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姜黄素调控脓毒症及肺纤维化的机制研究

姜黄素调控脓毒症及肺纤维化的机制研究

作者：马菲雅南京大学

学位级别：硕士

姜黄素(Curcumin,Cur)是从多年生姜科植物姜黄Curcuma longaL.中提取的一种酚类化合物。其化学名称为:1,7-双(4-羟基-3-甲氧基苯)-1,6庚二烯-3,5-二酮。炎症反应是许多慢性疾病发病的重要机制,例如神经退行性疾病、代谢性疾病、心血管... 详细信息

姜黄素(Curcumin,Cur)是从多年生姜科植物姜黄Curcuma longaL.中提取的一种酚类化合物。其化学名称为:1,7-双(4-羟基-3-甲氧基苯)-1,6庚二烯-3,5-二酮。炎症反应是许多慢性疾病发病的重要机制,例如神经退行性疾病、代谢性疾病、心血管疾病、肺部疾病、癌症。目前已经发现姜黄素可以缓解众多炎症类相关的疾病如肺部疾病以及神经退行性疾病等,同时姜黄素能够抑制炎性细胞促炎性细胞因子IL-lβ,TNF-α,NO和IL-6等的产生。然而对于姜黄素抑制炎症的具体机制还需更深入的探索。microRNAs(mirNAs)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的单链非编码微小RNA,通过与其靶基因mRNA的3'端非翻译区结合,在转录后水平调节基因的表达,从而参与和调控多种生物过程。mirNAs的差异性表达或遗传改变都会影响其对靶基因的表达调控,涉及到许多疾病包括炎症性疾病的发病机制。其中mir-155作为热点分子,在调节炎症相关疾病中起关键作用。众多研究结果报道了姜黄素通过调节mirNAs阻止肿瘤细胞生长,而关于姜黄素是否通过mirNAs途径调节炎症以及其具体的调节机制少有报道。本课题我们研究了姜黄素对LPS和BLM诱导的炎性反应的抑制作用及其机制。1、发现姜黄素可以通过调节mir-155抑制LPS诱导的炎症反应;研究首先通过用革兰氏阴性菌产物Lipopolysaccharide(LPS)分别刺激鼠源巨噬细胞RAW264.7以及人源的THP-1巨噬细胞,用实时荧光定量PCR(Q-PCR)实验方法发现在LPS刺激后的细胞中mir-155水平较正常细胞水平高出7倍。随后用不同浓度姜黄素干预这一过程发现其可以抑制LPS诱导的mir-155的产生。进一步研究发现PI3K/AKT通路在姜黄素抑制炎症反应中起到关键作用。姜黄素通过PI3K-AKT通路抑制mir-155的表达和炎症因子TNF-α和IL-6的分泌水平。在LPS诱导的脓毒症小鼠模型中,姜黄素治疗可以缓解脓毒症的症状并下调mir-155的表达水平。上述实验结果证实了姜黄素可以通过调节mir-155抑制LPS诱导的炎症反应。2、发现姜黄素可以通过调控midkine抑制肺间质性纤维化肺间质性纤维化同样是炎症导致的一类疾病,由于炎症引起的各种细胞因子的分泌失调,使机体生理性愈合转变为病理性纤维化。本课题利用Bleomycin(BLM)构建了小鼠肺纤维化模型并探讨了姜黄素通过抑制炎症改善肺间质纤维化的作用。研究发现姜黄素可以缓解BLM诱导的纤维化小鼠发病症状。进一步研究发现,姜黄素可以抑制BLM诱导的midkine(MK)表达水平的上调。综上所述,本课题证实了姜黄素可以通过调控mir-155抑制LPS诱导的炎症反应,缓解LPS诱导的脓毒症;姜黄素可以通过调节midkine抑制BLM诱导的炎症,改善肺间质性纤维化。

关键词：姜黄素 mir-155 LPS BLM midkine 肺纤维化

通过microRNA-155下调SOCS-1在结直肠癌的表达促进其转移和侵袭

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通过microRNA-155下调SOCS-1在结直肠癌的表达促进其转移和侵袭

作者：肖华旭川北医学院

学位级别：硕士

目的:结直肠癌(CRC)具有生物学行为的复杂多变、容易复发转移以及对化疗药物抵抗等特点,导致病人的生存期缩短。因此,尽可能阐明结直肠癌发生进展的机制,寻找早期、有效的诊断方法以及制定合理的治疗策略一直是结直肠癌实验研究领域的... 详细信息

目的:结直肠癌(CRC)具有生物学行为的复杂多变、容易复发转移以及对化疗药物抵抗等特点,导致病人的生存期缩短。因此,尽可能阐明结直肠癌发生进展的机制,寻找早期、有效的诊断方法以及制定合理的治疗策略一直是结直肠癌实验研究领域的重点。微小RNA(micro RNAs,mi RNAs)是一种在多种真核生物总表达,大小约为18-25个核苷酸的非编码的小分子RNA。目前研究认为mi RNAs可以参与细胞发育、增殖、分化和凋亡等。已知人类基因组中确认的mi RNA大约有500个,其中约有200多种mi RNA序列与癌症发生有关。micro RNA-155(mi R-155)定位于人类的染色体21q21,是由B细胞整合簇基因第3个外显子高度保守的区域编码。mi R-155是mi RNAs众多中的一个,许多研究者探索mi R-155与肿瘤的发生、发展之间的关系,因为它可能会成为肿瘤早期发现、早治疗的新途径。因此,此次实验是为了验证mi R-155在结直肠癌发生发展中的作用机制。方法:收集川北医学院附属医院胃肠外科术前未经任何治疗的结直肠癌标本76例及正常的直肠粘膜组织,应用细胞培养、实时定量反向酶-PCR(q RT-PCR)、mi RNA的转染、MTT分析法、迁移和侵袭试验和Western blot分析法,分析mi R-155在直肠癌的发生、发展中的作用及相关的临床病理间的关系。结果:*** R-155在结直肠癌细胞中的表达水平比正常组织要高,两者之间差异有统计学意义(P155的高表达与TNM分期,淋巴结及远处转移明显相关(P155能够调节CRC细胞迁移和侵袭,但没有增殖的作用。*** R-155的高表达能够使细胞与细胞之间的粘附和形态学发生了改变,从而有利于细胞迁移。*** R-155能够调节降低socs-1在结直肠癌细胞的表达。结论:mi R-155的高表达在CRC的迁移和侵袭中起着重要作用。mi R-155的高表达够使细胞与细胞之间的粘附和形态学发生了改变。mi R-155可能通过socs-1/ZEB-1/E-cadherin的轴对结直肠癌细胞的调控有关。这可能是结直肠癌转移和侵袭相关机制的重要线索。

关键词：结直肠癌 mir-155 E-cadherin ZEB-1 SOCS-1 转移和侵袭

microRNA-155在脑卒中发病机制中的研究进展

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广东医学 2018年第10期39卷 1431-1434页

作者：彭尧群李友钟望涛广东医科大学研究生学院广东湛江524000 广东医科大学附属医院神经病学研究所广东湛江524000 广东医科大学附属医院神经内科一区广东湛江524000

脑卒中是世界上发病率、死亡率和致残率最高的疾病之一。microRNAs是一类小分子非编码RNA,它在转录后水平调节靶基因的表达。mir-155在血管免疫炎症、血脑屏障、高血压及动脉粥样硬化等方面有重要的调控作用,这也是脑卒中发病的病理生... 详细信息

脑卒中是世界上发病率、死亡率和致残率最高的疾病之一。microRNAs是一类小分子非编码RNA,它在转录后水平调节靶基因的表达。mir-155在血管免疫炎症、血脑屏障、高血压及动脉粥样硬化等方面有重要的调控作用,这也是脑卒中发病的病理生理基础,而且mir-155在缺血性脑卒中小鼠模型中的表达水平也有着显著的变化。本文将总结探讨mir-155在脑卒中发病机制方面的研究及其作用,探究其可能作为缺血性脑卒中潜在的分子标记及治疗靶标。

关键词： mir-155 脑卒中免疫炎症动脉粥样硬化高血压

循环mirNAs评估颈动脉粥样硬化斑块稳定性的临床意义

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浙江医学 2019年第11期41卷 1124-1127页

作者：程兴潘小玲杨雯胡传琛陆海鹏王建伟应鸣翘傅亚明邵慧军陈红芳浙江大学金华医院神经内科

目的探讨mir-21、mir-126、mir-155、mir-221、mir-222评估颈动脉粥样硬化斑块稳定性及筛查颈动脉粥样硬化相关脑卒中高危人群的临床价值。方法选择颈动脉不稳定斑块伴脑梗死患者35例、颈动脉不稳定斑块患者41例、颈动脉稳定斑块患者28... 详细信息

目的探讨mir-21、mir-126、mir-155、mir-221、mir-222评估颈动脉粥样硬化斑块稳定性及筛查颈动脉粥样硬化相关脑卒中高危人群的临床价值。方法选择颈动脉不稳定斑块伴脑梗死患者35例、颈动脉不稳定斑块患者41例、颈动脉稳定斑块患者28例,另选择30例同期健康体检者作为健康对照组。采用实时定量荧光PCR(RT-qPCR)法检测mirNAs的表达水平并作比较。结果脑梗死组、不稳定斑块组、稳定斑块组的mir-21、mir-155、mir-221、mir-222表达水平均较健康对照组升高,不稳定斑块组mir-126的表达水平较稳定斑块组明显降低,脑梗死组的mir-126表达水平较不稳定斑块组也降低,差异均有统计学意义(均Pmir-126表达水平与LDL-C、TC水平呈明显负相关。结论mir-21、mir-126、mir-155,mir-221、mir-222可能与斑块的增长、不稳定、破裂演变过程密切相关,有望作为评估颈动脉粥样硬化斑块稳定性及筛查颈动脉粥样硬化相关脑卒中高危人群的生物标志物。

关键词： mir-21 mir-126 mir-155 mir-221 mir-222

circSLCO1B3在三阴乳腺癌脑转移中的作用及其调控机制

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老年医学研究 2023年第5期4卷 31-37页

作者：张颖宋彩露刘凌蕊唐海林赖洁兰中山大学肿瘤防治中心广东广州510060

目的探讨circSLCO1B3在三阴乳腺癌(TNBC)脑转移中的作用及其可能的调控机制。方法采用qRT-PCR实验检测circSLCO1B3在乳腺癌细胞系中的表达。采用过表达质粒上调TNBC子代脑转移细胞231Br中circSLCO1B3的表达,设为circSLCOB3-OE组(转染对... 详细信息

目的探讨circSLCO1B3在三阴乳腺癌(TNBC)脑转移中的作用及其可能的调控机制。方法采用qRT-PCR实验检测circSLCO1B3在乳腺癌细胞系中的表达。采用过表达质粒上调TNBC子代脑转移细胞231Br中circSLCO1B3的表达,设为circSLCOB3-OE组(转染对照质粒的为circCTR-OE组),采用Transwell侵袭实验检测circSLCO1B3对231Br细胞侵袭能力的影响。经小鼠左心室注射231Br细胞,构建体内脑转移模型,检测circSLCO1B3对TNBC脑转移能力的影响。通过CircInteractome及TargetScan在线软件分别预测与circSLCO1B3结合的mirNA及mirNA下游靶基因,并使用双荧光素酶报告基因和qRT-PCR、Western blotting实验验证其调控关系。结果相对正常乳腺上皮细胞,circSLCO1B3在TNBC细胞系中均显著下调,且在TNBC子代脑转移细胞231Br中下调最为显著(Pmir-NC共转染组相比,野生型circSLCO1B3+mir-155组的相对荧光酶活性显著降低(Pmir-155的相对表达量显著降低(Pmir-NC共转染组相比,野生型PTEN+mir-155组的相对荧光酶活性显著降低(Pmir-NC相比,转染mir-155细胞PTEN mRNA的相对表达量显著降低(Pmir-155组PTEN的表达则显著降低(P均mir-155,上调PTEN蛋白的表达,进而抑制TNBC脑转移。

关键词：三阴乳腺癌脑转移 circSLCO1B3 mir-155 PTEN

microRNA155在动脉粥样硬化发生过程中的网络调控机制

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生物资源 2021年第2期43卷 178-187页

作者：刘田利杜芬武汉大学基础医学院湖北武汉430071

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性进行性的血管炎症性疾病,其发病机制主要包括内皮细胞损伤,脂质浸润及炎症介质分泌等。microRNA155(mir-155)是参与AS炎性调控、免疫和自噬信号等通路的微小非编码RNA。系统性研究mir-155及... 详细信息

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是一种慢性进行性的血管炎症性疾病,其发病机制主要包括内皮细胞损伤,脂质浸润及炎症介质分泌等。microRNA155(mir-155)是参与AS炎性调控、免疫和自噬信号等通路的微小非编码RNA。系统性研究mir-155及其靶基因的网络调控机制,能全面理解mir-155在AS中的作用,促进其在临床诊断中的应用开发。利用mirNA靶基因预测数据库mirDB、mirmap和Starbase获取mir-155的靶基因集。R语言分析基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)共享平台动脉粥样硬化斑块差异表达基因(GSE24702),筛选出18076个差异表达基因。利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)分析,观察这些差异表达基因共同富集在IL6-JAK-STAT3信号通路、炎症反应和TNFα等炎症信号通路。与mir-155靶基因交叉匹配得到371个交集mRNA,其中159个在动脉粥样硬化斑块中上调,212个在动脉粥样硬化斑块中下调。基因本体(gene ontology,GO)及基因组数据库(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析研究基因功能,GO富集分析371个差异基因主要富集炎症和凋亡信号通路的负调控等功能,KEGG分析371个差异基因主要富集TGFβ等炎症信号通路。蛋白相互作用网络(protein-protein interaction networks,PPI)分析获得关键节点基因是ARRB2、FBXO11、SOCS1、FBXO22、FBXO30、KRAS、RNF19A、TRIM32、HERC4、PJA1、RCHY1和DET1。本研究表明,mir-155主要通过调控炎症反应等相关信号通路影响斑块细胞炎症、自噬及凋亡等功能,进而影响动脉粥样硬化的各个进程。

关键词：动脉粥样硬化生物信息学分析 mir-155 网络调控炎症

mirNA-155的免疫调控功能及其在水产动物中的研究进展

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生物学杂志 2017年第5期34卷 83-88页

作者：谭旭恺姚亚李玉琴付京花唐雪莲徐民俊华南农业大学海洋学院广州510642

microRNA(mirNA)是一类具有调控功能的非编码RNA,通常靶向mRNA的3'非编码区(3'-UTR),形成诱导沉默复合体而发挥调节靶基因的作用。mir-155的功能与免疫调控密切相关,其对免疫细胞包括树突状细胞、巨噬细胞、B细胞与T细胞的分化及功能均... 详细信息

microRNA(mirNA)是一类具有调控功能的非编码RNA,通常靶向mRNA的3'非编码区(3'-UTR),形成诱导沉默复合体而发挥调节靶基因的作用。mir-155的功能与免疫调控密切相关,其对免疫细胞包括树突状细胞、巨噬细胞、B细胞与T细胞的分化及功能均有着不可替代的调控作用。在mirBase中收录的mir-155物种有25种,从腔肠动物到人类等高等动物都有分布,其中水产动物就有6种,包括大西洋鲑、斑马鱼、斑点叉尾鮰、大宗鲇、锦鲤等。就mir-155免疫调控功能、靶基因研究及其在水产领域的研究进展进行综述,以期为mir-155功能研究提供参考。

关键词：靶基因 mir-155 免疫调控水产动物

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模拟失重对小鼠胸腺调节性T细胞的影响

模拟失重对小鼠胸腺调节性T细胞的影响

MDS患者血浆中3种mirNA表达水平及临床意义

第九届全国免疫学学术大会

作者：宋锦苹李英贤姜丽君李玉恒中国航天员科研训练中心航天医学基础与应用国家重点实验室

研究背景:航天飞行后机体免疫功能发生明显改变,尤其以细胞免疫功能为主,包括T淋巴细胞分布异常,Th2向漂移,但其发生的细胞和分子机理尚未明了。调节性T细胞在保持免疫耐受和维持T淋巴细胞平衡中起重要作用,它是否参与了航天飞行中免疫... 详细信息

研究背景:航天飞行后机体免疫功能发生明显改变,尤其以细胞免疫功能为主,包括T淋巴细胞分布异常,Th2向漂移,但其发生的细胞和分子机理尚未明了。调节性T细胞在保持免疫耐受和维持T淋巴细胞平衡中起重要作用,它是否参与了航天飞行中免疫功能的调节值得探究。目的:通过研究模拟失重下调节性T细胞的变化及其机制,寻找对抗失重免疫效应的分子靶点。方法:C57BL小鼠尾吊模拟失重28天,取胸腺,RT-PCR测定调节性T细胞的主要转录因子Foxp3、功能细胞因子TGF-β、mir-155的变化。结果:模拟失重后,小鼠主要转录因子Foxp3、重要功能细胞因子TGF-β表达均明显下降,同时对调节性T细胞分化起重要作用的mir-155的表达也发生了下调。结论:模拟失重可导致小鼠调节性T细胞分化和功能降低,其变化可能受mir-155调控,这种变化可能在航天飞行中免疫功能失调中起重要作用,有待于进一步的研究。

关键词：模拟失重调节性T细胞 mir-155

来源： cnki会议评论

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临床血液学杂志 2021年第8期34卷 552-555,560页

作者：王玉李超满其航北京航天总医院血液科北京100076

目的:探究骨髓增生异常综合征(MDS)患者血浆mi-21、mir-155、mir-210表达水平及其临床意义。方法:选择2016年6月—2020年6月收治83例MDS患者作为研究组,同一时间体检40例健康者作为对照组,均测定血浆mir-21、mir-155、mir-210表达水平,... 详细信息

目的:探究骨髓增生异常综合征(MDS)患者血浆mi-21、mir-155、mir-210表达水平及其临床意义。方法:选择2016年6月—2020年6月收治83例MDS患者作为研究组,同一时间体检40例健康者作为对照组,均测定血浆mir-21、mir-155、mir-210表达水平,分析2组3种mirNA差异及临床意义。研究组按照WTO分型、国际预后积分系统(IPSS)评分进行分组,比较不同WTO分型、IPSS评分患者血浆mirNA水平,分析3种血浆mirNA表达水平与WTO分型、IPSS评分之间相关性。结果:研究组患者血浆mir-21、mir-155、mir-210表达水平均显著高于对照组(Pmir-21、mir-155、mir-210用于诊断MDS患者病情AUC值分别为0.989、0.887、0.950;难治性贫血伴原始细胞增多型患者血浆mir-21、mir-155、mir-210表达水平显著高于难治性贫血型与难治性血细胞减少伴多系发育异常型(Pmir-21、mir-155、mir-210表达水平与WTO分型呈正相关(r=0.406、519、0.487;Pmir-21、mir-155、mir-210表达水平显著高于低危组与中危组(PmirNA表达水平显著高于低危组(Pmir-21、mir-155、mir-210表达水平与IPSS评分呈正相关(r=0.612、0.814、0.553;Pmir-21、mir-155以及mir-210表达水平可用于预测MDS发生,对于评估患者病情进展意义重大,可以为患者及时治疗提供临床依据。

关键词：骨髓增生异常综合征 mir-21 mir-155 mir-210