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长链非编码RNA Linc00909在结直肠癌中的表达及其对放化疗敏感性的影响

长链非编码RNA Linc00909在结直肠癌中的表达及其对放化疗敏感性...

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作者：吴勇福建医科大学

学位级别：硕士

结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是一种最常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均居恶性肿瘤第三位,且过去的10年里在我国呈逐年上升趋势,已严重影响国人的身心健康。对于局部进展期中低位直肠癌(Local Advanced Rectal Cancer,LARC)的患者... 详细信息

结直肠癌(Colorectal Cancer,CRC)是一种最常见的恶性肿瘤,其发病率和死亡率均居恶性肿瘤第三位,且过去的10年里在我国呈逐年上升趋势,已严重影响国人的身心健康。对于局部进展期中低位直肠癌(Local Advanced Rectal Cancer,LARC)的患者,术前接受新辅助放化疗(Neo-adjuvant chemoradiotherapy,ncrt),再行根治性手术治疗已成为标准治疗方案。研究表明,采取上述治疗方案在直肠癌的肿瘤缩小、降期、提高保肛率以及减少局部复发等方面具有明显优势。但部分患者因放化疗抵抗引起治疗失败、疾病复发,进而导致预后较差。因此探究直肠癌对放化疗敏感机制并寻找放化疗抵抗的新型治疗靶点用以增强放化疗敏感,使患者获得更大收益。长链非编码RNA(Long non-coding RNA,LncRNA)是指一类转录本长度大于200bp,但不编码蛋白质的长链RNA分子,能够在转录前、转录及转录后等多种层面上调控相关基因的表达,从而发挥关键的生物学功能。近年来,越来越多的研究结果表明LncRNA与结直肠癌的发生、发展、耐药、复发及转移存在密切关系,并且可以作为结直肠癌诊断及预测患者预后潜在的分子标志物和治疗靶点。现有研究已经揭示了部分LncRNA在结直肠癌中的表达水平异常,并且其中一部分有较为深入的研究报道,但还有大部分LncRNA在结直肠癌发生、发展过程中的生物学功能和分子机制尚不明确。Linc00909是一个新的LncRNA分子,目前相关的研究报道表明其可以作为一种重要的致癌性LncRNA,同时在结直肠癌组织呈现高表达并提示不良预后,但其是否参与调控直肠癌ncrt敏感性,目前尚未见报道。本研究首先通过分析Linc00909在结直肠癌中表达及与预后关联性,并在体内和体外初步探讨了改变Linc00909表达对放化疗敏感性的影响及其可能的分子机制。研究具体分为以下两个部分第一部分Linc00909在结直肠癌及放化疗组织中的表达及临床意义研究目的探讨Linc00909在直肠癌ncrt抵抗组织和敏感组织之间以及结直肠癌组织和癌旁组织之间的表达差异,分析该LncRNA的表达与患者术后生存预后及放化疗敏感性是否具有相关性,为证明其能否作为预测放化疗敏感性和评估患者预后的分子标记物提供理论依据。方法收集2017年1月至2017年12月福建医科大学附属协和医院术前接受新辅助放化疗和根治性切除术的患者,收集手术切除获得的直肠癌ncrt抵抗组织和敏感组织标本30例(ncrt抵抗组织19例,ncrt敏感组织11例),采用RT-qPCR实验,检测Linc00909在两组间的表达水平;收集2017年1月至2017年12月福建医科大学附属协和医院196对结直肠癌患者癌组织和相邻癌旁组织标本;采用RT-qPCR实验,检测Linc00909在两组间的表达水平,同时对相应患者进行随访,获得对应的临床信息和随访信息,统计分析Linc00909与患者术后生存预后及临床病理信息之间的相关性。Linc00909的相对表达水平用ΔCt表示,即ΔCt越小,相对表达水平越高。结果RT-qPCR结果表明,与ncrt敏感组织(ΔCt=10.02±0.73)相比,Linc00909在ncrt抵抗组织(ΔCt=7.59±0.37)中的表达水平显著上调(Pncrt抵抗组织中明显高表达;也在癌组织中呈现表达水平上调的状态;Linc00909的表达水平与患者的OS和DFS呈负相关,并且可以作为影响患者OS和DFS的独立危险因素。Linc00909有潜力可以作为预测患者放化疗敏感性及评估患者预后的分子标记物。第二部分Linc00909通过增强结直肠癌细胞干细胞样特性影响放化疗敏感性目的探索过表达Linc00909基因对结直肠癌细胞恶性生物学行为的影响,并初步探讨其影响结直肠癌细胞放化疗敏感性可能存在的分子机制。方法构建Linc00909慢病毒载体并转染结直肠癌细胞株SW620、DL

关键词：直肠癌 ncrt 预后 Linc00909 耐药结直肠癌细胞

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