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中华中医药杂志 2018年第5期33卷 2056-2060页

作者：蒙玉娇李宁飞翟春艳底婷婷赵京霞王燕张璐张蕾李萍北京中医药大学北京100029 银屑病中医临床基础研究北京市重点实验室首都医科大学附属北京中医医院北京市中医研究所北京100010

目的:观察清热除湿汤对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导的nc/nga小鼠特应性皮炎样模型的干预作用,并对其可能机制进行探讨。方法:48只nc/nga小鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性对照(波尼松龙)组,清热除湿高、中、低剂量组,每组8只。观察特应... 详细信息

目的:观察清热除湿汤对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导的nc/nga小鼠特应性皮炎样模型的干预作用,并对其可能机制进行探讨。方法:48只nc/nga小鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性对照(波尼松龙)组,清热除湿高、中、低剂量组,每组8只。观察特应性皮炎小鼠模型皮损变化情况和行为学变化;HE与甲苯胺蓝染色观察皮损形态学变化;ELISA法检测血清中Ig E水平;流式细胞术检测脾脏Th1/Th2比例;RT-PCR法检测皮损中白细胞介素-4(IL-4)、干扰素γ(IFN-γ)m RNA相对表达量。结果:模型组小鼠出现搔抓增加(Pnc/nga小鼠特应性皮炎样皮损,抑制肥大细胞的活化和调节Th1/Th2平衡均是其作用机制,可深入探索;高剂量组较优。

关键词：特应性皮炎清热除湿汤 2 4-二硝基氟苯 nc/nga

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土槿乙酸对nc/nga小鼠特应性皮炎的作用及其机制研究

土槿乙酸对NC/Nga小鼠特应性皮炎的作用及其机制研究

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作者：王翼腾河北医科大学

学位级别：硕士

目的:本文研究传统中药土槿皮有效成分土槿乙酸(Pseudolaric acid B,PB)对nc/nga小鼠特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:1体内研究1.1 PB对nc/nga小鼠AD的药效学研究灌胃给药观察不同剂量的PB(5mg... 详细信息

目的:本文研究传统中药土槿皮有效成分土槿乙酸(Pseudolaric acid B,PB)对nc/nga小鼠特应性皮炎(Atopic dermatitis,AD)的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:1体内研究1.1 PB对nc/nga小鼠AD的药效学研究灌胃给药观察不同剂量的PB(5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg)对nc/nga小鼠AD作用后的皮损炎症评分、体重变化、脾脏指数、血清Ig E含量,H&E染色检测皮肤组织病理学变化。1.2 RT-PCR法检测不同剂量PB对nc/nga小鼠脾脏及皮肤组织中T-bet、GATA3、IFN-γ、IL-4、ASC、caspase-1、IL-1β、NLRP3、PPAR-γ、PPAR-δ、TLR-2、TLR-4、IL-17a、IL-17Ra、IL-22m RNA基因表达的影响。1.3 ELISA法检测不同剂量PB对nc/nga小鼠血清Ig E和相关细胞因子IL-1β、IL-17和IL-22含量的影响。1.4 Western-blot法检测不同剂量PB对nc/nga小鼠脾脏磷酸化AKT(Ser473)、RSK-2及磷酸化ⅠκBα(Ser32/Ser36)蛋白表达的影响。2体外研究2.1 MTT法检测PB体外对小鼠胸腺和脾脏细胞的毒性及对淋巴细胞增殖抑制作用。MTT法测定PB在体外对小鼠胸腺和脾细胞的毒性作用,并分析刀豆蛋白A(Con A)及脂多糖(LPS)诱导的小鼠T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖抑制作用。2.2荧光素酶报告基因检测PB对转染报告基因质粒的RAW264.7细胞PPAR-γ转录激活。结果:1不同剂量PB(5mg/kg、10mg/kg、20mg/kg)灌胃给药后,中、高剂量组明显改善nc/nga小鼠的体重下降、脾指数升高;H&E染色显示中、高剂量组能明显减轻nc/nga小鼠的表皮增厚和水肿,减少炎症细胞浸润,以上证明PB对nc/nga小鼠AD具有显著的治疗作用。2 RT-PCR和ELISA结果显示PB能够下调炎症因子TNF-α及炎症小体NLRP3、IL-1β、Caspase-1的基因表达;抑制IL-22和IL-17a的表达和分泌;同时促进PPAR-γ和PPAR-δ基因表达;抑制TLR-2和TLR-4基因的表达以及NF-κB通路信号分子Ⅰ-κBα的活性表达;此外,PB还能明显抑制AKT活化及RSK-2表达,通过多个作用靶点,从而调节机体免疫-炎症反应网络。3 MTT法检测发现,PB在体外对小鼠胸腺和脾淋巴细胞无明显的细胞毒性,IC50>1mmol/L,优于阳性药霉酚酸酯(23.22μmol/L),呈现时间-剂量依赖性地抑制Con A诱导的T细胞增殖,同时,对LPS诱导的B淋巴细胞增殖亦表现出一定程度的抑制作用,但其效应低于阳性对照药,提示PB可能选择性抑制T细胞活化增殖。荧光素酶报告基因分析,PB能够激活RAW264.7细胞中的PPAR-γ转录活性,上调PPAR-γ表达。结论:PB对nc/nga小鼠AD有良好的治疗效果,能够通过抑制IL-1β、TNF-α、Caspase-1、TLR-2/TLR-4基因表达,降低IL-22和IL-17分泌发挥作用,其机制可能与抑制淋巴细胞活化增殖、PPAR-γ转录激活,以及下调PI3K/AKT/NF-κB信号通路有关,且其毒性显著低于阳性药。因此,PB是具有良好的抗炎免疫抑制活性的中药单体,有望开发成具有自主知识产权新型药物用于治疗AD,具有广阔的研究前景。

关键词：土槿乙酸 AD nc/nga PPAR-γ NF-κB AKT

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Curative effect of BCG-polysaccharide nuceic acid on atopic dermatitis in mice

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Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 2014年第11期7卷 913-917页

作者： Liu-Hui Wang Ying Ye Yi-Qun Zhang Tao Xiao Dermatology Department Children's Hospital of Fudan University Traditional Chinese Medicine Department Children's Hospital of Fudan University Dermatology Department First Affiliated Hospital of University of South China

Objective:To explore the effect of bacilli Galmette-Gurin(BCG)-polysaccharide nuceic acid on atopic dermatitis in mice and its mechanism.Methods:Forty nc/nga mice were selected and randomly divided into Group A(model group),Group B(dexamethasone treatment group),Group C(BCG polysaccharide nucleic acid treatment group) and Group D(control group) with 10 mice in each group.Atopic dermatitis model were constructed by applying 2,4-dinitrochlorobenzene on the skin of the mice.Mice in Group D were treated with acetone solution(100 μ L) on the foot pad and abdomen after hair removal at the age of 7 weeks.then on ear skin at the age of 8-13 weeks.For mice in A,B and C groups,100 μL of acetone solution containing 2,4-dinitrochlorobenzene was applied to the foot pad and the abdomen at the age of 7 weeks,then on ear skins at the age of8 to 13 weeks.At the age of 7-13 weeks,mice in Group A and Group D were treated with 100 μL saline(i.p.);mice were given dexamethasone(0.1 mL/kg,i.p.) every other day for 7 weeks in Group B;mice were treated with BCG polysaccharide nucleic acid(0.5 mg/kg,i.p.) every other day for7 weeks in Group C.The ear thickness was measured every week and the scratching frequency was recorded 1 times for 10 min a week.The mice were sacrificed after the last administration of drugs,IgE,IL-4,IL-10,IL-I2 and IFN- γ in the plasma were detected using ELISA,and RT-PCR method was employed to detect the concentrations of IL-4,IL-10,IL-12 and IFN- γ proteins.After IIK staining,the lesion degree of inflammation in ear tissue was observed microscopically.Results:The ear thickness and scratching frequency of Group A were significantly higher than those in group B,C and D(Pnce between Group B and C(P>0.05);the concentrations of IgE,IL-4 and IL-10 in the plasma and the expression of IL-4,IL-10 mRNA in the spleen tissues of Group A,B and C were all significantly higher than those of Group D(Pncentrations of plasma IL-12 and IFN- γ,and spleen protein expression of IL

关键词： Atopic dermatitis BCG polysaccharide nucleic acid nc/nga mice Treatment

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