检索结果-南通市图书馆

中华实验外科杂志 2024年第1期41卷 99-102页

作者：张磊冷子宽燕淼恒宋宗冕陈松峰毛克亚刘宏建郑州大学第一附属医院骨科医学部郑州450000 解放军总医院骨科医学部北京100000

目的探讨muse干细胞对脂多糖(LPS)诱导的髓核细胞(NPCs)转录组基因表达差异的影响。方法采用胰酶消化方法从人脐带间充质干细胞中获取muse干细胞,LPS刺激大鼠原代NPCs诱导其凋亡及炎症,以模拟椎间盘退变微环境。使用muse干细胞与间充质... 详细信息

目的探讨muse干细胞对脂多糖(LPS)诱导的髓核细胞(NPCs)转录组基因表达差异的影响。方法采用胰酶消化方法从人脐带间充质干细胞中获取muse干细胞,LPS刺激大鼠原代NPCs诱导其凋亡及炎症,以模拟椎间盘退变微环境。使用muse干细胞与间充质干细胞与LPS刺激后的髓核细胞共培养24 h。通过细胞免疫荧光检测SSEA-3和CD105来鉴定muse干细胞,通过细胞免疫荧光检测二型胶原蛋白(CollagenⅡ)和聚集蛋白聚糖(Aggrecan)来鉴定大鼠原代NPCs。取未处理的髓核细胞,LPS刺激后的髓核细胞,以及muse干细胞与间充质干细胞共培养NPCs各3个样本进行提取组织总RNA,后进行转录组测序。对测序获得的基因表达数据,使用R软件中的DESeq2包进行差异分析,采用生物信息学方法筛选出差异表达基因。对差异表达基因进行基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析,筛选在椎间盘退变(IDD)进展中muse干细胞可能起作用的相关基因。结果与未处理的髓核细胞比较,LPS刺激后的NPCs有1560个上调差异表达基因(DEGs)和2173个下调DEGs,muse干细胞共培养后有143个上调DEGs和62个下调DEGs,MSCs共培养后有142个上调DEGs和72个下调DEGs。GO数据库分析表明DEGs主要富集到ERK1和ERK2级联的正调节、细胞外基质(ECM)形成和细胞迁移。而KEGG富集分析的主要通路分别为:ECM受体的相互作用、TGF-β信号通路、细胞因子与其受体的相互作用、肿瘤坏死因子(TNF)信号通路、糖胺聚合蛋白组成、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)信号通路、趋化因子信号通路和钙信号通路。结论ECM、生长因子、胶原纤维蛋白组分、炎症趋化因子以及TNF和PI3K-Akt信号通路在muse干细胞修复损伤的髓核细胞过程中发挥重要作用。

关键词： muse干细胞髓核细胞转录组测序细胞凋亡

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