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同方学位论文库评论

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nasba技术在致病菌检测中的应用

中华微生物学和免疫学杂志 2013年第4期33卷 310-313页

作者：贺尔娜蔡挺张顺宁波大学医学院 315211 宁波市第二医院急诊科 315010 宁波大学医学院干细胞实验室 315211

细菌感染性疾病的发病率呈上升趋势，并且严重感染患者治疗延迟与死亡率升高密切相关。快速、准确检测致病菌是治疗和预防感染性疾病的关键。传统的细菌培养联合药物敏感试验检测周期长，灵敏度有限。PCR技术弥补了以上不足，但有DNA污... 详细信息

细菌感染性疾病的发病率呈上升趋势，并且严重感染患者治疗延迟与死亡率升高密切相关。快速、准确检测致病菌是治疗和预防感染性疾病的关键。传统的细菌培养联合药物敏感试验检测周期长，灵敏度有限。PCR技术弥补了以上不足，但有DNA污染引起假阳性的可能,

关键词：致病菌检测 nasba 细菌感染性疾病应用药物敏感试验 PCR技术感染患者细菌培养

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轮状病毒nasba检测研究

微生物学报 2006年第2期46卷 328-330页

作者：寇晓霞吴清平范宏英广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室

轮状病毒是世界范围内流行性胃肠炎暴发的重要病因。以患者粪便为样抽提轮状病毒RNA,在轮状病毒VP7高保守基因区段上设计引物,运用核酸序列依赖的扩增(nasba)法进行检测,变性琼脂糖凝胶电泳和Northern杂交验证。nasba预期的特异性产物为... 详细信息

轮状病毒是世界范围内流行性胃肠炎暴发的重要病因。以患者粪便为样抽提轮状病毒RNA,在轮状病毒VP7高保守基因区段上设计引物,运用核酸序列依赖的扩增(nasba)法进行检测,变性琼脂糖凝胶电泳和Northern杂交验证。nasba预期的特异性产物为392bp,并在仅以目标核酸为模板或在浓度高达1μg/μL的非特异性核酸存在的混合模板中,均有清晰的目标带产生,表现出了很高的特异性。其灵敏度和RT-PCR相同甚至更高,可检测到50pg的核酸,并且当反应时间为3h时检测灵敏度最高。nasba法扩增效率高、灵敏度高、快速易操作,尤其适用在基层单位推广应用。

关键词： nasba 轮状病毒检测胃肠炎 RT-PCR

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nasba——一种新型禽流感病毒检测方法

中国生物工程杂志 2005年第11期25卷 91-94页

作者：刘乐庭刘爽封燕芸陈建国于常海北京大学神经科学研究所北京大学医学部神经生物学系教育部神经科学重点实验室北京大学生命科学院北京100871

nasba(nucleic acid sequence-based amplification)是一项持续等温的核酸扩增技术,特别适合于以RNA为模版的扩增,与其它常用禽流感病毒检测方法(病毒培养法、免疫学方法和PCR)相比,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点。就nasba的... 详细信息

nasba(nucleic acid sequence-based amplification)是一项持续等温的核酸扩增技术,特别适合于以RNA为模版的扩增,与其它常用禽流感病毒检测方法(病毒培养法、免疫学方法和PCR)相比,具有灵敏度高、特异性强、操作简便等特点。就nasba的操作原理及其在禽流感病毒检测中的成功应用进行综述。nasba不仅成为禽流感病毒检测的有力工具,而且对于其它恶性传染病的监测、检测同样具有重要价值和意义。

关键词： nasba 禽流感检测方法

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nasba技术及其在畜禽病毒检测中的应用

动物医学进展 2011年第7期32卷 101-104页

作者：张荣升鄢明华张国伟张莉天津农学院天津300384 天津市畜牧兽医研究所天津300112

nasba即核酸序列依赖扩增技术,主要用于扩增RNA,是由一对特异性的引物介导的、连续均一的、体外核酸序列等温扩增反应过程。该技术具有操作简便,特异性强,敏感性高,快速,高通量等优点,目前已经广泛应用于人类与动物的多种病毒性疾病的检... 详细信息

nasba即核酸序列依赖扩增技术,主要用于扩增RNA,是由一对特异性的引物介导的、连续均一的、体外核酸序列等温扩增反应过程。该技术具有操作简便,特异性强,敏感性高,快速,高通量等优点,目前已经广泛应用于人类与动物的多种病毒性疾病的检测,具有良好的应用前景。在禽流感病毒、新城疫病毒、猪传染性胃肠炎病毒、口蹄疫病毒等的检测中均表现出了很高的敏感性和特异性。论文简要介绍了nasba技术的原理,特点以及在畜禽病毒检测中的应用,旨为病毒检测技术提供新的途径。

关键词： nasba 原理病毒检测

Colloidal Gold Strip-nasba Technique for Rapid Detection of Shigella

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International Journal of Technology Management 2014年第9期 121-123页

作者： Ni Xiumei Wei Xiaotang Jiangyinghui Weifang University of Science and Technology Weifang Weifang City R China Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau Qingdao Shandong ProvinceER.China

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nasba快速检测禽流感H5亚型病毒

中国病毒学 2005年第3期20卷 288-292页

作者：单松华刘乐庭陈家华吴仲梁上海出入境检验检疫局上海200135 香港基因晶片开发有限公司

采用建立的依赖核酸序列的扩增(Nucleicacidsequencebasedamplification,nasba)对禽流感病毒3株H5亚型、1株H1、H3、H6亚型、3株禽流感H9亚型、5株不同宿主来源的新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、SPF鸡胚尿囊液及禽流感(H9)疫苗、新... 详细信息

采用建立的依赖核酸序列的扩增(Nucleicacidsequencebasedamplification,nasba)对禽流感病毒3株H5亚型、1株H1、H3、H6亚型、3株禽流感H9亚型、5株不同宿主来源的新城疫病毒、鸭肝炎病毒、鸭瘟病毒、SPF鸡胚尿囊液及禽流感(H9)疫苗、新城疫疫苗、传染性法氏囊病疫苗、传染性支气管炎疫苗进行检测,结果nasba(H5试剂)仅检测到禽流感病毒H5亚型,表明方法的特异性强。采用已知禽流感病毒A/Chicken/HK/1000/97(H5N1)的鸡胚尿囊液(ELD5010-7.5/mL),经10倍连续稀释,将经典的鸡胚病原分离法和nasba进行比较,二种方法的灵敏度相当。用A/Chicken/HK/1000/97(H5N1)病毒人工感染SPF鸡、商品鸡,采用nasba和病原分离法同时对人工感染鸡的粪拭子、血液进行了动态检测;采集感染死亡鸡的组织脏器,共检测了101个组织脏器,两种方法的符合率为90%(87/97)。

关键词：禽流感H5亚型病毒 nasba 鸡胚病毒分离法快速检测

nasba荧光分子信标技术定量检测丙型肝炎病毒

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中国生物工程杂志 2003年第12期23卷 111-113页

作者：王虹陈金华曾位森刘丹杨艳妮蒋平谢曙光广州蓝星生物科技开发有限公司 510515

建立nasba荧光分子信标探针检测技术 ,并对国家HCV标准品、人工构建HCVRNA野生株及HCV抗体阳性不同人群进行检测。实验结果 :该方法检测HCV的灵敏度为 1 0 3 拷贝 ml血清 ,阴性参比品的符合率为 1 0 0 %;检测的线性范围为 1 0 3 拷贝～... 详细信息

建立nasba荧光分子信标探针检测技术 ,并对国家HCV标准品、人工构建HCVRNA野生株及HCV抗体阳性不同人群进行检测。实验结果 :该方法检测HCV的灵敏度为 1 0 3 拷贝 ml血清 ,阴性参比品的符合率为 1 0 0 %;检测的线性范围为 1 0 3 拷贝～ 1 0 9拷贝 ml血清 ;精密性 (CV值 )小于 6%,在HCV抗体阳性人群中HCVRNA的检出率在 45 %～ 65 %之间。结论 :该方法在HCVRNA临床定量检测中具有良好的灵敏度、特异性、重复性与实用性。

关键词： nasba 荧光分子信标技术定量检测丙型肝炎病毒

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利用nasba技术检测草莓斑驳病毒

果树学报 2007年第6期24卷 858-862页

作者：张志宏李丽丽杨洪一沈阳农业大学园艺学院沈阳110161

依赖核酸序列的扩增(Nucleic acid sequence based amplification,nasba)技术是以cDNA为中介体在等温条件下直接扩增单链RNA特异序列的核酸扩增技术,研究探索利用nasba技术检测草莓斑驳病毒(Strawberry mottle virus,SMoV)。在对14个SMoV分离物序列分析的基础上,设计和筛选出适于SMoV检测的nasba引物。nasba检测SMoV的适宜反应温度为40℃。在9份草莓样品上检测SMoV的结果显示,nasba检测结果与RT-PCR的检测结果一致,这表明初步建立了利用nasba技术检测SMoV的技术体系。这是利用nasba检测SMoV的首次报道。

关键词：草莓斑驳病毒 nasba 检测

一种基于nasba技术的新型快速肠道病毒检测方法的应用研究

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南京医科大学学报（自然科学版） 2010年第12期30卷 1729-1731,1759页

作者：唐震李显郭喜玲吴涛史智扬江苏省疾病预防控制中心卫生部肠道病原微生物重点实验室江苏南京210009

目的:基于核酸等温扩增技术(nucleic acid sequence-based amplification,nasba)荧光分子信标探针检测技术,进行肠道病毒的快速检测与辅助诊断。方法:根据Genebank上肠道病毒5′端非编码区序列,设计特异性引物与捕获探针,应用纳米技术... 详细信息

目的:基于核酸等温扩增技术(nucleic acid sequence-based amplification,nasba)荧光分子信标探针检测技术,进行肠道病毒的快速检测与辅助诊断。方法:根据Genebank上肠道病毒5′端非编码区序列,设计特异性引物与捕获探针,应用纳米技术对商品化磁珠进行偶联,nasba方法进行扩增,NucliSens读数仪检测,荧光定量RT-PCR方法进行验证,同时验证nasba方法的特异性、灵敏度和重复性。结果:该方法对肠道病毒具有高度特异性,与RSV等呼吸道相关病毒均无交叉反应,反应体系具有很高的稳定性。结论:本研究应用的肠道病毒nasba检测方法特异、灵敏、快速简便,适用于肠道病毒的日常监测和爆发疫情的应急诊断。

关键词： nasba 磁珠捕获探针肠道病毒