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mirna-124通过调控小胶质细胞参与D-半乳糖诱导大鼠记忆功能减退的机制研究

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miRNA-124通过调控小胶质细胞参与D-半乳糖诱导大鼠记忆功能减退...

作者：黄靖豪福建医科大学

学位级别：硕士

目的探索mirna-124参与D-半乳糖诱导大鼠记忆功能减退的可能机制。方法60只3月龄健康雄性SD大鼠,体重200～250g,通过SPSS随机数生成器随机分成N.S.组、D-gal组、D-gal+Ultrapure water组、D-gal+Agomir组和D-gal+Antagomir组,每组12只。适应性喂养后分别对D-gal+Ultrapure water组、Dgal+Agomir组及D-gal+Antagomir组大鼠进行双侧海马立体定向注射超纯水1μl、mirna-124 agomir及antagomir各0.25nmol(超纯水稀释至1μl)。3天后,D-gal组、D-gal+Ultrapure water组、D-gal+Agomir组及D-gal+Antagomir组大鼠颈背部皮下注射浓度为100mg/ml的D-半乳糖1000mg/(kg·d)1周,N.S.组大鼠皮下注射等量生理盐水1周。随后进行3天的新物体识别实验和5天的Morris水迷宫实验。行为学测试结束后每组大鼠随机6只取大脑,分别进行病理切片HE染色和Iba-1免疫组化;其余6只取海马组织,利用RT-q PCR、Western-Blot、ELISA等分别对海马组织Iba-1、i NOS、IL-1β、IL-6、TNF-α、Arg-1、IL-4、IL-10等表达量进行检测。结果各组大鼠在实验期间运动功能正常,体重和游泳速度(均P>0.05)等差异无显著差异。与N.S.组相比,D-gal组大鼠出现记忆功能减退的行为学表现:新物体识别指数降低(Pmirna-124表达减少(P0.05)。与Dgal+Ultrapure water组相比,D-gal+Agomir组mirna-124表达上调(Pmirna-124表达下调(Pmirna-124、i NOS、Arg-1、IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-4、IL-10的表达或分泌等均有明显差异(均Pmirna-124与D-半乳糖快速诱导的记忆功能减退呈明显的负相关,其机制可能是通过调控小胶质细胞极化,促进M1亚型向M2亚型转化,减轻炎症作用,促进组织修复,从而起到保护海马锥体细胞、预防记忆减退的作用。

关键词： mirna-124 记忆功能减退小胶质细胞神经炎症

mirna-124 in immune system and immune disorders

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中国药理学与毒理学杂志 2017年第10期31卷 998-998页

作者： Zhen QIN Peng-yuan WANG Ding-feng SU Xia LIU Department of Pharmacology Second Military Medical University

In recent years,miR-124 has emerged as a critical modulator of immunity and ***,we summarize studies on the function and mechanism of miR-124 in the immune system and immunity-related *** indicated that miR-124 exerts a crucial role in the development of immune system,regulation of immune responses,and inflammatory *** is evident that miR-124 may serve as an informative diagnostic biomarker and therapeutic target in the future.

关键词： mirna-124 biomarker target immunity immune disorders

mirna-124通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控晶状体上皮细胞增殖、迁移及凋亡的机制研究

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miRNA-124通过PI3K/AKT/mTOR信号通路调控晶状体上皮细胞增殖、迁...

作者：蒲雅迪青岛大学

学位级别：硕士

目的:后发性白内障(posterior capsule opacification,PCO)是目前白内障术后最常见的并发症之一,摘除白内障后不可避免的会有部分晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)残留,残留在晶状体囊膜及赤道部的LECs发生增殖、迁移及上皮... 详细信息

目的:后发性白内障(posterior capsule opacification,PCO)是目前白内障术后最常见的并发症之一,摘除白内障后不可避免的会有部分晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LECs)残留,残留在晶状体囊膜及赤道部的LECs发生增殖、迁移及上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)是PCO发生、发展的主要原因。Nd:YAG激光后囊截开术是主要治疗手段,但易出现眼压升高、眼前黑影等并发症。本研究通过测定大鼠PCO模型后囊膜组织中mirna-124的表达情况,测定mirna-124过表达的HLE-B3细胞的细胞周期、细胞迁移及凋亡情况以及细胞内与PI3K/AKT/m TOR信号通路有关的PI3K、AKT、m TOR蛋白表达水平,进而明确mirna-124与PCO的相关性,明确mirna-124对LECs增殖、迁移及凋亡的影响,及其与PI3K/AKT/m TOR信号通路的关系,以期为PCO的药物治疗提供新的靶点。方法:本课题从动物实验及细胞实验两方面进行研究。1.动物实验:将30只大鼠随机分为5组,制作大鼠PCO动物模型,分别于术后0天、3天、7天、14天、28天行术眼眼前节照相,观察晶状体后囊膜的混浊程度,并在上述每个时间节点分别处死6只大鼠,获取其晶状体后囊膜组织,采用Real-time PCR技术检测不同组大鼠后囊膜组织中LECs内mirna-124的表达情况。2.细胞实验:采用人晶状体上皮细胞HLE-B3细胞系构建mirna-124过表达模型,并将细胞分为对照组(NC组)和mirna-124过表达组(OE组)两组,通过Real-time PCR检测OE组HLE-B3细胞中目的基因mirna-124表达情况,分别对OE组及NC组HLE-B3细胞进行流式细胞周期、细胞凋亡检测,Transwell实验来比较两组细胞迁移能力,Western blot检测两组细胞PI3K、AKT、m TOR蛋白的表达情况。结果:1.在大鼠PCO模型中mirna-124表达下调。***组HLE-B3细胞中mirna-124的表达量显著上调(pmirna-124过表达导致G1期细胞比例升高;Transwell实验中,OE组迁移细胞数为(58.3±0.32)个,NC组迁移细胞数为(79.1±2.01)个,提示mirna-124过表达减弱HLE-B3细胞的迁移能力;细胞凋亡实验中,OE组凋亡细胞所占百分比为(3.72±0.13)%,NC组凋亡细胞所占百分比为(0.78±0.13)%,提示mirna-124过表达可促进HLE-B3细胞凋亡;Western blot检测OE组中PI3K/AKT/m TOR信号通路相关蛋白PI3K、AKT、m TOR蛋白表达均低于NC组,表明mirna-124过表达可负向调控PI3K/AKT/m TOR信号通路。结论:在PCO中mirna-124表达下调,mirna-124过表达时可减弱LECs的增殖及迁移,促进LECs的凋亡,从而起到抑制PCO发生的作用,这一过程可能与抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路活化有关。

关键词： mirna-124 后发性白内障晶状体上皮细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路

大鼠脑缺血后mirna-124的表达及与Caspase-3关系的初步研究

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大鼠脑缺血后miRNA-124的表达及与Caspase-3关系的初步研究

作者：龙娟昆明医科大学

学位级别：硕士

目的：本课题采用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)闭塞建立脑缺血损伤模型,研究大鼠脑缺血后mirna-124在脑组织和血液中表达的变化,以及脑组织中mirna-124与凋亡蛋白Caspsae-3的关系,为探讨血液中的mirna-124是否有可能成为早期诊断脑缺血的... 详细信息

目的：本课题采用大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)闭塞建立脑缺血损伤模型,研究大鼠脑缺血后mirna-124在脑组织和血液中表达的变化,以及脑组织中mirna-124与凋亡蛋白Caspsae-3的关系,为探讨血液中的mirna-124是否有可能成为早期诊断脑缺血的生物标记物以及脑组织中的mirna-124与凋亡因子Caspase-3是否存在相关性提供依据。方法：40只成年健康雄性大鼠随机分为假手术组(n=8)、脑缺血3小时组(n=8)、脑缺血6小时组(n=8)、脑缺血12小时组(n=8)、脑缺血24小时组(n=8)。脑缺血组采用线栓法建立MCAO模型,假手术组完成所有手术过程,但插入线栓后立即拔出。采用Zea Longa评分判断模型制备是否成功,采用mNSS评分评价神经功能,取全脑行TTC染色观察缺血后脑组织的形态学变化和确定脑缺血的位置。采用实时荧光定量PCR检测脑组织及血液中mirna-124的表达,采用Western Blot检测脑组织中Caspase-3的表达。采用统计学方法进行数据分析。结果：成功建立15例模型,各组3例。mNSS评分显示：各脑缺血组的mNSS评分均高于假手术组,差异有统计学意义;脑缺血6小时组的mNSS评分高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组的mNSS评分高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组的mNSS评分高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义;随着脑缺血时间的延长,·mNSS评分逐渐增高,差异有统计学意义。TTC染色显示：假手术组未见梗死灶出现,脑缺血组出现明显梗死灶。脑组织中mirna-124的表达情况：假手术组与各脑缺血组mirna-124均有表达;脑缺血3小时组mirna-124的表达量高于假手术组,差异无统计学意义;脑缺血6、12、24小时组mirna-124的表达量均高于假手术组,差异有统计学意义;脑缺血6小时组mirna-124的表达量高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组mirna-124的表达量高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组mirna-124的表达量高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义;mirna-124在脑缺血后6、12、24小时均出现上调,且呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义。血液中mirna-124的表达情况：假手术组与各脑缺血组mirna-124均有表达;脑缺血3、6、12、24小时组mirna-124的表达量均高于假手术组,差异有统计学意义;脑缺血6小时组mirna-124的表达量高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组mirna-124的表达量高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组mirna-124的表达量高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义;mirna-124在脑缺血后3、6、12、24小时均出现上调,且呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义。脑组织中Caspase-3的表达情况：假手术组与各脑缺血组Caspase-3均有表达。脑缺血12小时组Caspase-3的表达量高于假手术组,差异无统计学意义;脑缺血3、6、24小时组Caspase-3的表达量均高于假手术组,差异有统计学意义;脑缺血6小时组Caspase-3的表达量高于脑缺血3小时组,脑缺血12小时组Caspase-3的表达量高于脑缺血6小时组,脑缺血24小时组Caspase-3的表达量高于脑缺血12小时组,差异有统计学意义;Caspase-3在脑缺血后3、6、12、24小时均出现上调,且呈逐渐增高的趋势,差异有统计学意义。脑组织中：mirna-124的表达量与脑组织中Caspase-3的表达量呈显著正相关,差异有统计学意义。结论：1.大鼠脑缺血后脑组织及血液中mirna-124的表达均上调;2.大鼠脑缺血后脑组织中Caspase-3的表达上调;3.血液中的mirna-124可成为早期诊断缺血性脑血管病的生物标记物;4.脑组织中的mirna-124与Caspase-3呈显著正相关,Caspase-3可能受mirna-124的调控,可通过干预mirna-124来抑制神经元的凋亡,进而有效地防治缺血性脑损伤。

关键词：脑缺血 mirna-124 Caspase-3 生物标记物

mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124在神经胶质瘤患者组织中的表达和临床意义

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miRNA-21、miRNA-106、miRNA-27、miRNA-124在神经胶质瘤患者组织...

作者：李楠昆明医科大学

学位级别：硕士

[目的]探讨mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124 在正常人体组织与神经胶质瘤患者组织之间的表达差异,检测mi RNA-21、mi RNA-106、mi RNA-27、mirna-124在不同级别脑胶质瘤患者组织之间表达的差异性,并进行脑胶质瘤的恶性程度与... 详细信息

[目的]探讨mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124 在正常人体组织与神经胶质瘤患者组织之间的表达差异,检测mi RNA-21、mi RNA-106、mi RNA-27、mirna-124在不同级别脑胶质瘤患者组织之间表达的差异性,并进行脑胶质瘤的恶性程度与这四种mirnas的相关性分析,为辅助早期脑胶质瘤临床诊断、分级、预后判断及基因研究治疗寻找可能的靶点。[方法]收集46例术后病理确诊为胶质瘤患者的肿瘤区域新鲜组织标本作为实验组,20例年轻脑外伤患者(既往无肿瘤家族史)术中切除的脑组织作为对照组。实验组按照胶质瘤WHO分级:将病理确诊为Ⅰ级和Ⅱ级患者的组织标本归类为低级别胶质瘤组;将病理确诊为Ⅲ级和Ⅳ级患者的组织标本归类为高级别胶质瘤组。通过分析已公开发表的基因表达芯片数据库,分别检索mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124在人脑胶质瘤患者组织中的表达量,统计分析mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124在实验组与对照组、低级别胶质瘤组和高级别胶质瘤组组织之间的表达水平差异。[结果]1. mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124 在胶质瘤患者组织和正常人脑组织表达水平存在差异。***-21、mirna-106、mirna-27这三种mirnas在胶质瘤患者中的表达量比正常人组织中的表达量相比均有升高,而mirna-124在胶质瘤患者中的表达量比正常人组织中的表达量相比却有所降低。3. mirna-21在高级别、低级别胶质瘤患者组织中的表达量,与mirna-21在正常人组织中的表达相比,有明显的统计学意义(Pmirna-124在高级别胶质瘤组织的表达量与正常人群的表达有一定的统计学差异(P0. 05)。[结论]1. mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124 在胶质瘤患者的组织中均有表达,提示这四者可能参与了胶质瘤的形成。2. mirna-21在高级别、低级别胶质瘤组患者及正常人的脑组织中均有差异性表达,且随着胶质瘤恶性程度的增加表现出升高趋势,提示其可能参与了胶质瘤的形成、发展及恶化过程。3. mirna-124在高级别胶质瘤组组织中表达较低,提示其在高级别胶质瘤形成、发展、恶化过程中可能起着抑癌基因的作用。4.组织中检测的mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124 为早期胶质瘤的辅助无创诊断、分级及预后判断提供了借鉴意义。5.组织中检测的mirna-21、mirna-106、mirna-27、mirna-124 为胶质瘤的基因治疗研究提供了可能的靶点。

关键词： mirna-21 mirna-106 mirna-27 mirna-124 脑胶质瘤

针刺对帕金森病转基因小鼠行为学改变及其纹状体mirna-124表达的影响

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针刺对帕金森病转基因小鼠行为学改变及其纹状体miRNA-124表达的...

作者：刘艳慧南华大学

学位级别：硕士

目的:观察针刺是否影响帕金森病转基因小鼠mirna-124表达水平;探讨针刺是否通过调控mirna-124表达,抑制帕金森病转基因小鼠纹状体α-synuclein蛋白聚集,从而改善帕金森病转基因小鼠症状;探讨针刺是否通过调控mirna-124表达,影响p-CREB、... 详细信息

目的:观察针刺是否影响帕金森病转基因小鼠mirna-124表达水平;探讨针刺是否通过调控mirna-124表达,抑制帕金森病转基因小鼠纹状体α-synuclein蛋白聚集,从而改善帕金森病转基因小鼠症状;探讨针刺是否通过调控mirna-124表达,影响p-CREB、BDNF蛋白表达水平,通过mirna-124/CREB/BDNF信号通路参与帕金森病发病机制。方法:建立转SNCA*A53T基因帕金森病C57BL/6J小鼠模型,分为阴性对照组,模型组,针刺组,拮抗剂组四组,针刺组在模型组的基础上予以针刺处理,拮抗剂组在模型组基础上同时予以针刺及mirna拮抗剂处理。运用电针技术,采用连续波,频率2Hz,强度1m A,持续30分钟,每天一次,治疗2周。针刺穴位选“阳陵泉”、“太冲”二穴。采用悬挂、游泳等方法观察针刺治疗前后不同实验组小鼠行为学改变。采用RT-q PCR技术检测各组小鼠纹状体中mirna-124表达情况。采用Western blot技术检测各组小鼠纹状体中α-synuclein、p-CREB、BDNF蛋白表达情况。结果:(1)悬挂及游泳实验评分:针刺干预前,阴性对照组显著高于模型组、针刺组及拮抗剂组(P﹤0.05),模型组、针刺组及拮抗剂组之间无统计学差异(P>0.05)。针刺干预后,针刺组及拮抗剂组较针刺干预前明显改善(P﹤0.05),针刺组与拮抗剂组相比无统计学差异(P>0.05)。(2)各组小鼠纹状体中mirna-124表达情况:与阴性对照组相比,模型组小鼠纹状体中mirna-124表达量显著下调(P﹤0.05)。与模型组比较,针刺组小鼠纹状体中mirna-124表达增加(P﹤0.05),该表达增加作用可被mirna-124拮抗剂阻断。(3)各组小鼠纹状体中α-synuclein表达情况:与阴性对照组相比,模型组小鼠纹状体中α-synuclein表达明显增加(P﹤0.05);与模型组相比,针刺组及拮抗剂组小鼠纹状体中α-synuclein表达下调(P﹤0.05),但针刺组较拮抗剂组表达下调更显著(P﹤0.05)。(4)各组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF表达情况:与阴性对照组相比,模型组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF均表达下调(P﹤0.05);与模型组相比,针刺组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF表达增加,(P﹤0.05),拮抗剂组小鼠纹状体中p-CREB、BDNF表达无统计学差异。结论:(1)针刺可能通过上调mirna-124表达,减少帕金森病转基因小鼠纹状体中α-synuclein蛋白的聚集,从而改善帕金森病转基因小鼠行为,但其作用机制可能是多重性的。(2)针刺可以上调p-CREB、BDNF蛋白的表达水平,mirna-124/CREB/BDNF信号通路可能参与帕金森病发病机制。

关键词：针刺 mirna-124 CREB 帕金森病

mirna-124靶标功能的生物信息学挖掘

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生命科学研究 2010年第5期14卷 386-392页

作者：魏强李广林郭韬陕西师范大学生命科学学院中国陕西西安710062

以mirna-124为例,将mirna的靶标预测信息与芯片数据分析中下调的基因信息整合起来,从而筛选出mirna-124的候选靶标,然后对这些靶标的功能进行了深入分析.研究结果表明mirna-124的靶标可分为两类:直接靶标和间接靶标,间接靶标是通过直接... 详细信息

以mirna-124为例,将mirna的靶标预测信息与芯片数据分析中下调的基因信息整合起来,从而筛选出mirna-124的候选靶标,然后对这些靶标的功能进行了深入分析.研究结果表明mirna-124的靶标可分为两类:直接靶标和间接靶标,间接靶标是通过直接靶标的调控起作用的.mirna-124靶标的功能主要是蛋白结合作用.mirna-124靶标的筛选和功能挖掘,为科学工作者选择和验证其它mirnas靶标的功能打下了坚实的基础,同时此方法可以推广到其它mirnas的功能研究中.

关键词： mirna-124 靶标生物信息学芯片分析

基于mirna-124探讨益脾养肝方对大鼠肝癌前病变影响的实验研究

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陕西中医药大学学报 2020年第5期43卷 60-65页

作者：魏海梁曹妮李京涛闫曙光司明明鞠迪陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000 陕西中医药大学陕西咸阳712046

目的探讨益脾养肝方对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌前病变模型,以益脾养肝方(YPYGF)组方干预后各组大鼠不同肝细胞形态变化,以及对肝细胞中mirna-124变化的影响。方法以DEN诱导180只Wistar大鼠肝癌前病变模型,成... 详细信息

目的探讨益脾养肝方对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)诱导大鼠肝癌前病变模型,以益脾养肝方(YPYGF)组方干预后各组大鼠不同肝细胞形态变化,以及对肝细胞中mirna-124变化的影响。方法以DEN诱导180只Wistar大鼠肝癌前病变模型,成模后随机分为6组各30只(空白组、DEN组、护肝片组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),给予不同干预后,通过HE染色观察各组肝细胞形态变化,并采用免疫荧光染色法及qRT-PCR法检测肝细胞中mirna-124表达水平变化,以研究益脾养肝方对大鼠模型肝癌前病变的影响。结果与DEN组比较,益脾养肝方干预下肝癌前病变大鼠肝组织内mirna-124表达水平显著升高,肝癌前病变组织及细胞凋亡改善显著,各组间比较,YPYGF高剂量组作用最明显。结论益脾养肝方能够有效修复受损的肝细胞,改善肝脏功能,延缓肝癌前病变进展,其治疗机制可能与改善肝细胞中抑癌因子mirna-124的表达,进而抑制肝细胞凋亡的作用相关。

关键词：益脾养肝方肝癌前病变 mirna-124

外泌体mirna-124在颅脑创伤过程中表达及意义的研究进展

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中西医结合心脑血管病杂志 2022年第18期20卷 3357-3362页

作者：王策黄忻涛闫青云徐新娟汪易杨亚军山西医科大学第一临床医学院太原030001 山西医科大学第一医院太原030001

颅脑创伤仍是目前致死率和致残率居全身创伤首位的疾病,颅脑创伤后的炎症反应、氧化应激以及轴突的损伤修复等过程至关重要。然而,对于颅脑创伤病人的诊断、治疗及其预后的预测等仍缺乏有效的手段。外泌体mirna已被阐明具有调节各种生... 详细信息

颅脑创伤仍是目前致死率和致残率居全身创伤首位的疾病,颅脑创伤后的炎症反应、氧化应激以及轴突的损伤修复等过程至关重要。然而,对于颅脑创伤病人的诊断、治疗及其预后的预测等仍缺乏有效的手段。外泌体mirna已被阐明具有调节各种生物功能的机制,其中mirna-124是中枢神经系统含量最丰富的mirna,与上述过程联系紧密,有望协助早期诊断颅脑创伤,并为其提供治疗靶点、预测预后等。对国内外关于mirna-124在颅脑创伤过程中的表达及其意义的研究进展进行综述,从而更准确地为其作为生物标志物和未来治疗靶点,进一步理解颅脑损伤的发生、发展提供全新的视角。

关键词：颅脑创伤神经损伤修复 mirna-124 外泌体炎症综述