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一株降解N-酰基高丝氨酸内酯酵母菌菌株的分离鉴定及其降解特性

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微生物学报 2007年第2期47卷 355-358页

作者：邱健贾振华马宏张霞宋水山河北省生物研究所石家庄050051

利用n酰基高丝氨酸内酯(n-acyl-homoserine lactone,简称AHL)为唯一碳源和能源,筛选得到一株能够降解AHL的菌株R1。常规鉴定和18S rDnA序列分析表明,菌株R1属于红冬孢酵母菌(Rhodosporidium toruloides),定名为R.toruloidesR1。结果显示R.toruloidesR1能利用所测试的3种AHL作为唯一碳源和能源生长,具有降解AHL的能力,其对AHL依赖型胡萝卜欧文氏软腐病菌(Erwinia carotovora subsp.carotovora)的致病有一定的抑制作用。

关键词：群体感应 N-酰基高丝氨酸内酯 18S rDnA 酵母菌系统发育

定点突变提高N-酰基高丝氨酸内酯酶酶活和温度稳定性

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微生物学报 2014年第8期54卷 905-912页

作者：杨梅谢盼盼简思美林丽玉杨彩云福建师范大学生命科学学院福建福州350108

【目的】提高N-酰基高丝氨酸内酯酶(n-acylhomoserine lactonase,AiiA)酶活及温度稳定性。【方法】本研究基于AiiA同源蛋白的三维结构对AiiA进行定点突变,分析野生型AiiA及其突变蛋白酶活和温度稳定性。【结果】野生型AiiA较不稳定,在4... 详细信息

【目的】提高N-酰基高丝氨酸内酯酶(n-acylhomoserine lactonase,AiiA)酶活及温度稳定性。【方法】本研究基于AiiA同源蛋白的三维结构对AiiA进行定点突变,分析野生型AiiA及其突变蛋白酶活和温度稳定性。【结果】野生型AiiA较不稳定,在45℃下温浴30 min,或4℃储存5 d后均失去降解N-酰基高丝氨酸内酯(n-acylhomoserine lactone,AHL)的活性。但是突变AiiA蛋白(n65K,T195R和A206E)的酶活力较野生型AiiA均提高了20%以上,且4℃储存时间延长到7 d。此外,突变株n65K比野生型AiiA对高温具有更强的耐受性,在45℃温浴后剩余酶活力达到45%以上,55℃温浴30 min后仍保留5.0%的酶活力。【结论】通过定点突变改造AiiA蛋白结构,提升了AiiA蛋白的酶活和温度稳定性。

关键词： N-酰基高丝氨酸内酯 N-酰基高丝氨酸内酯酶酶学特性定点突变

SPE前处理-UHPLC-MS/MS测定MBR中两种N-酰基高丝氨酸内酯

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湖南大学学报（自然科学版） 2018年第12期45卷 144-148页

作者：黄瑾辉胡熠顾岩岭史亚慧湖南大学环境科学与工程学院湖南长沙410082 环境生物与污染控制教育部重点实验室(湖南大学) 湖南长沙410082

选用n-己基高丝氨酸内酯(C6-HSL)和n-辛基高丝氨酸内酯(C8-HSL)两种酰基高丝氨酸内酯类(AHLs)为代表物,建立了固相萃取(SPE)-超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(UHPLC-MS/MS)分析膜生物反应器(MBR)活性污泥中AHLs的方法.研究结果表明C6-... 详细信息

选用n-己基高丝氨酸内酯(C6-HSL)和n-辛基高丝氨酸内酯(C8-HSL)两种酰基高丝氨酸内酯类(AHLs)为代表物,建立了固相萃取(SPE)-超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(UHPLC-MS/MS)分析膜生物反应器(MBR)活性污泥中AHLs的方法.研究结果表明C6-HSL和C8-HSL在1～200μg/L内有良好的线性关系(R2> 0.998),方法的检出限为0.100μg/L,定量限为1.000μg/L,在3个浓度水平下的平均加标回收率为80.69%～83.75%,相对标准偏差(RSD)为4.71%～7.25%.方法精确度高、重复性好、基质效应弱,适用于MBR活性污泥中痕量AHLs的测定.

关键词：膜生物反应器 N-酰基高丝氨酸内酯固相萃取超高效液相色谱-串联质谱

细菌信号分子N-酰基高丝氨酸内酯调控植物抗性的研究进展

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植物生理学报 2014年第2期50卷 143-149页

作者：赵芊贾振华宋水山河北省科学院生物研究所石家庄050051

自然界中植物与细菌长期共存,共同进化,二者之间形成由不同信号分子介导的复杂的相互作用网络。N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性细菌胞间通讯的信号分子,可被植物感知,并能调控植物多种生理行为,包括植物的天然免疫、生长发育、... 详细信息

自然界中植物与细菌长期共存,共同进化,二者之间形成由不同信号分子介导的复杂的相互作用网络。N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性细菌胞间通讯的信号分子,可被植物感知,并能调控植物多种生理行为,包括植物的天然免疫、生长发育、耐逆性等。本文综述近年来的相关研究进展,有助于全面了解植物与细菌间的信息交流机制,并对农业生产提供理论指导。

关键词：细菌 N-酰基高丝氨酸内酯植物抗性

信号分子N-酰基高丝氨酸内酯分析方法研究进展

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土壤学报 2016年第4期53卷 832-844页

作者：生弘杰宋洋卞永荣柳广霞刘总堂蒋新王芳土壤与农业可持续发展国家重点实验室(中国科学院南京土壤研究所) 南京210008 中国科学院大学北京100049

细菌能自发产生、释放特定的信号分子,并感知其浓度变化,调节微生物的群体行为,这一调控系统称为群体感应。革兰氏阴性菌的群体感应一般由N-酰基高丝氨酸内酯(Acylhomoserine lactones,AHLs)这类信号分子介导。在简要总结AHLs分子及其... 详细信息

细菌能自发产生、释放特定的信号分子,并感知其浓度变化,调节微生物的群体行为,这一调控系统称为群体感应。革兰氏阴性菌的群体感应一般由N-酰基高丝氨酸内酯(Acylhomoserine lactones,AHLs)这类信号分子介导。在简要总结AHLs分子及其衍生物结构的基础上,结合近年来国内外研究进展,对AHLs的提取、鉴定和检测等分析测试方法进行了综述,旨在为建立土壤中AHLs的检测方法以及深入研究AHLs信号分子在土壤中的环境行为奠定基础。

关键词： N-酰基高丝氨酸内酯色谱-质谱生物传感器核磁共振酶联免疫

GCR1和GCR2在N-酰基高丝氨酸内酯调节拟南芥根生长中的作用

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植物生理学报 2011年第2期47卷 175-180页

作者：边子睿刘方张霞张哲宋水山河北省科学院生物研究所石家庄050051 河北工业大学化工学院天津300130

N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性细菌群体感应的信号分子。培养基中添加1μmol·L-13OC6-HSL和10μmol·L-13OC8-HSL可显著促进野生型拟南芥主根生长,但拟南芥G蛋白偶联受体GCR1和GCR2基因缺失突变体gcr1-1和gcr2-2对AHLs处理不敏... 详细信息

N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)是革兰氏阴性细菌群体感应的信号分子。培养基中添加1μmol·L-13OC6-HSL和10μmol·L-13OC8-HSL可显著促进野生型拟南芥主根生长,但拟南芥G蛋白偶联受体GCR1和GCR2基因缺失突变体gcr1-1和gcr2-2对AHLs处理不敏感;实时荧光定量PCR分析显示,这2种AHLs的处理可以使拟南芥GCR1和GCR2基因表达量上调2～4倍。结果表明,G蛋白偶联受体GCR1和GCR2可能参与植物感应细菌信号进而做出根生长响应的信号转导。

关键词： G蛋白偶联受体 N-酰基高丝氨酸内酯拟南芥 GCR1 GCR2

拟南芥GCR2参与感应n-丁酰基高丝氨酸内酯过程的初步研究

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生物技术通报 2015年第8期31卷 94-101页

作者：艾秋实张哲屈凌波刘方赵芊宋水山河北农业大学生命科学学院保定071001 河北省科学院生物研究所河北省主要农作物病害微生物控制工程技术研究中心石家庄050081 河南工业大学化学化工学院郑州450001

n-丁酰基高丝氨酸内酯(C4-HSL)是革兰氏阴性菌主要的群体感应信号,其能促进植物生长发育,激活细胞膜表面的Ca2+通道,从而参与调控植物的生理代谢。然而,植物感应C4-HSL的分子机制并不清楚。拟南芥GCR2作为ABA的受体,对植物的生理代谢十... 详细信息

n-丁酰基高丝氨酸内酯(C4-HSL)是革兰氏阴性菌主要的群体感应信号,其能促进植物生长发育,激活细胞膜表面的Ca2+通道,从而参与调控植物的生理代谢。然而,植物感应C4-HSL的分子机制并不清楚。拟南芥GCR2作为ABA的受体,对植物的生理代谢十分重要。旨在探寻GCR2是否参与拟南芥感应C4-HSL的过程。q RT-PCR结果表明,C4-HSL处理后1 h,GCR2基因表达量出现明显上调并在6 h后达到最大值,说明C4-HSL可调节GCR2。ELISA结果显示,GCR2蛋白表达量也在6 h达到最大值。对体外表达的GCR2进行纯化和浓缩,使其达到0.6 mg/m L后进行微量热泳动(MST)检测。MST测得C4-HSL与GCR2的解离常数(Kd)为166 nmol/L,显示出较强的结合能力。用BSA作为阴性对照,表明C4-HSL与GCR2的结合具有一定的特异性。这些结果表明GCR2可能参与了拟南芥感应C4-HSL的过程。

关键词：群体感应 N-酰基高丝氨酸内酯拟南芥微量热泳动

细菌信号分子N-酰基高丝氨酸内酯调控植物抗病反应的研究进展

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生物技术通报 2016年第11期32卷 47-51页

作者：靳晓扬侯鹏飞张肖晗赵芊宋水山河北工业大学化工学院天津300130 河北省科学院生物研究所石家庄050051

N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)在生物信息交流中发挥了重要作用,为革兰氏阴性细菌种内和种间的相互作用提供了化学基础并参与细菌多种生理行为的调控。不仅是细菌,植物同样可以感知AHLs,并作出反应。综述近几年来AHLs调控植物抗病反应的研... 详细信息

N-酰基高丝氨酸内酯(AHLs)在生物信息交流中发挥了重要作用,为革兰氏阴性细菌种内和种间的相互作用提供了化学基础并参与细菌多种生理行为的调控。不仅是细菌,植物同样可以感知AHLs,并作出反应。综述近几年来AHLs调控植物抗病反应的研究进展,有助于探究AHLs对寄主植物的影响途径和机理,旨为在农业上的应用奠定理论基础。

关键词：细菌 N-酰基高丝氨酸内酯植物抗病反应

气相色谱-质谱法检测细菌中N-酰基高丝氨酸内酯类信号分子

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分析测试学报 2012年第3期31卷 347-350页

作者：郭秀春郑立张魁英徐鲁燕王小如河南大学药学院河南开封475004 国家海洋局第一海洋研究所生态中心山东青岛266061

建立了N-酰基高丝氨酸内酯类(n-acyl-homoserine lactones,AHLs)群体感应信号分子的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法,并优化了检测条件。在优化条件下,采用选择离子扫描模式(SIM)从细菌Pseud-oalteromonas sp.nJ6-3-1培养液中检测到3种AHL... 详细信息

建立了N-酰基高丝氨酸内酯类(n-acyl-homoserine lactones,AHLs)群体感应信号分子的气相色谱-质谱(GC-MS)检测方法,并优化了检测条件。在优化条件下,采用选择离子扫描模式(SIM)从细菌Pseud-oalteromonas sp.nJ6-3-1培养液中检测到3种AHLs(n-己基高丝氨酸内酯(C6-HSL)、n-辛基高丝氨酸内酯(C8-HSL)和n-十四基高丝氨酸内酯(C14-HSL))。与传统的薄层层析-生物传感器(TLC-biosensor)和高效液相色谱法(HPLC)相比,该方法更加简单、高效,只需对培养液样品进行简单处理,即可定性检测样品中的AHLs分子。该方法为从复杂基质中检测和鉴定AHLs信号分子提供了有效手段。

关键词： N-酰基高丝氨酸内酯气相色谱-质谱法群体感应信号分子细菌