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A■nae染色反应在淋巴增生病变中的初步观察

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临床与实验病理学杂志 1985年第1期 13-15页

作者：周镇庄启元李兴文项金泉郭雅英顾永平苏州医学院病理解剖教研组

本文报道应用A(?)nae染色反应在各种淋巴增生病变中的初步观察结果及对辅助诊断的价值。材料与方法一、材料来源:本研究材料取自23例淋巴结反应性增生组织,16例恶性淋巴瘤病变组织,4例组织细胞增生病变组织,25例淋巴细胞白血病的外周血... 详细信息

本文报道应用A(?)nae染色反应在各种淋巴增生病变中的初步观察结果及对辅助诊断的价值。材料与方法一、材料来源:本研究材料取自23例淋巴结反应性增生组织,16例恶性淋巴瘤病变组织,4例组织细胞增生病变组织,25例淋巴细胞白血病的外周血液。此外,有5例围产期胎儿新鲜脾、胸腺组织和4例成人扁桃体手术标本作对照。二、研究方法:(1) 细胞悬液制备:将病变组织剪碎,过滤获细胞悬液,再经Ficoll分层液分离得单一核性细胞,制成涂片,缓冲福尔马林钙液(pH6.7)固定10分钟,进而染色。(2) 组织切片制备:新鲜组织立即固定缓冲福尔马林蔗糖液,4℃,24小时以上,后移至Holt’s

关键词： nae 染色反应点状初步观察阳性反应淋巴增生

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脐血的细胞酶类研究

四川省卫生管理干部学院学报 1997年第4期16卷 193-194页

作者：杨代耘冯凌许勇高岚祝彼得四川省卫生管理干部学院

目的：检测脐血的细胞酶类，拟为脐血的临床应用提供有价值的实验室数据。方法：采用组化技术对３０例正常足月产儿脐血细胞的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、过氧化物酶（ＰＯＸ）、非特异性酯酶（ＮＡＥ）、酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）进行... 详细信息

目的：检测脐血的细胞酶类，拟为脐血的临床应用提供有价值的实验室数据。方法：采用组化技术对３０例正常足月产儿脐血细胞的碱性磷酸酶（ＡＬＰ）、过氧化物酶（ＰＯＸ）、非特异性酯酶（ＮＡＥ）、酸性非特异性酯酶（ＡＮＡＥ）进行测定。结果：脐血ＡＬＰ阳性率为４６．６７±１８．５２％，积分６０．７３±２５．７１；ＰＯＸ阳性率为７６．２３±８．３９％，积分１６７．２７±３０．５９；ＮＡＥ阳性率为７．４７±４．７８％；ＡＮＡＥ（单核细胞）阳性率为５．６７±３．０３％，ＡＮＡＥ（淋巴细胞）阳性率为５７．３３±１３．６２％。结论：脐血的细胞酶类与成人骨髓细胞及外周血细胞化学有差异。

关键词：脐血细胞酶类碱性磷酸酶过氧化物酶 Anae nae

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PCR结合单酶切对戊型肝炎病毒进行基因分型的研究

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第2期19卷 179-181页

作者：潘宁戴星孟继鸿刘社兰东南大学医学院病原生物学与免疫学系南京210009 东南大学医学院附属中大医院皮肤科江苏省疾病预防控制中心急性传染病科

目的　建立PCR结合单酶切对戊型肝炎病毒(HEV)进行基因分型的方法,并将其应用于HEV基因型分布的研究。方法　采用简并引物扩增1～4型HEVORF1片段,1、2型HEVPCR产物为2 75、2 6 9bp ,3、4型PCR产物为317、314bp ,分别应用naeⅠ、NotⅠ消... 详细信息

目的　建立PCR结合单酶切对戊型肝炎病毒(HEV)进行基因分型的方法,并将其应用于HEV基因型分布的研究。方法　采用简并引物扩增1～4型HEVORF1片段,1、2型HEVPCR产物为2 75、2 6 9bp ,3、4型PCR产物为317、314bp ,分别应用naeⅠ、NotⅠ消化两种长度的PCR产物,根据酶切结果区分4种基因型。结果　采用此方法对4种基因型的HEV标准株分型,结果与预期一致;4 3份HEVIgM阳性的临床标本中,19份PCR阳性,分型结果均为4型HEV。结论　此方法可以快速简便地区分HEV 4种基因型。南京地区散发戊型肝炎大多由4型HEV所致。

关键词：戊型肝炎病毒基因分型酶切 PCR产物散发戊型肝炎 HEV 基因型分布 IgM阳性引物扩增临床标本分型结果南京地区 4型 nae Not 标准株区分

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基于节奏的鼓声识别

基于节奏的鼓声识别

作者：尹琦卿山东大学

学位级别：硕士

音色及节奏对于鼓声识别至关重要。主流的时域模板迭代法、时频域模板迭代法、和特征分类法,仅从音色角度考虑,没有利用任何节奏信息,所以准确率和抗干扰性都有待提高。声源分离法由于受到分离质量和声源个数估计的影响,结果也不理想。... 详细信息

音色及节奏对于鼓声识别至关重要。主流的时域模板迭代法、时频域模板迭代法、和特征分类法,仅从音色角度考虑,没有利用任何节奏信息,所以准确率和抗干扰性都有待提高。声源分离法由于受到分离质量和声源个数估计的影响,结果也不理想。因此本文将起点识别、节奏识别与鼓声识别相结合,分别研究了基于节奏的鼓声识别技术和基于音色与节奏的鼓声识别技术,并通过实验验证了方法的有效性。本文从鼓声能量和鼓声循环两个角度出发,提出了一种从多音信号中识别鼓声的方法——基于节奏的鼓声识别法,充分利用鼓声的能量高于一般谐波乐器的特性,通过对重音信号、nae拍谱、重音信号拍谱有效组合的方式,将鼓声的起点在识别函数中突出反映出来,从而根据节奏信息来识别鼓声的位置。实验结果表明,基于节奏的算法在鼓声识别的正确率和召回率上,与常用的时域模板迭代法、时频域模板迭代法和特征分类法相比有大幅度提高。在此基础上,本文从鼓声音色角度出发,由多种音色特征中选择出最能够表达鼓声的特征,将其与基于节奏的鼓声识别算法结合,提出基于音色与节奏的鼓声识别法,并与现行的鼓声识别方法进行比较。实验结果表明,虽然基于音色的方法不及基于能量的方法鲁棒性高,但是相较于时域和时频域模板迭代、特征分类法,仍是有大幅度进步

关键词：鼓声识别 nae 重音拍谱音色

PI3K/mTOR双抑制剂PO-1023抑制人肺癌A549细胞增殖及其与类泛素化调控的作用关系研究

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PI3K/mTOR双抑制剂PO-1023抑制人肺癌A549细胞增殖及其与类泛素化...

作者：张牧天华东师范大学

学位级别：硕士

磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）-雷帕霉素（mTOR）通路级联信号分子在调节细胞的生长和代谢中起关键作用,该通路的调节失衡常出现在肺癌的发生过程中。此外,细胞内相关功能蛋白的类泛素化（如Neddylation）修饰异常也与多... 详细信息

磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）-蛋白激酶B（Akt）-雷帕霉素（mTOR）通路级联信号分子在调节细胞的生长和代谢中起关键作用,该通路的调节失衡常出现在肺癌的发生过程中。此外,细胞内相关功能蛋白的类泛素化（如Neddylation）修饰异常也与多种肿瘤的发生发展密切相关,在部分肺癌病人体内就发现了NEDD8（neural precursor cell expressed developmentally down-regulated 8）及其活化酶nae（NEDD8-activating enzyme）的过度表达。本研究在验证新型PI3K/mTOR双抑制剂PO-1023的抗癌活性时,意外发现PO-1023与nae抑制剂MLN4924联用取得了更出色的抗癌活性。本课题旨在进一步研究MLN4924与PO-1023联用的抗癌效果并揭示其背后的分子机制。本课题首先利用 TCGA-LUAD（lung adenocarcinoma）与 LUSC（lung squamous carcinoma）数据库分析肺癌中PI3K-Akt-mTOR级联信号分子以及nae基因的表达情况,发现PI3K亚基的成分PIK3CA基因出现大量扩增,Akt与nae基因出现一定概率的扩增和突变,而mTOR的改变则以突变为主。其中PIK3CA,nae的表达增高会显著性地降低病人的生存率。在分子实验中,PO-1023与MLN4924都呈浓度依赖性抑制了 A549细胞活性,两者联用起到了更为显著的抗癌效果,细胞增殖实验与凋亡实验也证明了相同的结论。利用免疫印迹实验检,发现PO-1023对于p-S473-Akt的抑制作用非常明显,而对于p-S2448-mTOR却不如MLN4924,两者联用对p-Akt和p-mTOR的抑制效果更强。探究其MLN4924与PO-1023的协同机制发现,MLN4924可通过抑制A549细胞内泛素Ubiquitin与其底物的连接来抑制下游Deptor分子的泛素化降解,促其表达增加,进而抑制mTOR复合物的活性;此外,敲减Deptor会使p-mTOR表达增加并且增强A549细胞活力,而在MLN4924条件下敲减Deptor也通过同样的方式逆转了药效。以上结果验证了 Deptor在调节mTOR活性中扮演的角色,确认了 Deptor在MLN4924药理活性中的作用以及MLN4924与PO-1023协同增强抗癌活性的原理。本研究验证了新型PI3K/mTOR双抑制剂PO-1023的抗癌活性与分子机制,确定了 PO-1023与MLN4924联用更好的抗癌效果,并且较为深入的揭示了Deptor蛋白在这一过程中扮演的角色。本研究为如何提高以PI3K/mTOR为药物靶点的先导分子的抗癌活性提供了新思路,也为利用分子传导途径间的相互作用来调控关键肿瘤病理蛋白（如mTOR）提供了实验依据。

关键词： PI3K/mTOR 双抑制剂 MLN4924 PI3K p-mTOR p-Akt nae Deptor ubiquitin

4-取代吲哚类及苯二氮卓类化合物的设计、合成及抗肿瘤活性研究

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4-取代吲哚类及苯二氮卓类化合物的设计、合成及抗肿瘤活性研究

作者：喻支梁宁夏医科大学

学位级别：硕士

自从盐酸氮芥用于治疗肿瘤以来,抗肿瘤药物研究已经有七十多年历史,但大部分抗肿瘤药物存在治疗效果低、毒副作用大等问题。近年来,以格列卫为代表的小分子靶向抗肿瘤药物的发现,为肿瘤患者的治疗带来新希望,多个替尼类药物成为临床首... 详细信息

自从盐酸氮芥用于治疗肿瘤以来,抗肿瘤药物研究已经有七十多年历史,但大部分抗肿瘤药物存在治疗效果低、毒副作用大等问题。近年来,以格列卫为代表的小分子靶向抗肿瘤药物的发现,为肿瘤患者的治疗带来新希望,多个替尼类药物成为临床首选药物。随着靶向药物的广泛应用,发现该类药物存在易耐药、价格昂贵的缺点,使得基于肿瘤新靶点和新机制研发高效、低毒靶向药物成为抗肿瘤药物研究领域的研究热点。本论文采用骨架跃迁药物设计方法分别对Neddylation通路和p53-MDM2通路进行小分子抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究。一、4-取代吲哚类化合物的设计、合成及抗肿瘤活性研究NEDD8是人类由nedd8基因编码的一种蛋白,结构与功能与泛素分子相似。在E1活化酶(nae)、E2结合酶及E3连接酶的催化作用下,NEDD8连接到相应的靶蛋白,对靶蛋白进行修饰及调控,称为Neddylation。Cullin-RING连接酶(CRLs)是E3连接酶最大的超家族,对泛素化途径及关键信号蛋白进行调控,控制各种不同细胞蛋白的降解。通过调控CRLs,Neddylation可以调控细胞周期、信号转导及肿瘤形成等过程。在很多肿瘤患者中,NEDD8通路过度表达导致CRLs非正常激活,抑制Neddylation通路成为治疗恶性肿瘤的一个新策略。nae抑制剂能干扰CRL底物蛋白质的降解,导致底物蛋白在胞内蓄积,持续的Neddylation通路抑制引发细胞周期依赖性的DNA再复制,导致细胞周期S期DNA合成失调,最终激活细胞凋亡机制。目前为止没有nae抑制剂进入临床,首个选择性nae抑制剂MLN4924处于I期临床试验。我们采用骨架跃迁的设计思路,基于MLN4924的全合成路线,设计合成出8个4-取代吲哚类及吲唑类新型nae抑制剂。体外抗肿瘤活性研究表明,所有的化合物对7种肿瘤细胞株均体现出较好的活性,表明化合物与阳性对照药MLN4924一致,具有广谱抗肿瘤活性。其中化合物28对人骨肉瘤细胞Saos-2、人肺腺癌细胞H1299、人骨肉瘤细胞U2 OS和人肠癌细胞HCT116细胞株活性最好,分别为3.4、8.62、11.04和11.06μM。化合物19b对PANC-1细胞株的48h凋亡率达60.5%,细胞周期实验表明19b和28阻滞细胞分裂在G2/M期。二、苯二氮卓类化合物的设计、合成及抗肿瘤活性研究作为抑癌基因,p53蛋白在细胞分化、细胞凋亡和细胞周期阻滞等过程中起到非常重要的作用。研究表明p53与MDM2蛋白形成负反馈调节通路,抑制p53-MDM2相互作用,可以上调p53蛋白水平,诱导肿瘤细胞凋亡。因此,p53-MDM2抑制剂成为治疗肿瘤的另一种新策略。基于生物电子等排原理,我们设计合成出一类苯二氮卓类p53-MDM2小分子抑制剂。体外生物活性评价表明,化合物显示出较好的蛋白结合抑制活性和抗肿瘤活性。其中化合物43对人骨肉瘤细胞系U-2 OS的IC50达到4.17μM,优于阳性对照药nutlin-3。分子对接研究发现苯二氮卓类化合物能插入MDM2的三个关键氨基酸残基空腔与蛋白产生作用。

关键词： nae MLN4924 p53-MDM2 苯二氮卓抗肿瘤

新疆石河子地区116例少数民族及汉族正常成人骨髓象及组织化学染色结果分析

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农垦医学 1985年第3期 162-167页

作者：廖永葆顾秀田刘林顺石河子医学院附属医院

本文观察了116例新疆少数民族及汉族正常成人骨髓象及6项组化染色的情况。结果表明少数民族与汉族骨髓细胞分类及计数200个与500个细胞结果无显著差异,但男性组中红及红系总数均高于女性组,两者有显著差异。本文的中杆值及晚红值低于天... 详细信息

本文观察了116例新疆少数民族及汉族正常成人骨髓象及6项组化染色的情况。结果表明少数民族与汉族骨髓细胞分类及计数200个与500个细胞结果无显著差异,但男性组中红及红系总数均高于女性组,两者有显著差异。本文的中杆值及晚红值低于天津的报告,其它比例与文献基本一致。还提出可将 POX、nae 及Anae 的阳性率作为估计骨髓中粒细胞、单核细胞及 T 细胞总数的参考。并发现民、汉两组的细胞内铁明显低于文献值,民族组的内铁及淋巴细胞的 PAS 结果又低于汉族组。

关键词： Histochemistry rubricyte erythrocyte neutrophil metarubricyte POX nae Anae PAS granulocyte monocyte normoblast lymphocyte

白血病及何杰金氏病细胞α—醋酸萘酯酯酶染色加氟化钠抑制的初步观察

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四川医学 1982年第4期 204-205页

作者：刘祥贵方发玲张自新何生玉重庆医学院第二医院

本文报告31例白血病及1例何杰金氏病细胞α—醋酸萘酯酯酶染色及加氟化钠抑制的观察结果。发现网状细胞型白血病的α—nae 积分最高,对 NaF抑制亦敏感。白血病性早幼粒细胞较正常早幼粒细胞积分高。早幼粒两个亚型 M3-1及 M3-2二者平均... 详细信息

本文报告31例白血病及1例何杰金氏病细胞α—醋酸萘酯酯酶染色及加氟化钠抑制的观察结果。发现网状细胞型白血病的α—nae 积分最高,对 NaF抑制亦敏感。白血病性早幼粒细胞较正常早幼粒细胞积分高。早幼粒两个亚型 M3-1及 M3-2二者平均积分相近,均对 NaF 抑制敏感,抑制积分平均值二型均>74%,与国内文献报告不同。Reed—Stern-berg′s 细胞在α-nae 活性方面,与网状细胞相似,但不同于淋巴细胞。

关键词：白血病 nae 何杰金氏病网状细胞血癌恶性肉芽肿淋巴瘤早幼粒细胞前髓细胞氟化钠氟化物醋酸乙酸

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基于节奏的鼓声识别

软件导刊 2013年第6期12卷 140-143页

作者：尹琦卿刘若伦山东大学(威海)机电与信息工程学院山东威海264209

从鼓声能量与鼓声循环两个角度出发,提出了一种从多音信号中识别鼓声的方法。充分利用鼓声能量高于一般谐波乐器的特性,通过对重音信号、nae拍谱、重音拍谱有效组合的方式,将鼓声的起点在识别函数中突出反映出来,从而根据节奏信息来识... 详细信息

从鼓声能量与鼓声循环两个角度出发,提出了一种从多音信号中识别鼓声的方法。充分利用鼓声能量高于一般谐波乐器的特性,通过对重音信号、nae拍谱、重音拍谱有效组合的方式,将鼓声的起点在识别函数中突出反映出来,从而根据节奏信息来识别鼓声的位置。实验结果表明,算法在鼓声识别的正确率和召回率上,较常用的***时频域模板迭代法和***时域模板迭代法有大幅度提高。

关键词：鼓声识别 nae 重音信号 nae拍谱

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