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FoxO1抑制猪骨骼肌myhc Ⅰ的表达

中国生物化学与分子生物学报 2010年第3期26卷 283-289页

作者：张辉史新娥袁媛杨公社孙世铎西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室陕西杨凌712100

为研究FoxO1与骨骼肌纤维类型之间的关系,本试验以大白猪为实验材料,利用RT-PCR和Western印迹技术,检测了FoxO1与肌纤维类型标志基因myhcⅠ、myhcⅡa、myhcⅡb和myhcⅡx在特定骨骼肌中的表达规律,以及调控肌纤维类型关键基因Mef2c和NFA... 详细信息

为研究FoxO1与骨骼肌纤维类型之间的关系,本试验以大白猪为实验材料,利用RT-PCR和Western印迹技术,检测了FoxO1与肌纤维类型标志基因myhcⅠ、myhcⅡa、myhcⅡb和myhcⅡx在特定骨骼肌中的表达规律,以及调控肌纤维类型关键基因Mef2c和NFAT的表达,并用Wortmannin处理原代培养的猪骨骼肌成肌细胞,检测了FoxO1与肌纤维类型相关基因的表达.结果显示,FoxO1在不同骨骼肌类型中mRNA表达差异不显著(P>0.05),其蛋白表达与myhc各亚型显著相关.Wortmannin处理结果显示,在处理的第3和5d,FoxO1蛋白与myhcⅡb,myhcⅡx和NFAT表达显著正相关,而与myhcⅠ,myhcⅡa和Mef2c表达显著负相关.结果表明,FoxO1通过抑制myhcⅠ的表达调控肌纤维类型.

关键词： FoxO1 myhc 肌纤维类型猪

瘤背石磺肌球蛋白重链(myhc)基因的克隆与表达分析

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渔业科学进展 2018年第4期39卷 126-138页

作者：顾冰宁刘欣沈和定王冬凤杨铁柱朱敏史艳梅李柏航上海海洋大学水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室水产科学国家级实验教学示范中心海洋动物系统分类与进化上海高校重点实验室上海201306

肌球蛋白是动物体内重要的功能性马达蛋白,调控机体的信号传导、肌肉收缩和细胞器运动,为探究肌肉在瘤背石磺(Onchidium struma)由海洋向陆地进化过程中发挥作用的分子机制,实验以石磺科4种贝类转录组数据为基础,采用RACE方法从瘤背石... 详细信息

肌球蛋白是动物体内重要的功能性马达蛋白,调控机体的信号传导、肌肉收缩和细胞器运动,为探究肌肉在瘤背石磺(Onchidium struma)由海洋向陆地进化过程中发挥作用的分子机制,实验以石磺科4种贝类转录组数据为基础,采用RACE方法从瘤背石磺肌肉中首次克隆到肌球蛋白重链(Myosin heavy chain,myhc)基因cDNA的全长并进行组织表达分析。研究结果显示,瘤背石磺myhc基因cDNA全长为7566 bp,包括5895 bp的开放阅读框,228 bp的5'端非翻译区,1443 bp的3'端非翻译区,共编码1964个氨基酸。预测该基因编码的蛋白质由31713个原子组成,分子式为C_(9765)H_(15897)N_(2849)O_(3150)S_(52),分子量约为225.28 kDa,理论等电点为5.56,N端信号肽具有29个氨基酸长度。瘤背石磺myhc具有2个保守结构域MYSc_class_Ⅱ和Myosin_tail_l,且亲水性氨基酸集中在Myosin_tail_l区。系统进化树分析显示,瘤背石磺myhc与光滑双脐螺(Biomphalaria glabrata)myhc的亲缘关系最近。RT-PCR结果显示,myhc基因在各个组织中均有表达,腹足和背部皮肤表达量最高,腹部皮肤、口球、肺囊中高表达,肝胰腺、蛋白腺、两性腺中微量表达(Pmyhc基因在瘤背石磺的主要运动器官腹足中高表达,说明肌肉运动对瘤背石磺湿地环境的两栖适应性具有至关重要的作用。实验结果为今后进一步研究瘤背石磺肌球蛋白重链基因进行原核表达及多克隆抗体的制备奠定了良好基础,更为深入探讨海洋无脊椎动物从海洋向陆地进化的研究提供有参考意义的分子依据。

关键词：瘤背石磺 myhc 基因克隆组织表达

叉头转录因子1(FoxO1)与肌球蛋白重链基因(myhc)的相关性及其对肉品质的影响

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食品与发酵工业 2016年第4期42卷 233-237页

作者：王乐郭月英程海星张利霞靳烨内蒙古农业大学食品科学与工程学院内蒙古呼和浩特010018

肉品质作为一个综合性状,从本质上,基因水平的遗传调控对肉质产生关键影响。随着肉品质研究的深入,多种肉质标记基因被不断发掘,基因之间的相互调控作用为进一步研究提供新的视野。FoxO1作为FoxO(叉头框转录因子)家族的重要成员,是多种... 详细信息

肉品质作为一个综合性状,从本质上,基因水平的遗传调控对肉质产生关键影响。随着肉品质研究的深入,多种肉质标记基因被不断发掘,基因之间的相互调控作用为进一步研究提供新的视野。FoxO1作为FoxO(叉头框转录因子)家族的重要成员,是多种细胞通路中关键的信号分子,参与骨骼肌的生长发育、脂肪沉积,并与多种肉质基因具有密切相关性。肌球蛋白重链(myhc)基因,通过基因表达对肌纤维类型产生直接调控,对肉质产生重要影响;文中对FoxO1、myhc基因的功能及其对肉品质的影响进行介绍,同时综述了FoxO1对myhc的调控作用与肉质的相关性,并对其调控机理进行了探讨。

关键词： FoxO1 myhc 肉质相关性研究

不同海拔牦牛骨骼肌肌纤维类型和myhc基因表达的比较

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中国兽医学报 2022年第6期42卷 1263-1269页

作者：周娟孟祥琼秦鸿楠万瑞东李琳张勤文荆海霞魏青青海大学农牧学院动物医学系青海西宁810016

为了阐明高原低氧对牦牛骨骼肌肌纤维类型的影响,本试验从青海省循化县(海拔2 200 m)、青海省海晏县(海拔3 200 m)、青海省祁连县(海拔3 900 m)选择临床健康的牦牛各3头,采用免疫组织化学方法(免疫荧光同源双标法)观测其骨骼肌中快肌、... 详细信息

为了阐明高原低氧对牦牛骨骼肌肌纤维类型的影响,本试验从青海省循化县(海拔2 200 m)、青海省海晏县(海拔3 200 m)、青海省祁连县(海拔3 900 m)选择临床健康的牦牛各3头,采用免疫组织化学方法(免疫荧光同源双标法)观测其骨骼肌中快肌、慢肌含量及比例和实时荧光定量PCR检测不同海拔牦牛骨骼肌肌球蛋白重链(myosin heavy chain, myhc)各亚型mRNA的变化。结果表明,牦牛骨骼肌中快肌数量显著高于慢肌且随着海拔的升高,快肌数量比和面积比逐渐增大,而慢肌数量比和面积比逐渐减小。牦牛骨骼肌中myhc各亚型间,MYH2基因相对表达量最高,其次是MYH1,且与MYH7相比差异显著(Pmyhc相互比较,MYH1和MYH4基因相对表达量随海拔的升高而增加,差异显著(Pmyhc基因表达差异说明牦牛骨骼肌中调控快肌纤维表达的基因mRNA转录水平比调控慢肌纤维表达的基因高。牦牛骨骼肌表现出这种趋势可能与其所处的高原低氧环境有关,随海拔增高,环境中的氧含量不断减少,肌纤维的氧化能力受到限制,牦牛为适应低氧的环境,其骨骼肌发生了从慢肌纤维向快肌纤维转化的变化。

关键词：牦牛肌纤维类型免疫组化 myhc 实时荧光定量PCR 高原低氧

不同发育阶段大通牦牛骨骼肌肌纤维类型及myhc基因表达

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中国兽医学报 2023年第1期43卷 152-157页

作者：秦鸿楠周娟李琳申什菊张勤文青海大学农牧学院青海西宁810016 青海省海东市农发委畜牧科青海海东814000

为了阐明不同发育阶段大通牦牛骨骼肌纤维类型变化特点及其低氧适应机制,本试验从青海省大通县(海拔3200 m)选取健康的1,30,180日龄和成年的大通牦牛作为研究对象,选择湖北省襄阳市(海拔约100 m)相同发育阶段的平原黄牛作为对照,采用免... 详细信息

为了阐明不同发育阶段大通牦牛骨骼肌纤维类型变化特点及其低氧适应机制,本试验从青海省大通县(海拔3200 m)选取健康的1,30,180日龄和成年的大通牦牛作为研究对象,选择湖北省襄阳市(海拔约100 m)相同发育阶段的平原黄牛作为对照,采用免疫组织化学染色的方法观测骨骼肌中快肌和慢肌的含量及比例的变化;采用实时荧光定量PCR检测不同海拔牦牛骨骼肌肌球蛋白重链(myosin heavy chain,myhc)基因各亚型mRNA表达的变化。结果表明:随年龄增长,大通牦牛骨骼肌快肌数量逐渐增多,慢肌数量比逐渐减少(PmyhcⅠmRNA含量逐渐升高,myhcⅡa mRNA含量先升高后降低,myhcⅡx和myhcⅡb mRNA含量逐渐降低,且呈现随年龄增长快肌向慢肌转化的特点。以上结果说明了大通牦牛骨骼肌myhcⅠ、Ⅱa、Ⅱx、Ⅱb基因在不同年龄段的表达情况,同时证明myhc 4种亚型的mRNA表达量可能与低氧环境有一定联系,大通牦牛为适应高原低氧环境,其骨骼肌肌纤维类型呈现快肌向慢肌转化的发育性模式,为深入研究大通牦牛的低氧适应机制提供了基础数据。

关键词：大通牦牛骨骼肌肌纤维类型 myhc 低氧适应机制

巴美肉羊和苏尼特羊Fox01、myhc基因表达规律及对肉质的影响

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巴美肉羊和苏尼特羊Fox01、MyHC基因表达规律及对肉质的影响

作者：张静内蒙古农业大学

学位级别：硕士

通过利用实时荧光定量技术测定46只不同月龄巴美肉羊及36只不同月龄苏尼特羊背最长肌(B)、臂三头肌(Q)、股二头肌(H)的FoxO1和myhc基因家族的相对表达量以及剪切力、色泽、pH值三项肉质指标,探讨FoxO1和myhc基因的表达规律,种间差异,基... 详细信息

通过利用实时荧光定量技术测定46只不同月龄巴美肉羊及36只不同月龄苏尼特羊背最长肌(B)、臂三头肌(Q)、股二头肌(H)的FoxO1和myhc基因家族的相对表达量以及剪切力、色泽、pH值三项肉质指标,探讨FoxO1和myhc基因的表达规律,种间差异,基因间相关性和基因表达量对肉质的影响。结果发现：(1) FoxO1和myhc Ⅱ x的表达规律在巴美肉羊中呈“M”型。在两品种羊中myhc Ⅰ和myhc Ⅱ a无明显规律。巴美肉羊myhc Ⅱb的表达量呈先上升后下降趋势,苏尼特羊FoxO1、myhc Ⅱb和myhc Ⅱ x的变化趋势与其相反。此外,五个基因在臂三头肌和股二头肌的表达量总是大于在背最长肌的表达量。(2)5月龄股二头肌、6月龄臂三头肌及12月龄背最长肌和股二头肌的myhc Ⅱb基因的表达量中,苏尼特羊的myhc Ⅱb表达量显著大于巴美肉羊myhc Ⅱb表达量(pmyhc基因家族的表达量正相关,其中FoxO1与myhc Ⅱb和myhc Ⅱ x的相关性较高平均r>0.6。myhc基因家族中,myhc Ⅰ与myhc Ⅱ a相关性r>0.63,myhc Ⅱb与myhc Ⅱ x相关性r>0.62。基因表达量与肉质性状相关性分析有如下结论：FoxO1和myhc基因对两个羊品种的黄度值(b)、亮度值(L)和pHHl存在显著性影响(pmyhc Ⅱ a与巴美肉羊的pH2虽没有显著相关性,但相关性较高r>0.63。宰后肌肉pH下降过快会导致较差的肉质,因此通过控制myhc Ⅱ a基因的表达量可能缓解pH的快速下降,从而提高肉质;myhc Ⅱb与苏尼特羊的剪切力平均r=0.54,因此苏尼特羊的嫩度可能随myhc Ⅱb表达量的增加而降低,故适当降低myhc Ⅱb基因的表达量可能让肌肉肉质更嫩。

关键词： FoxO1 myhc mRNA表达量肉品质羊

石磺科贝类MSTN和myhc基因的克隆和表达分析

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石磺科贝类MSTN和MyHC基因的克隆和表达分析

作者：刘欣上海海洋大学

学位级别：硕士

石磺科贝类是在海水、淡水、陆地都有分布的一类生物,它们的生活区域分布于浅海、滩涂潮间带甚至潮上带,生活环境具有典型的两栖性,其皮肤呼吸能力的强弱、肌肉的结构、角质层的形成和神经系统的发育程度因生活环境的不同表现出明显的... 详细信息

石磺科贝类是在海水、淡水、陆地都有分布的一类生物,它们的生活区域分布于浅海、滩涂潮间带甚至潮上带,生活环境具有典型的两栖性,其皮肤呼吸能力的强弱、肌肉的结构、角质层的形成和神经系统的发育程度因生活环境的不同表现出明显的生物适应性,因此石磺科贝类又被认为是海洋无脊椎动物从水生到陆生进化的过渡类群。为探究肌肉在石磺由海洋向陆地进化过程中发挥作用的分子机制,探讨其在该过程中产生的适应性进化,本论文以我国分布广泛且研究较为深入的4种石磺作为实验对象,以已有的转录组数据库为基础,比较分析后筛选、克隆了石磺肌肉相关基因,分析在不同种石磺、各组织中的表达状态,并对4种石磺进化关系进行了初步探讨。(1)采用RACE方法从瘤背石磺(Onchidium struma)肌肉中首次克隆到MSTN cDNA的全长并做了相应的组织表达分析。研究结果表明瘤背石磺MSTN基因cDNA全长2667bp,5′-非翻译区(5′-UTC)的长度为374bp,3′端非翻译区(3′-UTC)的长度为643bp,1650bp的开放阅读框(ORF),对应编码549个氨基酸。预测该基因编码的蛋白质原子总量为8776,分子式为C2774H4331N783O862S26,分子质量约为63.27kD,理论等电点为6.02,信号肽预测结果显示MSTN蛋白N端具有21个氨基酸长度的信号肽。瘤背石磺MSTN具有MSTN的共同特征,包括蛋白酶水解位点RSRR和C端多肽生物活性区以及9个保守的半胱氨酸残基。系统发生树分析结果显示瘤背石磺MSTN与加州海兔MSTN的亲缘关系最近。RT-PCR结果显示,MSTN基因在各个组织中均有表达;含肌纤维组织中的表达量低于内脏器官的表达量,在瘤背石磺肝胰腺中的表达量最高,瘤背石磺腹足中表达量最低(Pmyhc基因的编码区全长并进行了分析,结果表明瘤背石磺myhc基因cDNA全长7566bp,开放阅读框为5895bp,对应编码1964个氨基酸,同时包括228bp的5’端非翻译区,1443bp的3’端非翻译区。预测瘤背石磺myhc基因编码的蛋白质由31713个原子组成,分子式为C9765H15897N2849O3150S52,相对分子量约为225.28kD,理论等电点为5.56,信号肽预测结果表明瘤背石磺myhc蛋白N端具有29个氨基酸长度的信号肽。瘤背石磺myhc具有两个保守结构域MYSclass和Myosinail,且亲水性氨基酸集中在Myosinail。里氏拟石磺myhc的cDNA全长7598bp,包括5904bp的开放阅读框,对应编码1967个氨基酸,276bp的5′端非翻译区,1418bp的3′端非翻译区,预测编码蛋白原子总量31713,分子式为C9765H15894N2860O3156S56;平疣桑椹石磺myhc的cDNA全长7115bp,预测开放阅读框为5904bp,预测编码1967个氨基酸,5′-UTC为165bp,3′-UTC为1046bp,预测编码蛋白原子总量31776,分子式为C9785H15921N2865O3153S52;紫色疣石磺myhc的cDNA全长7115bp,预测ORF为5904bp,对应编码1967个氨基酸,192bp的5′-UTC,1059bp的3′-UTC,预测编码蛋白原子总量31730,分子式为C9762H15895N2859O3157S57。石磺科贝类myhc具有两个保守结构域MYSclass和Myosinail,且亲水性氨基酸集中在Myosinail。该实验结果对深入研究石磺肌球蛋白重链基因的原位杂交实验、western blot检测奠定了基础。(3)为探究石磺科贝类肌肉相关基因在各组织中的表达差异,分别取瘤背石磺的背部皮肤、腹部皮肤、腹足、肺囊、肝胰腺、口球、两性腺、蛋白腺8个组织以及里氏拟石磺、平疣桑椹石磺、紫色疣石磺的背部皮肤、腹部皮肤、腹足、肺囊4个组织进行荧光定量检测。myhc基因在4种石磺不同组织中的荧光定量结果显示:背部皮肤中,瘤背石磺的表达量最高,里氏拟石磺表达量最低,且表达差异显著;腹部皮肤中,平疣桑椹石磺表达量最高;腹足中平疣桑椹石磺表达量最高,瘤背石磺次之,里氏拟石磺表达量最低,表现出显著差异;肺囊中整体表达量低,瘤背石磺表达量最高,未出现显著性差异。瘤背石磺MSTN、myhc基因在瘤背石磺8个组织中均检测到表达,且大致上呈现一种负相关的关系,从而间接证明MSTN基因对myhc的表达具有一定的负调控作用。实验

关键词：石磺科基因克隆 MSTN myhc 组织表达

Acquired Cardiomyopathy Caused by Cardiac Tsc1 Deficiency

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Journal of Genetics and Genomics 2014年第2期41卷 73-77页

作者： Yi Chena Fang Wang Chunjia Li Lianmei Wang Hongbing Zhang Hongbing Yan Department of Cardiology Beijing An Zhen HospitalCapital Medical University Department of Physiology Institute of Basic Medical Sciences and School of Basic MedicinePeking Union Medical College and Chinese Academy of Medical Sciences Center for Coronary Heart Disease Cardiovascular Institute & Fu Wai HospitalPeking Union Medical College and Chinese Academy of Medical Sciences

Cardiomyopathies are myocardial disorders with enlarged, thick, or rigid cardiac muscles. Because no effective treatment is available to prevent the deterioration of the myocardium function, the prognosis of cardiomyopathy is usually poor. Cardiomyopathies can be inherited or acquired. A number of genes associated with inherited cardiomyopathy, such as the genes encoding for sarcomeric, cytoskeletal,

关键词： than Acquired Cardiomyopathy Caused by Cardiac Tsc1 Deficiency mTOR BNP myhc

猪背最长肌肌纤维类型的发育性变化及品种与营养影响特点

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畜牧兽医学报 2008年第12期39卷 1701-1708页

作者：杨飞云陈代文黄金秀刘作华四川农业大学动物营养研究所雅安625014 重庆市畜牧科学院重庆402460

选用荣昌（RC）猪和杜×长×大（DLY）杂交猪为试验动物，采用相对定量RTPCR测定10～120kg体质量时背最长肌中I、2a、2x和2b4种myhc的基因表达，以探讨猪背最长肌肌纤维类型的发育性变化，并分析品种及营养对它的影响特点。结果表明：（... 详细信息

选用荣昌（RC）猪和杜×长×大（DLY）杂交猪为试验动物，采用相对定量RTPCR测定10～120kg体质量时背最长肌中I、2a、2x和2b4种myhc的基因表达，以探讨猪背最长肌肌纤维类型的发育性变化，并分析品种及营养对它的影响特点。结果表明：（1）10～20始，2个品种的背最长肌肌纤维类型的百分组成发生显著改变，myhcI和2x型纤维比例显著降低，而2b型纤维比例显著提高；（2）20～120kg，背最长肌肌纤维的变化规律因品种和纤维类型而异，除myhc2b外，2个品种的myhcI、2a和2x型肌纤维的发育规律存在一定差异；（3）背最长肌肌纤维类型的百分组成在10～50kg阶段未见品种间显著差异，但在80kg，RC猪的myhc2b型纤维比例显著低于DLY猪，而2a型纤维比例则正好相反；（4）饲粮营养水平对2个品种猪背最长肌肌纤维类型的百分组成均无显著影响。以上结果提示，2个品种的背最长肌肌纤维类型的发育性规律及组成存在差异，且纤维组成差异主要表现在80kg，RC猪的myhc2b型纤维比例显著低于DLY猪，可能与其优良肉质相关。

关键词：猪背最长肌 myhc I myhc 2a myhc 2b myhc 2x