检索结果-南通市图书馆

应用GAR-HRP进行甘薯病毒ncm-elisa检测试验

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山东农业科学 2002年第1期34卷 36-37页

作者：王秀丽李广存王绛辉杨煜毕玉平王毅 Luis Salazar 山东省农业科学院山东济南250100 国际马铃薯中心

分别采用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体 (GAR -HRP)和碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔抗体(GAR -AP) ,对甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)、甘薯潜隐病毒 (SPLV)、甘薯轻斑驳病毒 (SPMMV)及甘薯褪绿病毒(SPCFV)进行ncm -elisa检测 ,结果表明 ,采用G... 详细信息

分别采用辣根过氧化物酶标记的羊抗兔抗体 (GAR -HRP)和碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔抗体(GAR -AP) ,对甘薯羽状斑驳病毒 (SPFMV)、甘薯潜隐病毒 (SPLV)、甘薯轻斑驳病毒 (SPMMV)及甘薯褪绿病毒(SPCFV)进行ncm -elisa检测 ,结果表明 ,采用GAR -HRP进行ncm -elisa检测对于SPFMV、SPLV、SPM MV、SPCFV同样有效 ,且特异性高 ,重现性好 ,在某些方面优于GAR -AP。对于国内危害甘薯的SPFMV、SPLV等主要病毒 ,采用GAR -HRP进行elisa检测更加经济有效。

关键词： GAR-HRP 甘薯 ncm-elisa 硝酸纤维素膜酶联免疫吸附法病毒检测羊抗兔抗体辣根过氧化物酶

马铃薯环腐病菌快速检测方法(ncm-elisa)的建立

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中国马铃薯 2007年第3期21卷 142-145页

作者：胡林双王晓丹闵凡祥郭梅李学湛白艳菊黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所农业部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心(哈尔滨) 黑龙江哈尔滨150086

建立检测马铃薯环腐病菌ncm-elisa方法并组装成试剂盒,应用于检测、检疫和流行病学调查具有实践意义。本研究以马铃薯环腐病菌为抗原,制备兔抗血清,利用碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔血清(GAR-AP)为酶标二抗,建立了马铃薯环腐病菌ncm-elisa... 详细信息

建立检测马铃薯环腐病菌ncm-elisa方法并组装成试剂盒,应用于检测、检疫和流行病学调查具有实践意义。本研究以马铃薯环腐病菌为抗原,制备兔抗血清,利用碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔血清(GAR-AP)为酶标二抗,建立了马铃薯环腐病菌ncm-elisa快速检测方法。结果表明:抗血清的最佳工作浓度为1:400,最低检出菌液浓度为1.0×106个.mL-1,特异性也比较强。因此,该方法具有敏感性高、特异性强、速度快、实用方便等特点,可以应用于马铃薯环腐病菌的快速检测和诊断。

关键词：马铃薯环腐病 elisa ncm-elisa

改进的ncm-elisa在甘薯试管苗病毒检测中的应用

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山东农业科学 1999年第3期31卷 42-44页

作者：王庆美颜廷进张立明山东省农业科学院作物研究所

采用局部改进的ＮＣＭ－ＥＬＩＳＡ技术对山东省主栽甘薯品种的试管苗进行带毒性检测，结果与常规ＮＣＭ－ＥＬＩＳＡ法相比，样品的ＳＰＦＭＶ阳性带毒株检出率由９１％～１５％提高到２２７％～４０％，ＳＰＬＶ阳性带毒株检出率... 详细信息

采用局部改进的ＮＣＭ－ＥＬＩＳＡ技术对山东省主栽甘薯品种的试管苗进行带毒性检测，结果与常规ＮＣＭ－ＥＬＩＳＡ法相比，样品的ＳＰＦＭＶ阳性带毒株检出率由９１％～１５％提高到２２７％～４０％，ＳＰＬＶ阳性带毒株检出率由５％～８％提高到１５％～２４％。经指示植物嫁接法验证，改进的ＮＣＭ－ＥＬＩＳＡ可直接用于甘薯试管苗的病毒检测。

关键词：甘薯试管苗 ncm-elisa 病毒检测

马铃薯病毒检测技术中ncm—elisa的应用

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山西农业科学 1991年第4期19卷 25-26页

作者：张国柱山西省农业科学院高寒作物研究所

本文采用一种新的酶联免疫技术—ncm—elisa对马铃薯主要病毒PVX、PVY、PLRV(卷叶病毒)进行了检测,结果比聚苯乙烯微量板酶联法(DAS—elisa)灵敏度高,而且经济简便,快速直观。对基层单位特别有用。

关键词：马铃薯病毒检测 ncm-elisa

Evaluation of Four Varieties of Sweetpotato (Ipomeoa Batatas (L.) Lam) under Different Sources of Planting Material for Field Performance and Viral Load

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Agricultural Sciences 2023年第8期14卷 1007-1021页

作者： Sumaila Mohammed Raphael Adu-Gyamfi Edward Carey Ted Crop Science Department University for Development Studies Tamale Ghana International Potato Centre Nyankpala Office Tamale Ghana

Sweetpotato is an important crop for food security in many developing countries which is cultivated using vine cuttings. Studies have revealed that there are at least fifteen well characterized viruses known to infect sweetpotato of which 10 are economically important that contribute to yield reduction. Planting materials use by farmers are often infected by one or more of these viruses. The aim of this study was to evaluate three different sources of planting materials of different health status for their field performance and virus presence. The sources of planting materials were in vitro generated platelets, symptomless Field materials and Farmer’s materials. Four sweetpotato varieties Apomuden, Bohye, Ligri and Dadanyuie were selected from each source of planting material. The trial was laid in a split plot design with the sources of planting material allocated to main plots and the varieties to sub-plots. The plantlets of the four varieties were planted at Botanga Irrigation Scheme in Northern region of Ghana. Viral symptom scores were taken twice, score 1 being the average from 4 - 7 weeks after planting (WAP) and score 2 being the average from 8 - 11 WAP. Nitrocellulose Membranes Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ncm-elisa) kits were employed for the detection of sweetpotato viruses on the field. The source of planting materials significantly influenced (P In vitro generated material showed the least symptoms of virus followed by Field materials. Apomuden and Bohye varieties recorded the highest virus score in the first and second virus symptom observational score respectively. ncm-elisa revealed that the viruses SPFMV, SPMMV, SPMSV, SPCFV, SPCSV, and CMV were significantly present among the different sources of planting materials. In vitro, Field and Farmer materials recorded ncm-elisa score of 0.225, 1.075 and 1.500 respectively. Apomuden variety recorded the highest virus score in the assay. Vine and root yield was higher among the in vitro generated mate

关键词： In Vitro Plant Material Sweetpotato Virus ncm-elisa

甘薯羽状斑驳病毒(SPFMV)和甘薯褪绿矮化病毒(SPCSV)荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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中国农业科学 2016年第1期49卷 90-102页

作者：卢会翔吕长文吴正丹罗凯尹旺杨航王季春张凯西南大学农学与生物科技学院

【目的】甘薯病毒病(sweet potato virus disease,SPVD)是甘薯上的毁灭性病害之一,严重时可造成90%以上的产量损失。论文旨在对甘薯SPVD染病植株中甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯褪绿矮化病毒(Sweet... 详细信息

【目的】甘薯病毒病(sweet potato virus disease,SPVD)是甘薯上的毁灭性病害之一,严重时可造成90%以上的产量损失。论文旨在对甘薯SPVD染病植株中甘薯羽状斑驳病毒(Sweet potato feathery mottle virus,SPFMV)和甘薯褪绿矮化病毒(Sweet potato chlorotic stunt virus,SPCSV)2种病毒的复合侵染情况进行研究,建立SPVD荧光定量RT-PCR快速检测方法,为SPVD的早期预警和流行学研究提供技术手段。【方法】选取重庆地区具有不同SPVD典型症状的甘薯品种(系)叶片作为试验材料,对其进行症状和SPFMV、SPCSV的硝酸纤维素膜酶联免疫吸附(ncm-elisa)检测;对供试材料叶片中的SPFMV外壳蛋白CP和SPCSV热激蛋白HSP70核苷酸序列进行克隆和序列分析,根据保守核苷酸序列设计荧光定量RT-PCR检测引物。以甘薯泛素(ubiquitin,UBI)和组蛋白(histone,H2B)编码基因为内参对供试样品进行荧光定量RT-PCR检测,与感染SPVD典型症状和ncm-elisa检测结果进行比较,并对取自不同甘薯品种(系)、相同品种(系)不同单株以及相同植株不同部位叶片检测结果进行比较,筛选可快速、精确、定量检测SPVD的荧光定量RT-PCR检测方法。【结果】症状学诊断表明不同甘薯品种(系)的感病叶片可能表现出不同的典型症状特点,同一品种(系)的不同感病植株感病症状相似但也存在差异。序列分析结果表明供试材料中SPFMV至少存在2个株系类型(RC和EA),SPCSV至少存在1个株系类型(WA)。在15份供试材料中,10份材料由ncm-elisa和荧光定量RT-PCR均检测到SPFMV和SPCSV的共同感染,且荧光定量RT-PCR检测结果与发病症状和ncm-elisa检测结果相吻合,其检测结果可准确反映甘薯SPVD染病植株中2种病毒复合侵染情况。荧光定量RT-PCR检测结果还表明,不同品种(系)或相同品种(系)不同单株病叶中SPFMV CP与SPCSV HSP70转录水平存在差异;相同植株顶端幼嫩叶片和中部成熟叶片中SPFMV CP与SPCSV HSP70转录水平也存在差异。染病材料中SPFMV中CP转录水平均相对较高,是SPCSV的HSP70转录水平的3—556倍。4份材料经ncm-elisa检测只有SPFMV而没有SPCSV感染,而荧光定量RT-PCR还可检测到其中2份材料中SPCSV HSP70转录水平,说明这2份材料中也存在SPFMV和SPCSV的共同感染,表明荧光定量RT-PCR比ncm-elisa检测结果更灵敏、准确。【结论】筛选出可利用SPFMV CP与SPCSV HSP70转录水平进行检测的荧光定量RT-PCR检测引物,建立了SPVD荧光定量RT-PCR快速检测方法,为SPVD针对性地监测预警提供了极为有效的方法。在建立甘薯SPVD防御体系时,需综合考虑2种甘薯病毒的共侵染特性和甘薯品种差异,采取针对性的监测和预警机制。

关键词：甘薯羽状斑驳病毒甘薯褪绿矮化病毒甘薯病毒病荧光定量RT-PCR ncm-elisa

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南阳市甘薯病毒病调查与病原血清学鉴定

河南农业科学 2005年第1期34卷 38-40页

作者：单林娜尚增强葛应兰李建波南阳农业学校河南南阳473003

普查了南阳市 13县 (市、区 )甘薯病毒病的发生情况 ,以甘薯叶片作样本 ,采用ncm -elisa方法检测病害样品 2 2 14个。结果表明 ,甘薯病毒病病田率达 10 0 % ,品种发病率 10 0 % ,未脱毒甘薯田病株率平均为 75 .9% ,脱毒甘薯田平均病株率... 详细信息

普查了南阳市 13县 (市、区 )甘薯病毒病的发生情况 ,以甘薯叶片作样本 ,采用ncm -elisa方法检测病害样品 2 2 14个。结果表明 ,甘薯病毒病病田率达 10 0 % ,品种发病率 10 0 % ,未脱毒甘薯田病株率平均为 75 .9% ,脱毒甘薯田平均病株率 12 .1% ;初步认定南阳市甘薯病毒病病原至少有 6种 ,即SPFMV、SPLV、SPCFV、SPMMV、C - 6、C - 8。以SPFMV和SPLV为主。

关键词：甘薯病毒病调查病原 ncm-elisa

中国甘薯病毒种类血清学鉴定及甘薯卷叶病毒CP基因表达载体构建

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中国甘薯病毒种类血清学鉴定及甘薯卷叶病毒CP基因表达载体构建

作者：申广颖河南科技大学

学位级别：硕士

甘薯是重要的粮食、饲料、工业以及能源作物。甘薯病毒病严重影响了甘薯的产量，造成其品质下降及种性退化。据报道，我国至少存在甘薯羽状斑驳病毒（Sweet potato feathery mottle virus，SPFMV）、甘薯卷叶病毒（Sweet potato leaf cu... 详细信息

甘薯是重要的粮食、饲料、工业以及能源作物。甘薯病毒病严重影响了甘薯的产量，造成其品质下降及种性退化。据报道，我国至少存在甘薯羽状斑驳病毒（Sweet potato feathery mottle virus，SPFMV）、甘薯卷叶病毒（Sweet potato leaf curl virus，SPLCV）等8种，因此，建立高效快速的病毒检测技术，及时检测病毒，对了解我国不同甘薯病毒的发生频率、分布以及复合侵染情况，为防治薯病毒病提供理论依据。试验利用ncm-elisa和ACP-elisa检验技术对我国14个省（市）在2013年采集的318份疑似带毒甘薯样品进行了甘薯病毒种类的血清学鉴定，结果如下。（1）利用ncm-elisa和ACP-elisa技术对全国采集的318份甘薯样品进行了SPFMV、SPMMV、SPC6V、SPCFV、SPMSV、CMV、SPCaLV、SPVG、SPLV、SPCSV、SPV2，11种病毒的血清学检测，11种病毒均检测出。（2）通过ncm-elisa和ACP-elisa检测，SPFMV检出率最高;SPV2侵染甘薯发生最普遍。（3）检测的318份样品中，由2种病毒复合侵染与5种病毒复合侵染的发生最为普遍。（4）复合侵染的142份样品中，共有100种复合侵染类型，其中SPFMV和SPC6V的混合侵染最普遍。（5）SPFMV和SPCSV检测同时呈现阳性的样品且具有典型的SPVD症状广泛分布于四川、山东、江苏、安徽等9个省（市）。（6）SPFMV最易和其他病毒发生混合侵染。试验通过基因工程方法，将SPLCV-YU CP基因克隆到原核表达载体pET-28a（+）上，成功构建了原核表达载体pET-SPLCV CP。

关键词：甘薯病毒 ncm-elisa ACP-elisa 外壳蛋白基因载体构建

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温郁金甘薯病毒感染与病原血清学鉴定

中国现代中药 2007年第7期9卷 8-9,12页

作者：钱华王衍彬浙江省林业科学研究院浙江杭州310023

目的:阐明导致温郁金种质退化的原因。方法:以温郁金块茎、根茎和叶片作样本,采用ncm-elisa方法进行检测。结果:在普通栽培的样品中发现甘薯病毒侵染,GAP栽培样品中未发现。块茎中检测到5种病毒复合侵染,根茎中检测到3种病毒复合侵染。... 详细信息

目的:阐明导致温郁金种质退化的原因。方法:以温郁金块茎、根茎和叶片作样本,采用ncm-elisa方法进行检测。结果:在普通栽培的样品中发现甘薯病毒侵染,GAP栽培样品中未发现。块茎中检测到5种病毒复合侵染,根茎中检测到3种病毒复合侵染。叶片部分目前尚未测出甘薯病毒。结论:初步认定温郁金病毒病病原至少有5种,即SPFMV、SPFMMV、SPLV、SPMSV、C-6。其中SPMSV属首次在国内植物中测出。

关键词：温郁金甘薯病毒病原 ncm-elisa