斯特区与非喀斯特区植被nep时空变化特征及驱动因素分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全球喀斯特区与非喀斯特区植被NEP时空变化特征及驱动因素分析

作者：刘茂贵州师范大学

学位级别：硕士

净生态系统生产力（Net Ecosystem Productivity,nep）是定性和定量表征生态系统碳源/汇特征的重要指标。喀斯特区和非喀斯特区有不同的地质、地貌、水文、气候、人类活动强度等条件,植被类型千差万别,植被固碳能力也有差别。然而,已有... 详细信息

净生态系统生产力（Net Ecosystem Productivity,nep）是定性和定量表征生态系统碳源/汇特征的重要指标。喀斯特区和非喀斯特区有不同的地质、地貌、水文、气候、人类活动强度等条件,植被类型千差万别,植被固碳能力也有差别。然而,已有研究多关注区域整体的植被nep变化,少有研究就喀斯特区与非喀斯特区对植被nep的差异进行对比分析。此外,现有研究多聚焦单一气候因素对植被nep变化的影响,少有结合地形、人文等因子来综合探讨植被nep变化的驱动因素。喀斯特区与非喀斯特区的植被nep时空变化特征尚不明确,人文因素与地形因素是否影响植被固碳能力也尚不清楚。因此,以全球喀斯特区与非喀斯特区为研究区,获取全球植被nep数据,运用Mann-Kendall趋势检验、Theil-Sen斜率估计、Hurst指数分析等方法,揭示全球喀斯特区与非喀斯特区植被nep时空变化特征;获取LAI、气候、人文和地形数据,采用偏相关分析、地理探测器等方法,阐明不同气候带植被nep与气候因子的相关性,分析影响全球喀斯特区与非喀斯特区植被nep的驱动因素。主要研究结论如下:（1）2000～2020年,喀斯特区植被nep以低碳汇为主,且呈显著的上升趋势。从总体上看,全球喀斯特区大部分区域植被nep在0～300g Cm-2yr-1之间,处于低碳汇阶段,以每年0.5g Cm-2yr-1的速度显著上升（Pnep呈上升趋势的面积占比最大（58.94%）,植被nep发生突变后呈显著上升趋势与呈显著下降趋势的面积占比分别比突变前增长了10.03%和减少了33.43%。在未来,植被nep趋于退化,退化的面积占比（51.74%）大于改善的面积占比（48.26%）。分气候带分析喀斯特区的植被nep分布,结果显示,热带的植被nep值最高,干旱带的植被nep值最低;热带、干旱带和温带寒温带的植被nep均呈上升趋势且有明显的突变点,亚热带的植被nep呈明显上升趋势但无突变点,极地带的植被nep既无明显变化也无突变点。在未来,热带、干旱带的植被nep趋于稳定,亚热带、温带寒温带的植被nep趋于退化,极地带的植被nep趋于改善。（2）2000～2020年,非喀斯特区植被nep均值整体高于喀斯特区,呈显著的上升趋势,以低碳汇为主,碳汇区面积占比（70.4%）小于喀斯特区（74.12%）。从总体上看,植被nep以每年0.43g Cm-2yr-1的速度显著上升,上升速率小于喀斯特区,在2006年发生突变,突变前后的植被nep均呈不显著的上升趋势。在空间变化趋势上,植被nep呈上升趋势的面积（58.63%）与喀斯特区（58.94%）相差不大。在未来演进中,植被nep趋于退化的面积占比为52.06%,比喀斯特区大0.32%。从不同气候带来看,非喀斯特区与喀斯特区相同,热带的植被nep值最高,干旱带的植被nep值最低;植被nep在热带、亚热带和温带寒温带呈上升趋势,上升速率均小于同气候带的喀斯特区;干旱带的植被nep也呈显著上升趋势,上升速率大于同气候带的喀斯特区;热带、干旱带、亚热带和温带寒温带的植被nep均有明显的突变点;极地带nep呈不显著的下降趋势,在2013年发生突变,同气候带的喀斯特区无明显变化。在未来,与喀斯特区相同的是,植被nep在亚热带、温带寒温带趋于退化,极地带趋于改善,与喀斯特区不同的是,植被nep在热带、干旱带趋于退化。热带、干旱带、亚热带和温带寒温带是未来防止植被nep退化工作的重点区域。要重视非喀斯特区植被保护工作,减少因植被破坏导致的植被nep降低的问题。（3）在全球喀斯特区,各因素驱动植被nep的力度差距呈现缩小态势,植被nep空间差异的核心因素趋向多元化,人文因子、地形因子与气候因子结合后对全球喀斯特区植被nep的解释力要比自身作为单因素驱动因子时的解释力更强;不同气候带植被nep变化与植被绿度、降水、气温均存在相关性。从地理探测器单因子探测的结果来看,植被绿度、降水和气温是驱动全球喀斯特区植被nep变化的核心因素,其中,植被绿度是喀斯特区解释力最强的因子,气温、降水、国内生产总值的解释力在增强,二氧化碳排放量的解释力先增后减,人口密度在所有因子中解释力最小,坡度和海拔的解释力略有增强。从交互探测的结果来看,喀斯特区降水和气温交互作用最强,对全球喀斯特区植被nep变化的解释力最好,国内生产总值、人口密度、二氧化碳排放量三个人文因子与其他因素的交互作用显著增强。从影响植被nep变化的核心因素来看,热带（R2=0.342,P=0.003）、干旱带（R2=0.418,P=0.001）、亚热带（R2=0.562,P=0.002）和温带寒温带（R2=0.531,P=0.01）植被nep变化与植被

关键词： nep 时空变化驱动因素喀斯特区非喀斯特区

A型流感病毒蛋白nep与宿主蛋白GPS2互作的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

A型流感病毒蛋白NEP与宿主蛋白GPS2互作的研究

作者：龚文孝华中农业大学

学位级别：硕士

A型流感病毒是一种重要的人畜共患病病原,能在人、猪和禽等物种中传播。因其高变异能力与高传染性等,给人们的身体健康带来巨大的威胁。预防控制流感病毒的传播与致病一直是科研工作者们努力的方向,清楚的了解其致病机制为疾病的预防控... 详细信息

A型流感病毒是一种重要的人畜共患病病原,能在人、猪和禽等物种中传播。因其高变异能力与高传染性等,给人们的身体健康带来巨大的威胁。预防控制流感病毒的传播与致病一直是科研工作者们努力的方向,清楚的了解其致病机制为疾病的预防控制提供了有力的依据。在流感病毒感染宿主细胞后,病毒蛋白会通过自身蛋白与宿主蛋白发生相互作用,而借用宿主本身的复制系统进行自身的复制增殖。流感病毒核输出蛋白(nuclear export protein,nep)蛋白是因能在病毒vRNP出核过程中发挥重要作用而被认知,被命名为核输出蛋白。nep在各种亚型的A型病毒中都比较保守,从最初确立nep在介导病毒核糖核蛋白(vRNP)复合体输出细胞核的功能以来,对于nep是否具有其它功能还未见报道。在本实验室先前的研究中,以nep为诱饵蛋白筛选人脑cDNA文库,获得了多个阳性克隆,包括C-CHD3,GPS2等。在本研究中利用一些研究蛋白相互作用的方法验证nep与GPS2(G protein pathway suppressor2)之间的相互作用,并初步阐述这种相互作用所具备的生物学特性。主要研究内容和结果如下:(1)相互作用的验证首先将酵母双杂交获得的阳性克隆GPS2与流感病毒nep蛋白之间的相互作用在COS-1细胞上用哺乳动物双杂交技术进行验证,结果表明GPS2能与nep之间表现出较强的相互作用;然后分别将GPS2与nep克隆至原核表达载体,将可溶表达的融合蛋白GST-nep和His-GPS2进行GST pull-down实验,证明两蛋白能在体外发生相互作用;分别将GPS2与nep克隆至真核表达载体,然后分别检测共转染细胞中两个蛋白的相互作用。利用间接免疫荧光技术检测两蛋白之间的亚细胞定位,发现共表达细胞中两蛋白发生明显的共定位现象。综上可以充分验证GPS2与nep两蛋白之间确实存在相互作用。(2)nep与GPS2相互作用保守性研究根据序列分析,nep在A型流感病毒中具有相当的保守性,但是不同的毒株之间还是存在少量氨基酸的差异,在本研究中将A/WSN/1933(H1N1),A/Mexico/001/2009(H1N1),A/duck/Hubei/Hangmei/01/2006 的 nep 蛋白的编码序列分别克隆至哺乳动物双杂交质粒pBind-vector,利用哺乳动物双杂交技术检测GPS2与不同来源nep之间相互作用的保守性。实验证明,GPS2与nep之间的相互作用具有一定的保守性,与克隆的nep蛋白之间都具有较强的相互作用。(3)nep与GPS2相互作用区域的确定根据文献报道以及nep蛋白结构特征,分别克隆了 nep蛋白的多个截短突变蛋白 nep(2-llaa)、nep(12-21aa)、nep(22-31aa)、nep(32-41aa)、nep(42-53aa)、nep(2-53aa)、nep(54-121aa)、nep(12-121aa)、nep(20-121aa)。利用哺乳动物双杂交技术筛选nep与GPS2相互作用的结构域。实验证明,在nep上两蛋白的互作结构域为32-41aa这一段肽链,并且该段氨基酸为核输出信号肽链。(4)GPS2对病毒增殖的影响通过模拟流感病毒聚合酶活力实验检测GPS2的表达对流感病毒聚合酶活力的影响,实验证明GPS2的过表达可以促进流感病毒聚合酶活力。同时通过模拟实验发现,同时转染一定量的nep蛋白时,可以减缓其对聚合酶的促进作用。(5)GPS2抑制病毒增殖激活的AP-1依赖基因的表达在Hela细胞中,使用TNF-a刺激AP-1依赖基因的表达,当过表达GPS2时,其表达量明显降低。并且当GPS2主要定位于细胞质中,其对该启动子的活性抑制更加明显。同时,在Hela细胞和MDCK细胞中,使用流感病毒刺激后,发现只有在流感病毒能够增殖复制时,才能促进AP-1依赖基因的表达,并且转染GPS2后能明显抑制AP-1依赖基因的表达。

关键词： A型流感病毒 nep GPS2 蛋白相互作用核输出信号 AP-1

双氢睾酮对Aβ降解酶nep、CD147表达的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

双氢睾酮对Aβ降解酶NEP、CD147表达的影响

作者：王海东河北医科大学

学位级别：硕士

目的:以大鼠海马组织及SH-SY5Y细胞为研究对象,通过免疫组织化学、Western blot、RT-PCR技术,观察去势、雄激素补充、细胞补充雄激素培养对nep、CD147表达的影响。探讨雄激素在Aβ清除中的作用机制。方法:1自然衰老雄性Sprague-Dawley(... 详细信息

目的:以大鼠海马组织及SH-SY5Y细胞为研究对象,通过免疫组织化学、Western blot、RT-PCR技术,观察去势、雄激素补充、细胞补充雄激素培养对nep、CD147表达的影响。探讨雄激素在Aβ清除中的作用机制。方法:1自然衰老雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠海马内nep、CD147的蛋白表达实验选用3月龄及20月龄健康雄性SD大鼠各5只,分3月龄组(3m)和20月龄组(20 m)。10%水合氯醛麻醉断头取脑,冰上快速剥离海马组织至于RIPA裂解液内,超声破碎后低温离心取上清。BCA法测定蛋白浓度、组织变性。SDS-聚丙烯酸氨凝胶电泳、转膜、孵育抗体。Odyssey红外激光扫描成像系统显影,以GAPDH为内参,测定两组蛋白相对表达水平。2去势及DHT补充对SD雄性大鼠海马组织中nep、CD147表达的影响实验选用3月龄健康雄性SD大鼠72只,随机分假手术组(Sham组),去势组(GDX组)和去势+DHT补充治疗组(DHT)组,每组24只。DHT组及GDX组行去势手术,Sham组保留睾丸,3 d后DHT组大鼠给予腹腔注射DHT(5 ug/ul,注射剂量500 ug/kg.d),GDX组和Sham组给予等量玉米油腹腔注射。连续给药30 d。2.1 Elisa法检测血清DHT水平每组取12只SD大鼠,麻醉后断头取血静置后,3000 rpm 20 min离心取上清,-20℃保存待测,采用Elisa法检测血清DHT水平。剥离后海马组织取一侧放入EP管内置于液氮中备用。另一侧于超声粉碎机内粉碎,冰置5 min后,低温高速离心机分离,取上清约300 ul,备用。2.2 Western blot检测海马组织中雄激素受体(AR)、nep、CD147的蛋白表达将2.1中一侧海马组织进行Western blot检测,分别孵育AR、nep、CD147一抗,以GAPDH为内参测定各组中AR、nep、CD147的相对表达水平。2.3 RT-PCR检测海马组织中nep、CD147的mRNA表达将2.1中另一半海马组织进行RNA提取、反转录、聚合酶链式反应(PCR)、琼脂糖凝胶电泳,紫外线成像系统检测,以β-actin为内参测定两组RNA中nep、CD147的相对表达水平。2.4免疫组织化学方法检测海马组织中nep、CD147的表达每组取12只SD大鼠,麻醉后经心灌注多聚甲醛,断头取脑,选取视交叉至上丘节段脑组织进行石蜡切片,免疫组织化学染色分别孵育nep、CD147一抗,DAB显色。正置显微镜下观察照相,观察阳性表达部位,测定平均光密度值(AOI)。3 DHT对SH-SY5Y细胞中nep、CD147表达的影响DMEM-F12培养基、37℃、5%CO条件下培养SH-SY5Y细胞。随机分为对照组(Con组)及DHT干预组(DHT组),DHT组给予100 nM DHT作用12 h,对照组给予等量DMSO。利用免疫细胞荧光染色观察nep、CD147在SH-SY5Y细胞中的表达及定位;RT-PCR和Western blot检测nep、CD147的RNA和蛋白表达变化。结果:1.自然衰老雄性SD大鼠海马内nep、CD147的蛋白检测结果nep的Western blot结果显示:与3月龄组(0.54±0.04)相比,20月龄组(0.35±0.07)的蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义(Pnep、CD147表达的影响2.1血清DHT的Elisa结果与Sham组(845.89±81.26)相比,GDX组(47.89±7.47)血清DHT水平均明显降低,差异具有统计学意义(Pnep、CD147蛋白结果AR的Western blot检测结果显示:与Sham组(1.13±0.04)相比,GDX组(0.63±0.10)明显降低,差异具有统计学意义(Pnep的Western blot检测结果显示:与Sham组(0.92±0.13)相比,GDX组(0.59±0.12)明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与GDX组(0.59±0.12)相比,DHT组(0.72±0.09)有所增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。CD147的

关键词：双氢睾酮海马 SH-SY5Y细胞 Aβ降解酶 nep CD147