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mx蛋白抗病毒研究进展

军事医学科学院院刊 2008年第5期32卷 475-477页

作者：周鹏侯利华陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

mx蛋白属于大GTP酶的动态蛋白（dynamin）超家族，在体内由I型IFN诱导。大多数的脊椎动物有1—3个不同细胞内定位的mx蛋白异构体，一般定位于核内或胞质中。mx蛋白具有广谱的抗病毒能力，对RNA病毒，如流感病毒、水泡性口炎病毒、托高... 详细信息

mx蛋白属于大GTP酶的动态蛋白（dynamin）超家族，在体内由I型IFN诱导。大多数的脊椎动物有1—3个不同细胞内定位的mx蛋白异构体，一般定位于核内或胞质中。mx蛋白具有广谱的抗病毒能力，对RNA病毒，如流感病毒、水泡性口炎病毒、托高土病毒、汉坦病毒和狂犬病毒等有作用，甚至对DNA病毒（如乙型肝炎病毒）也有一定的作用。本文论述了mx蛋白的结构，并探讨了各个种属来源的mx蛋白抑制不同病毒的作用及机制。

关键词： mx蛋白抗病毒作用干扰素

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鸡mx蛋白基因诱变修饰及抗病活性

微生物学报 2008年第6期48卷 785-789页

作者：倪黎纲吴晓伟程旭梅陈昊陈强宋成义徐琪李碧春扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 苏州大学医学院基础医学系苏州215006

【目的】进一步研究鸡mx蛋白第631位氨基酸的变异与鸡群抗病性的相关性。【方法】本实验利用PCR突变技术将鸡mx蛋白基因的全长cDNA第2032位的碱基由G突变为A(既631位氨基酸的改变),并将突变的mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,重组表达... 详细信息

【目的】进一步研究鸡mx蛋白第631位氨基酸的变异与鸡群抗病性的相关性。【方法】本实验利用PCR突变技术将鸡mx蛋白基因的全长cDNA第2032位的碱基由G突变为A(既631位氨基酸的改变),并将突变的mx基因插入真核表达载体pcDNA3.0,重组表达载体转染COS-Ⅰ细胞后,进行RT-PCR与间接免疫荧光(IFA)鉴定。【结果】对鸡mx蛋白基因的cDNA进行PCR诱变修饰正确,构建了能够正确表达鸡mx蛋白的重组真核表达载体;诱变修饰重组mx蛋白对抗新城疫病毒(NDV)感染分析结果显示,重组mx蛋白具有较强的抗新城疫病毒生物活性。【结论】为下一步研究鸡mx蛋白的抗病机理与制备抗病转基因鸡奠定了坚实的基础。

关键词： mx蛋白 PCR突变抗病毒活性新城疫病毒

鸡突变型和未突变型mx蛋白体外抗病毒活性研究

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中国农业科学 2012年第5期45卷 990-998页

作者：傅德智孙敏郑蒙蒙高波张亚妮窦套存王克华李碧春孙怀昌扬州大学动物科学与技术学院/江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室中国农业科学院家禽研究所扬州大学兽医学院

【目的】研究鸡mx蛋白第631位氨基酸变异与抗病性的相关性。【方法】用已经构建成功的中国狼山鸡mx蛋白基因突变型pcDNA3.0-Mmx和未突变型pcDNA3.0-mx真核表达载体分别转染鸡成纤维(CEF)细胞和鼠成纤维(NIH-3T3)细胞;利用RT-PCR检测突变... 详细信息

【目的】研究鸡mx蛋白第631位氨基酸变异与抗病性的相关性。【方法】用已经构建成功的中国狼山鸡mx蛋白基因突变型pcDNA3.0-Mmx和未突变型pcDNA3.0-mx真核表达载体分别转染鸡成纤维(CEF)细胞和鼠成纤维(NIH-3T3)细胞;利用RT-PCR检测突变型Mmx基因和未突变型mx基因的表达,微量细胞病变抑制法测定重组蛋白抗新城疫病毒(NDV)和水泡性口炎病毒(VSV)的效果。【结果】诱变鸡mx基因的表达重组蛋白可保护CEF细胞在孵育48 h内免受NDV的感染;转染突变型pcDNA3.0-Mmx真核表达载体的NIH-3T3细胞在孵育60 h内亦未受到VSV的浸染;而转染未突变型pcDNA3.0-mx真核表达载体的CEF和NIH-3T3细胞在24 h内均发生了病变。【结论】体外重组突变的mx蛋白在单细胞水平上具有延缓NDV和VSV感染的能力。

关键词： mx蛋白抗病毒活性抗NDV 抗VSV 狼山鸡

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4个种属mx蛋白抑制水疱性口炎病毒的研究

南京农业大学学报 2017年第4期40卷 690-696页

作者：高志参李照耀周静陈婧周斌南京农业大学动物医学院江苏南京210095

[目的]本试验旨在研究4个种属(猪、人、小鼠、牛)mx蛋白抗水疱性口炎病毒(VSV)的活性,以揭示胞质定位mx蛋白抗VSV活性的保守性。[方法]设计特异性引物,PCR扩增4个种属mx蛋白的全长基因,构建真核表达质粒;PK-15细胞过表达重组质粒,Wester... 详细信息

[目的]本试验旨在研究4个种属(猪、人、小鼠、牛)mx蛋白抗水疱性口炎病毒(VSV)的活性,以揭示胞质定位mx蛋白抗VSV活性的保守性。[方法]设计特异性引物,PCR扩增4个种属mx蛋白的全长基因,构建真核表达质粒;PK-15细胞过表达重组质粒,Western blot或间接免疫荧光试验(IFA)检测4个种属mx蛋白在PK-15细胞内的表达及分布;过表达mx蛋白的PK-15细胞感染VSV,8或16 h后收样,分别用RT-q PCR、Western blot、IFA和噬斑减少试验来分析VSV的复制。[结果]成功克隆并表达了4个种属mx蛋白的全长基因,且mx蛋白大小正确;虽然猪mx1蛋白和小鼠mx2蛋白以棒状形式分布于细胞质中,而猪mx2蛋白、人mx A蛋白和牛mx1蛋白以颗粒形式弥散分布于细胞质中,但4个种属mx蛋白均能通过抑制VSV-G mRNA的转录、减少VSV-G蛋白的合成及降低子代病毒的滴度来显著抑制VSV的增殖。[结论]4个种属mx蛋白都能显著抑制VSV在PK-15细胞中的增殖。

关键词： mx蛋白不同种属水疱性口炎病毒(VSV) 抗病毒

鸡抗病毒mx蛋白修饰及其真核表达载体的构建

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畜牧兽医学报 2008年第7期39卷 891-894页

作者：倪黎纲何先红余飞李碧春高波谢飞程旭梅吴晓伟扬州大学动物科学与技术学院扬州225009

利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长mxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的mx基因插入真核表... 详细信息

利用高保真RT-PCR的方法从Poly(I).Poly(C)诱导的鸡成纤维细胞总RNA中扩增出鸡全长mxcD-NA,扩增产物克隆到pMD19-T Simple载体上,利用PCR突变技术将其第2 032位的碱基由G突变为A,经克隆测序证实突变成功后,将已突变的mx基因插入真核表达载体,通过PCR、酶切鉴定插入片段正确,提取质粒转染COS-Ⅰ细胞进行RT-PCR鉴定。结果表明:正确克隆了鸡mx基因,并成功对该基因进行PCR诱变修饰,构建了能够表达鸡mx基因的重组真核表达载体,为mx基因体内外表达及生物学活性的进一步研究奠定了基础。

关键词： mx蛋白 PCR突变真核表达载体

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鸡mx蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

中国预防兽医学报 2013年第7期35卷 589-591页

作者：胡卫杰王伟孙建华邓瑞坡张雅春尹海畅孟庆文中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室黑龙江哈尔滨150001

mx蛋白为GTP酶动态蛋白家族成员,已被证明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用。为制备鸡mx蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸡mx蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接... 详细信息

mx蛋白为GTP酶动态蛋白家族成员,已被证明具有抗禽流感病毒、Thogoto病毒和水泡性口膜炎病毒等的作用。为制备鸡mx蛋白的单克隆抗体(MAb),本研究以原核表达并纯化的鸡mx蛋白为免疫原,免疫BALB/c小鼠,分离脾细胞与SP2/0细胞融合,采用间接ELISA方法筛选阳性克隆,经3次细胞克隆纯化后获得4株稳定分泌抗鸡mx蛋白抗体的杂交瘤细胞株。间接ELISA测定4株MAb纯化后腹水的效价介于1∶3.2×104～1∶2.5×105之间。Western blot结果证实4株MAb均具有良好的反应性;间接免疫荧光试验表明其中一株MAb与真核表达的鸡mx蛋白发生反应。本研究为鸡mx蛋白功能及表达鸡mx蛋白的转基因动物等研究奠定了基础。

关键词：鸡 mx蛋白单克隆抗体

PolyI∶C不同途径诱导大菱鲆mx蛋白基因的转录

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渔业科学进展 2009年第6期30卷 1-6页

作者：王印庚毛明光刘宗柱张家松陈贵平廖梅杰曲江波中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛266071 厦门大学海洋与环境学院 361005 青岛农业大学生命科学学院 266109 烟台开发区天源水产有限公司 264000

以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上... 详细信息

以PolyI∶C(又称聚肌胞)为诱导剂,分别通过腹腔注射、浸泡和投喂3种途径诱导大菱鲆Scophthalmus maximus体内抗病毒蛋白mx基因的转录,利用半定量RT-PCR方法检测干扰素下游基因-mx基因的转录水平来确定该诱导剂的诱导效果。结果显示,以上3种途径都能高效诱导mx蛋白mRNA的转录,均在48h之后达到高峰,其中以浸泡的方式更容易诱导mx基因转录,且在120h时仍保持较高水平。mx基因转录的时相变化证明了国产PolyI∶C可以通过多种途径诱导抗病毒蛋白mx的表达,为实际应用中确定用药途径提供了理论依据。另外,实验初步建立了半定量RT-PCR方法,为检测鱼体内干扰素的表达提供了技术方法。

关键词： PolyI∶C 大菱鲆 mx蛋白干扰素诱导剂基因转录

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禽类mx蛋白的研究进展

畜牧与兽医 2007年第6期39卷 57-60页

作者：倪黎纲李碧春包文斌扬州大学动物科学与技术学院江苏扬州225009

mx蛋白在许多生物体内发现,具有广泛的抗病毒作用和GTP酶水解活性,是Ⅰ型干扰素诱导的蛋白,属于大分子GTP酶动态蛋白家族,其特征在N端有一个三联体GTP结构域和发动蛋白家族的结构特征序列,以及C端高度保守的亮氨酸拉链结构域。本文对mx... 详细信息

mx蛋白在许多生物体内发现,具有广泛的抗病毒作用和GTP酶水解活性,是Ⅰ型干扰素诱导的蛋白,属于大分子GTP酶动态蛋白家族,其特征在N端有一个三联体GTP结构域和发动蛋白家族的结构特征序列,以及C端高度保守的亮氨酸拉链结构域。本文对mx蛋白的发现、结构、表达调控、抗病毒活性等作一简要综述,着重介绍了禽类mx蛋白的研究进展,并对禽类mx蛋白研究的应用进行了展望。

关键词： mx蛋白禽类表达调控抗病毒活性

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鸡mx蛋白抗病毒作用研究进展

动物医学进展 2014年第11期35卷 79-83页

作者：冀君许鑫唐青海邱礽唐存多阚云超姚伦广南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室河南南阳473061

mx蛋白是在脊椎动物机体细胞受病毒感染或诱生剂处理时由Ⅰ型干扰素诱导表达的一种抗病毒蛋白。mx蛋白具有良好的抗病毒能力,靶向许多RNA病毒,诸如流感病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病毒等,对某些DNA病毒,例如乙型肝炎病毒也有一定的作用... 详细信息

mx蛋白是在脊椎动物机体细胞受病毒感染或诱生剂处理时由Ⅰ型干扰素诱导表达的一种抗病毒蛋白。mx蛋白具有良好的抗病毒能力,靶向许多RNA病毒,诸如流感病毒、水疱性口炎病毒、狂犬病毒等,对某些DNA病毒,例如乙型肝炎病毒也有一定的作用。近年来,基于鸡的mx蛋白抗病毒作用及机制的相关研究逐渐增多,取得了一些进展。论文就近年来鸡mx蛋白的抗病毒机制与分子生物学特点进行综述,针对鸡mx蛋白在抗病毒与品种鸡抗病育种筛选等应用前景进行分析与探讨。

关键词： mx蛋白抗病毒作用抗病育种鸡