检索结果-南通市图书馆

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第12期35卷 1072-1076页

作者：张玲蓝轲冯湘玲乔贵林沈新民石益民李虹姚开泰中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所第一军医大学病理教研室广州510515

为了研究EBV lmp1在鼻咽癌发生发展中的作用 ,构建了EDL 2、PLUnC p双启动子调控鼻咽癌来源的lmp1(latentmembraneprotein 1,潜伏膜蛋白 1)的表达载体 ,采用受精卵前核显微注射法构建转基因小鼠。结果表明 ,在所获得的 5 8只转基因首建... 详细信息

为了研究EBV lmp1在鼻咽癌发生发展中的作用 ,构建了EDL 2、PLUnC p双启动子调控鼻咽癌来源的lmp1(latentmembraneprotein 1,潜伏膜蛋白 1)的表达载体 ,采用受精卵前核显微注射法构建转基因小鼠。结果表明 ,在所获得的 5 8只转基因首建鼠中 ,4只整合阳性 ,其中的一只转基因小鼠在鼻咽、前胃、舌根等部位检测到了外源基因的表达。

关键词：组织相对特异性调控区 n-lmp1 转基因小鼠

来源：

同方期刊数据库评论

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

上皮组织特异性表达n-lmp1和CR2转基因猪胚胎成纤维细胞的构建与鉴定

引用

中国比较医学杂志 2014年第2期24卷 1-6页

作者：黄海城刘欢安靓南方医科大学肿瘤研究所广州510515 深圳华大基因研究院深圳518083

目的构建上皮组织特异性表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1(n-lmp1)和人补体受体2(CR2)真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有n-lmp1和CR2基因的细胞克隆,为构建与EBV感染相关的猪鼻咽癌模型奠定基础。方法通过直接合成ED-L2启动子和n... 详细信息

目的构建上皮组织特异性表达鼻咽癌来源潜伏膜蛋白1(n-lmp1)和人补体受体2(CR2)真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有n-lmp1和CR2基因的细胞克隆,为构建与EBV感染相关的猪鼻咽癌模型奠定基础。方法通过直接合成ED-L2启动子和n-lmp1,从人B淋巴细胞中的RnA经RT-PCR扩增出CR2,将上述3个片段逐个连接到真核表达载体pn1上,构建上皮组织特异性表达n-lmp1和CR2的载体pn1-EDL2-n-lmp1-CR2;用脂质体转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418筛选和PCR鉴定阳性克隆。结果成功构建上皮组织特异性表达n-lmp1和CR2的真核表达载体pn1-ED-L2-n-lmp1-CR2,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的基因n-lmp1和CR2的猪胚胎成纤维细胞克隆。结论获得了上皮组织特异性表达n-lmp1和CR2的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过细胞核移植方法获得表达n-lmp1和CR2转基因猪提供了供体细胞。

关键词： n-lmp1 CR2 猪胚胎成纤维细胞鼻咽癌

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

两种不同来源lmp1致瘤性的比较研究

引用

癌症 2001年第10期20卷 1033-1037页

作者：蓝轲任彩萍谢鹭何志巍甘润良姚开泰中南大学湘雅医学院肿瘤研究所湖南长沙410078

目的:比较鼻咽癌来源的lmp1基因(nlmp1)和标准株B95.8来源的lmp1基因(Blmp1)的致瘤性。方法:将带有nlmp1及Blmp1的两种真核表达载体分别转染小鼠成纤维细胞系nIH3T3,获得稳定表达lmp1的细胞,通过软琼脂集落形成试验及裸鼠致瘤试验比较... 详细信息

目的:比较鼻咽癌来源的lmp1基因(nlmp1)和标准株B95.8来源的lmp1基因(Blmp1)的致瘤性。方法:将带有nlmp1及Blmp1的两种真核表达载体分别转染小鼠成纤维细胞系nIH3T3,获得稳定表达lmp1的细胞,通过软琼脂集落形成试验及裸鼠致瘤试验比较两种细胞的致瘤性。结果:获得稳定表达nlmp1和Blmp1的两种nIH3T3细胞;nIH3T3/nlmp1的集落形成率和成瘤率均明显高于nIH3T3/Blmp1。结论:nlmp1的致瘤性强于Blmp1,进一步确证了中国鼻咽癌来源的EBVlmp1比一般的EBVlmp1具有更强的致瘤性,也为在中国鼻咽癌流行区可能存在一株特殊的EBV株系提供了一定的依据。

关键词：潜伏膜蛋白1 Epstein-Barr病毒鼻咽肿瘤 n-lmp1 B-lmp1

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

EBV感染相关的猪鼻咽癌模型的构建

EBV感染相关的猪鼻咽癌模型的构建

引用

作者：黄海城南方医科大学

学位级别：硕士

爱波斯坦-巴尔病毒（Epstein-Barr virus,EBV）是γ疱疹病毒家族成员,属DnA病毒,人类是它的宿主,并且一旦感染终身携带。在全世界的成年人中EBV感染率很高,EBV感染与传染性单核细胞增多症、Burkitt’s淋巴瘤、鼻咽癌（nasopharyngeal ca... 详细信息

爱波斯坦-巴尔病毒（Epstein-Barr virus,EBV）是γ疱疹病毒家族成员,属DnA病毒,人类是它的宿主,并且一旦感染终身携带。在全世界的成年人中EBV感染率很高,EBV感染与传染性单核细胞增多症、Burkitt’s淋巴瘤、鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma,nPC）、免疫缺陷病人的B细胞淋巴瘤和胃癌等多种良性和恶性疾病有关,EBV感染外周血B淋巴细胞可以导致其永生化和不断增殖。EBV感染分为潜伏感染和溶细胞感染两种状态,潜伏感染状态是以表达一系列EBV潜伏感染蛋白为特征,其中包括6个核蛋白（EBnA1、 EBnA2、 EBnA3A,3B,3C和EBnA-LP）、3个潜伏膜蛋白（lmp1、lmp2A和B）、2个小核RnA（EBER1和2）,以及Bam HI-A转录区等共12个EBV基因编码蛋白。EBV与多种人类上皮性肿瘤有关,其中与鼻咽癌的关系最密切,鼻咽癌中EBV阳性率达到90%～100%。 EBV的潜伏膜蛋白基因1（latent membrane protein1,lmp1）是最重要的病毒基因产物之一,它不仅在潜伏感染状态时表达,而且也在EBV溶细胞循环状态中大量表达。已知lmp1是唯一被证实的EB病毒基因编码的癌基因,它是由一个短的氨基末端的细胞内区、六个疏水的跨膜区和一个细胞内梭基末端构成的完整的膜蛋白。研究显示,lmp1在结构上与肿瘤坏死因子受体家族的CD40类似,具有激活物受体特征,lmp1可以和肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAF）和肿瘤坏死因子受体相关死亡区域（TRAD）蛋白结合;lmp1梭基末端具有生长转化功能,在EBV诱导的B淋巴细胞转化过程中起关键作用。从鼻咽癌组织中获得的EBV lmp1基因（n-lmp1）与标准的B95-8细胞来源的lmp1基因（B-lmp1）序列存在一定的差异。与标准株lmp1基因比较,n-lmp1的致瘤性更强,它的主要特征是在其3’端存在一段30bp核苷酸的缺失及33bp重复序列的增多。 EBV感染B淋巴细胞的途径已十分清楚,B细胞表面存在EB病毒受体人补体受体2（complement component receptor2，CR2）,CR2原为补体C3d的受体,因EB病毒主要壳膜糖蛋白gp350/220的分子结构与C3d高度相似,故可经过该受体进入细胞。然而,EB病毒如何进入上皮细胞,其机制至今未明,可能通过以下途径：（1）通过与上皮细胞表面的CR2受体结合或作为免疫复合物的一部分与上皮细胞的免疫球蛋白受体相结合而进入被感染细胞;（2）通过产病毒细胞与上皮细胞间的直接接触或与粘膜细胞融合而感染上皮细胞;（3）在辅助因子／辅受体的帮助下感染细胞,或在辅病毒的帮助下转变为能感染上皮细胞的假型;目前受体学说支持率最高,多数学者认为EBV是通过上皮细胞表面的受体而得以进入细胞的。虽然有关上皮细胞是否表达CR2至今仍有争论,但已有多位研究者尝试用不同的方法将CR2基因导入多种细胞,所有研究均证实,在提高细胞内CR2表达水平后,EBV可成功感染原不能感染的细胞,或能明显提高细胞对EBV的感染率。 EBV的ED-L2是EBV自身的启动子,ED-L2启动子是早期细胞裂解启动子,位于BnLF2（lmp2）转录起始位点开放读码框的上游,紧邻BnLF1（lmpl）开放读码框的下游,位于EBV-BnLF-2A短开放读码框5’端和lmp1基因开放读码框（lmp1）3’非翻译区内,是具有嗜角质细胞特异性的启动子。当含有lmp1片段的EBV基因编码在ED-L2启动子的控制下时,该基因将被转录并表达于舌、咽和食道等鳞状上皮。在ED-L2启动子有一个CACACCC盒样cis-调控组件,锌指蛋白通过与该区域的特异性相互作用而调节ED-L2启动子活性。佛波脂就可通过一个锌指蛋白依赖因子与CACACCC特异性相互作用而增强ED-L2启动子活性。猪在解剖、组织、生理和营养代谢、血液生化指标、疾病发生过程等方面与人类极为相近,猪作为实验动物的一个重要应用是建立人类疾病模型。近年来,手工克隆（handmade cloning,HMC）技术的发展大大推进了猪作为人类疾病动物模型的研究。手工克隆是一项不需要显微操作,操作简单省时的核移植方法,该方法最早被应用于牛的体细胞核移植,并且得到后代。HMC技术路线主要包括卵母细胞去透明带,徒手切割半卵去核,双半卵融合、激活,以及支持无透明带卵／胚胎的培养体系;与常规核移植方法相比,HMC技术最大的特点是对实验设备的要求相对而言不是太高,不需要显微操作仪,而且对技术人员的要求也降低许多。运用该技术,猪作为人类疾病动物模型已应用在糖尿病、心血管疾病、神经系统疾病及眼科疾病等方面,但在有关鼻咽癌方面尚未见报道。我们拟采用鼻咽癌来

关键词： EBV n-lmp1 CR2 鼻咽癌猪胚胎成纤维细胞手工克隆

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：