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ndrg4在宫颈癌细胞中的表达及其对增殖的影响

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实用医学杂志 2016年第22期32卷 3673-3676页

作者：罗会芳张勇西南医科大学临床医学院四川省泸州市646000 绵阳市中心医院妇产科 621000

目的:研究N-MYC下游调控基因4在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法:通过荧光实时定量聚合酶链反应和免疫印迹检测HeLa细胞中ndrg4的表达,构建ndrg4稳转细胞系HeLa-ndrg4。CCK-8法检测ndrg4对Hela细胞增... 详细信息

目的:研究N-MYC下游调控基因4在宫颈癌细胞中的表达及其对宫颈癌细胞增殖、凋亡及周期的影响。方法:通过荧光实时定量聚合酶链反应和免疫印迹检测HeLa细胞中ndrg4的表达,构建ndrg4稳转细胞系HeLa-ndrg4。CCK-8法检测ndrg4对Hela细胞增殖的影响,流式细胞术检测ndrg4对Hela细胞凋亡及周期的影响。结果:宫颈癌细胞中ndrg4 m RNA和蛋白表达水平均较人正常宫颈内皮细胞显著降低,HeLa-ndrg4细胞的增殖能力显著低于HeLa-MOCK细胞,而凋亡能力显著高于HeLa-MOCK细胞。与HeLa-MOCK细胞相比,HeLa-ndrg4细胞周期被阻滞于G1期。HeLa-ndrg4细胞中p-Akt的蛋白水平较HeLa-MOCK细胞显著降低,而PTEN的蛋白水平较HeLa-MOCK细胞显著升高。结论 :ndrg4在宫颈癌中作为抑癌基因发挥作用。

关键词： ndrg4 增殖凋亡周期 PI3K/Akt

ndrg2和ndrg4在直肠癌组织中的表达及临床意义

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安徽医科大学学报 2011年第10期46卷 1047-1049页

作者：杨锦雷常家聪刘弋陈军安徽医科大学第一附属医院普通外科合肥230022

目的探讨抑癌基因NRDG2和ndrg4在直肠癌组织中的表达及对直肠癌临床病理的意义。方法选取手术切除并经病理证实的直肠癌标本44例作为实验组,另取44例相应癌旁正常组织作为对照组。采用免疫组化SP法测定直肠癌组织、癌旁正常组织中NRDG2... 详细信息

目的探讨抑癌基因NRDG2和ndrg4在直肠癌组织中的表达及对直肠癌临床病理的意义。方法选取手术切除并经病理证实的直肠癌标本44例作为实验组,另取44例相应癌旁正常组织作为对照组。采用免疫组化SP法测定直肠癌组织、癌旁正常组织中NRDG2和ndrg4的表达水平。结果 NRDG2和ndrg4在44例直肠癌组织中均有不同程度的表达:NRDG2阳性率为54.5%(24/44),ndrg4阳性率为59.1%(26/44),均明显低于44例癌旁正常组织中的93.2%(41/44)和90.9%(40/44),且两者之间的蛋白表达呈正相关。此外NRDG2和ndrg4的表达与肿瘤组织分化级别及淋巴结转移相关,差异有显著性(Pndrg4表达失常,影响了正常蛋白质的表达水平,推测NRDG2和ndrg4诱导的信号通路对直肠癌的形成起到抑制作用,其表达水平的失常对直肠癌的发生发展起着某种作用。

关键词：直肠肿瘤免疫组织化学 NRDG2 ndrg4

ndrg2、ndrg4基因在直肠癌组织中的表达及临床意义的研究

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NDRG2、NDRG4基因在直肠癌组织中的表达及临床意义的研究

作者：杨锦雷安徽医科大学

学位级别：硕士

目的探讨从蛋白水平研究NRDG2和ndrg4在直肠癌组织和癌旁组织中的表达情况,分析二者与直肠癌病理分型、淋巴结转移、临床分期和肿瘤细胞分化程度等临床病理资料的相关性,探讨其与直肠癌的发生、发展及临床特征之间的关系,期待从分子生... 详细信息

目的探讨从蛋白水平研究NRDG2和ndrg4在直肠癌组织和癌旁组织中的表达情况,分析二者与直肠癌病理分型、淋巴结转移、临床分期和肿瘤细胞分化程度等临床病理资料的相关性,探讨其与直肠癌的发生、发展及临床特征之间的关系,期待从分子生物学水平探求直肠癌的靶向治疗的可行性。方法选取安徽医科大学第一附属医院2009年-2010年间手术切除并经病理证实的中低位直肠癌标本44例作为实验组,所有病例在术前均未接受化疗、放疗或其他抗癌治疗,并有完整的随访资料。另取该组病例相应癌旁组织作为对照组。采用抗生蛋白链霉素-生物素标记法(SP)免疫组化检测法测定直肠癌组织、癌旁组织中NRDG2和ndrg4蛋白的表达水平,分析上述指标与直肠癌大小、浸润深度、组织分化程度、淋巴结转移及临床分期的关系及上述指标之间的关系。统计学分析:采用SPSS13.0统计软件包处理数据,P44例直肠癌组织中,ndrg2蛋白阳性的24例,阳性表达率为54.5%(24/44);ndrg4阳性的26例,阳性表达率为59.1%(26/44)。在44例癌旁组织中,ndrg2和ndrg4阳性的分别为93.2%(41/44)与90.9%(40/44)。直肠癌组织中ndrg2和ndrg4蛋白的表达明显低于癌旁组织,两者差异具有统计学意义(Pndrg2蛋白阳性的24例,其中有22例ndrg4表达阳性,同时阳性率为50%(22/44),利用Pearson列联系数来描述,本例列联系数r为0. 587,可见直肠癌组织中ndrg2与ndrg4蛋白的表达存在着关联性。3,直肠癌组织中ndrg2和ndrg4蛋白的表达与直肠癌组织细胞分化程度及淋巴结转移情况密切相关,两者差异具有统计学意义(Pndrg2和ndrg4蛋白表达越低。4,直肠癌组织中ndrg2和ndrg4蛋白的表达与直肠癌患者的其它临床资料包括性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及Dukes分期均无关,两者差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论1,直肠癌组织中ndrg2和ndrg4蛋白的表达明显低于癌旁组织,ndrg2和ndrg4诱导的信号通路可能在直肠癌形成过程中起着某种重要作用,推测其参与了抑制直肠癌的发病过程。2,ndrg2和ndrg4蛋白在直肠癌组织中的表达存在关联性,提示二者可能在直肠癌的发生、发展过程中起协同作用。3,ndrg2和ndrg4蛋白的表达与直肠癌的某些病理生物学特性有关,肿瘤分化程度越低、有淋巴结转移,ndrg2和ndrg4蛋白的表达就越低,提示二者在直肠癌的进展过程中起着某种抑制作用。4,直肠癌组织中ndrg2和ndrg4蛋白的表达与直肠癌患者的其它临床资料包括患者性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度及Dukes分期均无关,说明ndrg2和ndrg4蛋白表达不受上述诸因素的影响,可能是直肠癌发生、发展过程中相对较独立的影响因素。5,直肠癌中ndrg2和ndrg4蛋白的低表达,且以某种方式抑制直肠癌的淋巴结转移的情况,推测激活并维持ndrg2和ndrg4诱导的信号转导通路可能在防治直肠癌发生发展中起重要作用,为直肠癌靶向治疗提供分子基础。

关键词：直肠癌 NRDG2 ndrg4 抑癌基因靶向治疗

大肠癌ndrg4基因甲基化的临床意义及ndrg4影响大肠癌细胞生物学行为的研究

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大肠癌NDRG4基因甲基化的临床意义及NDRG4影响大肠癌细胞生物学行...

作者：马晓阳成都中医药大学

学位级别：硕士

目的探索N-Myc下游调节基因4(N-Myc downstream regulated gene 4,ndrg4)基因启动子区甲基化与大肠癌临床病理特征的关系,并分析基因甲基化对大肠癌的潜在诊断价值和临床意义;利用基因表达谱数据动态分析(gene expression profiling int... 详细信息

目的探索N-Myc下游调节基因4(N-Myc downstream regulated gene 4,ndrg4)基因启动子区甲基化与大肠癌临床病理特征的关系,并分析基因甲基化对大肠癌的潜在诊断价值和临床意义;利用基因表达谱数据动态分析(gene expression profiling interactive analysis,GEPIA)数据库分析ndrg4基因在大肠癌组织和正常组织中的表达水平;构建ndrg4稳定过表达的大肠癌细胞系并探讨ndrg4基因影响大肠癌细胞生物学行为的作用机制。方法(1)收集2014年1月至2016年12月期间的大肠癌石蜡组织43例及癌旁石蜡组织24例。采用定量甲基化特异性PCR(quantitative methylation specific PCR,q MSP)方法对各样本ndrg4基因启动子区的甲基化检出率和甲基化程度进行分析,并分析ndrg4基因启动子区甲基化检出率与临床病理特征的关系。利用敏感性、特异性和受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)评价ndrg4基因启动子区甲基化在大肠癌中的诊断价值。借助GEPIA数据库分析ndrg4基因在大肠癌组织和正常组织中的表达水平。(2)构建ndrg4稳定转染的大肠癌细胞系HCT116,采用qRT-PCR和Western blotting实验验证稳转细胞系是否构建成功。CCK-8实验检测过表达前后细胞存活和生长的变化,克隆形成实验检测细胞群体依赖性和增殖能力的变化,Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力的变化,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期的变化。Western blotting实验检测ndrg4过表达对细胞内p-AKT(Ser473)含量的影响。结果ndrg4基因启动子区甲基化在大肠癌组织和癌旁组织中的阳性率分别为65.12%(28/43)和4.17%(1/24);与癌旁组织相比较,ndrg4基因启动子区甲基化在大肠癌组织中的甲基化程度和甲基化检出率均更高(P=0.000,P=0.000);ndrg4基因启动子区甲基化区分大肠癌组织和癌旁组织的曲线下面积(area under curve,AUC)为0.8232(P=0.000),敏感性为65.12%,特异性为95.83%;ndrg4基因启动子区甲基化与大肠癌患者临床病理特征均无关联(P>0.05);ndrg4在正常组织中的表达水平显著高于大肠癌组织(Pndrg4过表达可显著抑制大肠癌细胞的生长活力、克隆形成能力、细胞迁移和侵袭能力,诱导细胞凋亡,减少S期细胞;ndrg4过表达可显著减少大肠癌细胞内p-AKT(Ser473)的表达。结论ndrg4基因启动子区高度甲基化是筛查大肠癌的潜在有效分子标志物;ndrg4过表达可显著抑制大肠癌细胞的生长、增殖、凋亡及迁移侵袭等生物学行为;ndrg4基因可通过抑制PI3K/AKT信号通路在大肠癌细胞中发挥抑癌基因的相关作用。

关键词：大肠癌 DNA甲基化分子标志物 ndrg4 AKT

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ndrg4基因的克隆、表达及抑瘤活性研究

中国生化药物杂志 2006年第3期27卷 137-141页

作者：陈杰张翊饶春明吴梧桐王军志河南省药品检验所河南郑州450003 中国药品生物制品检定所北京100050 中国药科大学江苏南京210009

目的克隆、表达抑癌基因ndrg4,纯化后考察其抑瘤活性。方法将ndrg4基因克隆进PQE30/M15表达载体,诱导表达后亲和色谱纯化,对纯化表达产物进行一系列检测,考察其抑瘤作用。结果表达产物ndrg4蛋白相对分子质量为38 856,表达量为19.58%,纯... 详细信息

目的克隆、表达抑癌基因ndrg4,纯化后考察其抑瘤活性。方法将ndrg4基因克隆进PQE30/M15表达载体,诱导表达后亲和色谱纯化,对纯化表达产物进行一系列检测,考察其抑瘤作用。结果表达产物ndrg4蛋白相对分子质量为38 856,表达量为19.58%,纯度为92%,等电点为6.2,流式细胞术证实该蛋白质对HHCC和7901肿瘤细胞均阻滞在G1期,细胞实验和裸鼠致瘤抑制实验证实该蛋白质对肿瘤细胞的生长和肿瘤的发生发育有较强抑制作用。结论构建了ndrg4的PQE30/M15表达载体并取得高表达,表达蛋白质有较强抑瘤活性,为基因功能研究奠定了基础。

关键词： ndrg4 克隆表达纯化肿瘤抑制作用

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ndrg4在卵巢癌中的表达

哈尔滨医科大学学报 2017年第5期51卷 434-437页

作者：曹雪娇董丽娜谭文华刘巍李委佳哈尔滨医科大学附属第一医院妇产超声科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学附属第二医院妇产科黑龙江哈尔滨150081

目的探讨卵巢上皮性肿瘤中N-myc下游调节基因4(N-myc downstream regulated gene4,ndrg4)的表达水平与卵巢上皮性恶性肿瘤发生发展及预后的关系。方法采用免疫组化法及Realtime-PCR检测了90例卵巢上皮性癌组织(包括30例卵巢粘液性腺癌... 详细信息

目的探讨卵巢上皮性肿瘤中N-myc下游调节基因4(N-myc downstream regulated gene4,ndrg4)的表达水平与卵巢上皮性恶性肿瘤发生发展及预后的关系。方法采用免疫组化法及Realtime-PCR检测了90例卵巢上皮性癌组织(包括30例卵巢粘液性腺癌、30例浆液性腺癌、30例子宫内膜样腺癌)、60例正常卵巢组织标本中ndrg4的表达情况,并结合临床耐药性及预后参数进行分析。结果卵巢上皮性肿瘤组织中及卵巢上皮性交界性肿瘤组织中ndrg4表达低于正常卵巢组织,差异具有统计学意义(Pndrg4在在卵巢癌组织中的表达明显低于正常组织;90例卵巢癌样本与60例正常卵巢标本通过每组4例卵巢癌组织及2例正常卵巢组织以RealtimePCR方法相比,ndrg4在正常卵巢组织的表达明显低于卵巢癌组织,趋势明显。结论 ndrg4作为一种新型抑癌基因与卵巢上皮性癌的临床变量、预后及放化疗药物的耐药有关。

关键词： ndrg ndrg4 WNT通路 MMP2 上皮间充质转化

β-榄香烯上调ndrg4表达水平抑制宫颈癌细胞增殖与侵袭

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遵义医科大学学报 2022年第3期45卷 304-309页

作者：海斯莱提·艾尔肯夏木西卡玛尔·阿布都克热木热娜柯孜·图尔荪新疆喀什地区第一人民医院妇科新疆喀什844000

目的探究β-榄香烯对宫颈癌细胞增殖与侵袭的作用及机制。方法将对数生长期的HeLa细胞分别用不同浓度的β-榄香烯(0、20、30、40μg/mL)处理后,采用MTT法检测HeLa细胞增殖能力,Transwell检测HeLa细胞的侵袭能力,划痕实验检测HeLa细胞的... 详细信息

目的探究β-榄香烯对宫颈癌细胞增殖与侵袭的作用及机制。方法将对数生长期的HeLa细胞分别用不同浓度的β-榄香烯(0、20、30、40μg/mL)处理后,采用MTT法检测HeLa细胞增殖能力,Transwell检测HeLa细胞的侵袭能力,划痕实验检测HeLa细胞的迁移能力,流式细胞仪检测HeLa细胞凋亡情况,qRT-PCR检测HeLa细胞中ndrg4基因的表达水平、Western blotting检测HeLa细胞中ndrg4蛋白和PI3K/Akt通路相关蛋白的表达水平。结果与β-elemene 0组细胞相比,用不同浓度的β-榄香烯处理后,细胞的增殖能力呈时间和浓度依赖性降低且侵袭细胞数明显减少,划痕闭合率明显降低,细胞凋亡率也呈浓度依赖性增加。不同浓度的β-榄香烯处理组中ndrg4的基因和蛋白表达水平较β-elemene 0组高,而且p-Akt蛋白的表达水平与β-榄香烯的浓度呈依赖性,高浓度组的表达量最低。结论β-榄香烯能通过上调宫颈癌细胞ndrg4的表达水平来抑制细胞增殖、侵袭和转移能力,增加细胞凋亡,从而抑制肿瘤的发展。

关键词：宫颈癌 β-榄香烯 ndrg4 增殖侵袭

胃癌组织中SFRP2和ndrg4的表达及其临床意义

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实用癌症杂志 2020年第1期35卷 31-34页

作者：刘银花河南省濮阳市油田总医院

目的探讨胃癌组织中SFRP2和ndrg4的表达及其临床意义。方法选取64例接受手术切除治疗的胃癌患者作为研究对象,取适量胃癌病灶组织作为观察组,距离肿瘤边缘5 cm以上的癌旁正常组织则为对照组。分别采用Western-blot和荧光定量PCR检测胃... 详细信息

目的探讨胃癌组织中SFRP2和ndrg4的表达及其临床意义。方法选取64例接受手术切除治疗的胃癌患者作为研究对象,取适量胃癌病灶组织作为观察组,距离肿瘤边缘5 cm以上的癌旁正常组织则为对照组。分别采用Western-blot和荧光定量PCR检测胃癌病灶组织和正常组织中SFRP2和ndrg4蛋白及mRNA含量。结果SFRP2和ndrg4在胃癌病灶组织和正常组织中均有表达,病灶组织中SFRP2和ndrg4灰度值分别为(0. 149±0. 044)和(0. 19±0. 038),明显低于正常组织中的(0. 557±0. 123)和(0. 740±0. 093);此外,胃癌病灶组织中SFRP2和ndrg4mRNA的相对表达量分别为(0. 331±0. 048)和(0. 276±0. 085),正常组织中的相对表达量则是(1. 056±0. 145)和(1. 043±0. 150)。胃癌病灶组织中的SFRP2和ndrg4蛋白含量及mRNA水平均显著低于正常组织,差异具有统计学意义(P ndrg4联合检测敏感性和特异性分别为44. 2%和87. 6%,优于单独检测。结论胃癌中SFRP2和ndrg4表达同时下调并参与了其病理发展,联合测定上述肿瘤相关因子对提高胃癌诊断的特异性具有重要临床意义。

关键词：胃癌 SFRP2 ndrg4 临床意义

粪便SDC2和ndrg4基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用分析

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湖南师范大学学报（医学版） 2021年第6期18卷 88-92页

作者：金文文张晓刘龙周琼毛玉环谭咸操谭黎明湖南师范大学附属第一医院/湖南省人民医院长沙410000

目的:有效的筛查能显著降低结直肠癌的发病率和死亡率。本研究通过SDC2和ndrg4基因粪便甲基化水平与结直肠癌的关联性分析,评价其在结直肠癌筛查中的临床价值。方法:收集2019年1月1日~2020年12月31日湖南省人民医院就诊的49例样本,其中... 详细信息

目的:有效的筛查能显著降低结直肠癌的发病率和死亡率。本研究通过SDC2和ndrg4基因粪便甲基化水平与结直肠癌的关联性分析,评价其在结直肠癌筛查中的临床价值。方法:收集2019年1月1日~2020年12月31日湖南省人民医院就诊的49例样本,其中结直肠癌患者16例,结直肠癌术后化疗患21例,结直肠息肉患者12例,采用荧光定量PCR法检测粪便中SDC2和ndrg4基因甲基化状态,同时采用化学发光法检测血清肿瘤标志物癌胚抗原(carcinoembryonicantigen,CEA)和糖类抗原19-9(carbohydrateantigen199,CA19-9),分析检测结果与临床病症的关联性。结果:结直肠癌患者组SDC2基因甲基化阳性率为75%,结直肠癌术后化疗组阳性率为9,52%,直肠息肉组阳性率为0%,3组间比较,差异有统计学意义。结直肠癌组SDC2基因甲基化阳性率高于结直肠癌术后化疗组阳性率,差异有统计学意义。SDC2联合ndrg4基因甲基化检测阳性检出率最高。SDC2/ndrg4基因甲基化检测灵敏度分别为75%、25%、75%,特异度为93.94%、100%、93.94%,CEA、CA19-9、CEA/CA19-9检测灵敏度62.5%、37.5%、68.75%,特异度为84.85%、87.88%、78.79,ndrg4特异度高于SDC2、SDC2/ndrg4、CEA、CA19-9、CEA/CA19-9,SDC2联合ndrg4基因甲基化检测阳性预测值(85.71%)及阴性预测值最高(88.57%),受试者工作曲线(ROC)分析显示,SDC2联合ndrg4基因甲基化检测最高(0.905)。结论:SDC2基因甲基化检测对结直肠癌的阳性检出率优于ndrg4基因甲基化检测,SDC2和ndrg4甲基化联合检测诊断性能最高,SDC2和ndrg4可作为结直肠癌筛查和预后判断的有效指标。

关键词： SDC2 ndrg4 肿瘤标志物结直肠癌筛查