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抑制KAI1诱导的自噬对胰腺癌miapaca-2细胞增殖及凋亡的影响

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中华胰腺病杂志 2012年第1期12卷 63-64页

作者：吴春燕郭晓钟王华沈阳军区总医院消化内科沈阳110015 军事医学科学院放射与辐射医学研究所

细胞自噬是一种重要的促细胞生存途径，同时也是一种不同于凋亡和坏死的死亡方式。KAI1是缺氧目的基因，体内缺氧时亦可诱导细胞自噬。我们前期报道了KAI1诱导miapaca-2自噬，并增加细胞的存活，本研究进一步探讨抑制KAI1诱导的自噬对... 详细信息

细胞自噬是一种重要的促细胞生存途径，同时也是一种不同于凋亡和坏死的死亡方式。KAI1是缺氧目的基因，体内缺氧时亦可诱导细胞自噬。我们前期报道了KAI1诱导miapaca-2自噬，并增加细胞的存活，本研究进一步探讨抑制KAI1诱导的自噬对该细胞增殖及凋亡的影响。

关键词： miapaca-2 细胞自噬 KAI1 细胞增殖凋亡胰腺癌细胞生存死亡方式

Beclinl基因沉默对胰腺癌miapaca-2细胞生长的影响

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中华胰腺病杂志 2013年第6期13卷 415-416页

作者：李晓姝郭晓钟王华肖凤君李宏宇任丽楠沈阳军区总医院消化科沈阳110083 沈阳市第四人民医院消化科军事医学科学院放射与辐射研究所

Beclin1基因与酵母自噬基因Atg 6同源,是参与哺乳动物自噬体形成,调控细胞自噬过程的重要基因.Beclin1自噬基因的缺陷可能导致肿瘤细胞逃避自噬性死亡[1],而稳定转染Beclin1后可促进细胞的自噬活性,并降低了其成瘤能力[2].本研究观察沉... 详细信息

Beclin1基因与酵母自噬基因Atg 6同源,是参与哺乳动物自噬体形成,调控细胞自噬过程的重要基因.Beclin1自噬基因的缺陷可能导致肿瘤细胞逃避自噬性死亡[1],而稳定转染Beclin1后可促进细胞的自噬活性,并降低了其成瘤能力[2].本研究观察沉默胰腺癌miapaca-2细胞的Beclin1基因表达后对其增殖、凋亡及细胞周期分布的影响,为胰腺癌的基因治疗提供新的思路. 一、材料与方法 1.靶向Beclin1的siRNA表达载体构建：根据siRNA设计原理,由上海吉玛制药技术有限公司构建3个插入靶向Beclin1基因的siRNA（Beclin1-siRNA）质粒以及阴性对照siRNA（NC-siRNA）质粒和荧光标记的siRNA（FAM-siRNA）质粒.经筛选后选择沉默效果最好的Beclin1-siRNA序列插入表达载体U6/Neo,构建表达载体U6/Neo-shBeclin1,同时构建阴性对照载体pGPU6/Neo-shNC及荧光对照载体pGPU6/GFP/Neo-shNC.

关键词： miapaca-2 基因沉默细胞生长胰腺癌 Beclin1 表达载体构建自噬性死亡 siRNA

Tetracycline-inducible protein expression in pancreatic cancer cells: Effects of CapG overexpression

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World Journal of Gastroenterology 2011年第15期17卷 1947-1960页

作者： Sarah Tonack Sabina Patel Mehdi Jalali Taoufik Nedjadi Rosalind E Jenkins Christopher Goldring John Neoptolemos Eithne Costello Liverpool CR-UK Centre Department of Molecular and Therapeutic Cancer MedicineUniversity of Liverpool Liverpool L69 3GA United Kingdom MRC Centre forDrug Safety Science Department of Pharmacology and Therapeutics School of Biomedical Sciences University of Liverpool L69 3GA United Kingdom National Institute for Health Research Pancreatic Biomedical Research Unit Liverpool L69 3GA United Kingdom

AIM: To establish stable tetracycline-inducible pancreatic cancer cell lines. METHODS: Suit-2, miapaca-2, and Panc-1 cells were transfected with a second generation reverse tetracycline-controlled transactivator protein (rtTA2S-M2), under the control of either a cytomegalovirus (CMV) or a chicken β-actin promoter, and the resulting clones were ***: Use of the chicken (β-actin) promoter proved superior for both the production and maintenance of doxycycline-inducible cell lines. The system proved versatile, enabling transient inducible expression of a variety of genes, including GST-P, CYP2E1, S100A6, and the actin capping protein, CapG. To determine the physiological utility of this system in pancreatic cancer cells, stable inducible CapG expressors were established. Overexpressed CapG was localised to the cytoplasm and the nuclear membrane, but was not observed in the nucleus. High CapG levels were associated with enhanced motility, but not with changes to the cell cycle, or cellular proliferation. In CapG-overexpressing cells, the levels and phosphorylation status of other actin-moduating proteins (Cofilin and Ezrin/Radixin) were not altered. However, preliminary analyses suggest that the levels of other cellular proteins, such as ornithine aminotransferase and enolase, are altered upon CapG induction. CONCLUSION: We have generated pancreatic-cancer derived cell lines in which gene expression is fully controllable.

关键词： Pancreatic cancer cells Tetracycline-inducible CapG Suit-2 Panc-1 miapaca-2

Lxn，bcl-2，c-myc在胰腺癌干细胞中的表达及意义

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中华普通外科杂志 2013年第3期28卷 236-237页

作者：郑继行蔡振寨周香盛维为樊钊强薛战雄郑志强温州医学院附属第二医院普外科浙江省325000

本研究通过免疫磁珠分选技术分选出胰腺癌细胞株miapaca-2中的CD133＋细胞，并检测lxn，bcl-2，c-mye在CD133＋与CD133-细胞中表达，探讨其可能的生物学意义。

关键词：胰腺癌细胞株干细胞 bel-2 c-myc miapaca-2 免疫磁珠分选 bcl-2 c-mye

CDK11p58促进人胰腺导管腺癌细胞增殖机制的研究

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CDK11p58促进人胰腺导管腺癌细胞增殖机制的研究

作者：余诗灏中国协和医科大学

学位级别：硕士

CDK11p58属于CDK11/PITSLRE蛋白激酶家族成员,由Cdc2L2编码,是一种重要的细胞周期调控蛋白。胰腺癌是一种恶性程度高、病情进展快、预后极差的消化系统肿瘤,胰腺导管腺癌是其主要组织学形式,近年来其发病率明显增高。目前,CDK11p28蛋... 详细信息

CDK11p58属于CDK11/PITSLRE蛋白激酶家族成员,由Cdc2L2编码,是一种重要的细胞周期调控蛋白。胰腺癌是一种恶性程度高、病情进展快、预后极差的消化系统肿瘤,胰腺导管腺癌是其主要组织学形式,近年来其发病率明显增高。目前,CDK11p28蛋白与胰腺癌发生发展的关系尚不清楚。在本论文中,我们针对CDK11p58与胰腺导管腺癌细胞增殖的关系及其作用的分子机制进行了研究。我们构建了CDK11p58的原核表达载体,通过采用脂质体转染真核表达载体及G418筛选的方式,获得了稳定过表达CDK11p58的miapaca-2(人胰腺导管腺癌细胞)单克隆细胞和空载体细胞,通过流式细胞分析、MTT检测及real-time PCR的方法检测了细胞周期、细胞增殖能力及G1/S期相关调控基因的转录水平。研究结果显示：该单克隆细胞(实验组)与空载体组细胞和空白对照组细胞相比G1期细胞比例明显下降(P21等G1/S期相关调控基因mRNA水平较两组对照细胞明显升高(P21基因转录水平,促进细胞通过G1/S期检验点,从而加快细胞的增殖。本研究为进一步研究CDK11p58与胰腺癌的关系及胰腺癌的治疗奠定了一定基础。

关键词： CDK11p58 Cdc2L2 胰腺癌 miapaca-2

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重楼皂苷Ⅶ对胰腺癌细胞的作用研究

湖北医药学院学报 2020年第6期39卷 544-550,F0002页

作者：胡世尚周圆圆吴子豪朱敏郗雪艳杜伯雨喻青青湖北医药学院湖北十堰442000

目的:研究重楼皂苷Ⅶ对胰腺癌miapaca-2细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法:不同浓度的重楼皂苷Ⅶ处理胰腺癌细胞后,高内涵筛选(High-content screening,HCS)分析细胞数量、面积、迁移速度、圆度的变化;MTT法检测细胞存活能力;平板克隆... 详细信息

目的:研究重楼皂苷Ⅶ对胰腺癌miapaca-2细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法:不同浓度的重楼皂苷Ⅶ处理胰腺癌细胞后,高内涵筛选(High-content screening,HCS)分析细胞数量、面积、迁移速度、圆度的变化;MTT法检测细胞存活能力;平板克隆技术检测细胞增殖能力;划痕实验和Transwell观察重楼皂苷Ⅶ抑制细胞的迁移能力;DAPI染色和流式细胞术检测细胞形态和凋亡情况;成球实验检测重楼皂苷Ⅶ对miapaca-2干细胞的抑制情况;Real-time PCR检测重楼皂苷Ⅶ处理miapaca-2干细胞标志物CD133的表达情况。结果:MTT结果显示重楼皂苷Ⅶ能明显抑制胰腺癌miapaca-2细胞的活力,呈剂量依赖关系;重楼皂苷Ⅶ对胰腺癌细胞迁移、侵袭有一定的抑制作用;DAPI染色发现随着药物浓度升高,细胞形态发生明显变化,出现核固缩;流式结果表明细胞凋亡率随重楼皂苷Ⅶ浓度增大而逐渐升高;重楼皂苷Ⅶ可抑制miapaca-2的成球能力;同时可导致miapaca-2干细胞标志物CD133的表达降低。结论:重楼皂苷Ⅶ在体外可以抑制胰腺癌miapaca-2细胞的增殖、迁移和侵袭能力,诱导细胞发生凋亡,并且抑制胰腺癌干细胞的增殖及干细胞标志物CD133的表达。

关键词：重楼皂苷Ⅶ 胰腺癌 miapaca-2 细胞增殖细胞凋亡肿瘤干细胞

紫锥菊中具细胞毒活性的聚乙炔及多烯类成分的分离和结构鉴定

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国外医药（植物药分册） 2007年第5期22卷 212-213页

作者：刘嵩

〔英〕/Pellati F…∥Phytochemistry.-2006,67(13).-1359～1364以生物检测为导向,从紫锥菊Echinacea pallida(Nutt.)Nutt.根中分离出2个聚乙炔化合物(1,3)和3个多烯成分(2,4,5),其中化合物3和4为新的天然产物,鉴定了新化合物的结构,并用人胰腺癌细胞系miapaca-2检测了它们的细胞毒活性。将该植物根的干粉用索氏提取器以正己烷提取24h,真空干燥后提取物溶于正己烷-醋酸乙酯,再经硅胶柱色谱分离,以正己烷-醋酸乙酯(2∶1)洗脱得多个部位。分别从部位I和H分得化合物1和2;从部位F分得化合物3和4,从部位C分得化合物5。用UV、IR、NMR和MS等光谱法测定了5个化合物的结构。化合物3为淡棕黄色树胶状物,分子式为C15H18O2,结构为十五(9E)-烯-11,13-二炔-2,8-二酮;化合物4为黄色无定形固体,分子式为C15H20O2,结构为十五-(9E,13E)-二烯-11-炔-2,8-二酮。细胞毒活性试验显示,化合物3、4、5质量浓度为1～100μg/mL,对miapaca-2细胞株显示中等强度细胞毒活性,IC50分别为10.5、...

关键词：细胞毒活性结构鉴定多烯类聚乙炔紫锥菊成分 miapaca-2 人胰腺癌细胞系

紫锥菊属植物根的己烷提取物对人癌细胞系的细胞毒活性

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国外医药（植物药分册） 2008年第2期23卷 80-80页

作者：吕昔琴

研究了紫锥菊属Echinacea Moench.植物紫锥菊***(L.)Moench、狭叶紫锥菊*** ***和淡紫紫锥菊***(Nutt.)Nutt.根的己烷提取物对胰腺癌miapaca-2与结肠癌COLO320细胞系的细胞毒活性与凋亡诱导作用。[第一段]

关键词：紫锥菊属植物根细胞毒活性人癌细胞系己烷提取物 miapaca-2 凋亡诱导作用结肠癌胰腺癌