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早期宫颈癌患者血清mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达及对术后复发的预测效能

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南昌大学学报（医学版） 2024年第3期64卷 66-71页

作者：孙静黄佳琛张华汉中市人民医院病理科陕西汉中723000

目的探讨mir-193a-3p、mir-146b-5p在早期宫颈癌(ECC)血清中的表达量及其对术后复发的预测价值。方法选取汉中市人民医院门诊收治的ECC患者(研究组)82例,另选取同期本院体检的健康女性(对照组)74例,比较2组血清mir-193a-3p、mir-146b... 详细信息

目的探讨mir-193a-3p、mir-146b-5p在早期宫颈癌(ECC)血清中的表达量及其对术后复发的预测价值。方法选取汉中市人民医院门诊收治的ECC患者(研究组)82例,另选取同期本院体检的健康女性(对照组)74例,比较2组血清mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达量。根据是否复发将研究组分为复发亚组(n=23)和未复发亚组(n=59),单因素分析比较2亚组的临床资料和实验室指标;Logistic多因素回归分析影响术后复发的因素;ROC分析血清mir-193a-3p、mir-146b-5p表达量预测术后复发的价值。结果研究组血清mir-193a-3p、mir-146b-5p表达量均低于对照组(p5)。复发亚组高危型HpV阳性率、FIGO分期、宫颈浸润深度、淋巴结转移及鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平均高于未复发亚组(p5),而血清mir-193a-3p和mir-146b-5p的表达量均低于未复发亚组(p5);血清mir-193a-3p和mir-146b-5p的低表达、高危型HpV阳性、SCC-Ag均是影响术后复发的独立危险因素(p5);血清mir-193a-3p、mir-146b-5p表达量预测术后复发的最佳截断值分别为0.57和2.12,二者联合预测的灵敏度、特异度和AUC分别为82.61%,96.61%和0.932。结论血清mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达在ECC患者呈低表达;二者均可作为预测ECC术后复发的敏感指标,且联合预测价值更高。

关键词：宫颈癌 mir-193a-3p mir-146b-5p 复发预测血清

复发性流产患者绒毛组织mir-146a-5p、mir-146b-5p表达与血管新生因子及微血管密度的关系研究

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现代生物医学进展 2024年第15期24卷 2907-2910页

作者：蒋莎徐如意冯文图康旻陈慧陈映婷珠海市中西医结合医院(南方医科大学附属珠海医院)妇科广东珠海519000 中山大学孙逸仙纪念医院生殖中心广东广州510275

目的:探讨不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织微小核糖核酸(mir)-146a-5p、mir-146b-5p表达与血管新生因子及微血管密度(MVD)的关系。方法:选取2020年1月-2023年12月我院收治的119例URSA患者纳入URSA组,同期选取90例正常早孕并自愿... 详细信息

目的:探讨不明原因复发性流产(URSA)患者绒毛组织微小核糖核酸(mir)-146a-5p、mir-146b-5p表达与血管新生因子及微血管密度(MVD)的关系。方法:选取2020年1月-2023年12月我院收治的119例URSA患者纳入URSA组,同期选取90例正常早孕并自愿终止妊娠的妇女纳入对照组。比较两组绒毛组织mir-146a-5p、mir-146b-5p、血管新生因子[缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)]、MVD表达。pearson检验分析绒毛组织mir-146a-5p、mir-146b-5p表达与HIF-1α、VEGF表达及MVD的相关性。结果:相比于对照组,URSA组绒毛组织mir-146a-5p表达水平降低(p5),mir-146b-5p表达水平升高(p5);相比于对照组,URSA组绒毛MVD降低(p5);相比于对照组,URSA组绒毛组织HIF-1α、VEGF表达水平降低(p5);pearson检验显示,URSA患者绒毛组织mir-146a-5p表达与HIF-1α、VEGF、MVD呈正相关(p5),mir-146b-5p表达与HIF-1α、VEGF、MVD呈负相关(p5)。结论:URSA患者绒毛组织mir-146a-5p低表达、mir-146b-5p高表达与血管新生因子HIF-1α、VEGF表达下调及MVD降低有关。

关键词：复发性流产绒毛组织 mir-146a-5p mir-146b-5p 血管新生因子微血管密度

弥漫性大b细胞淋巴瘤组织中mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达量及临床意义探究

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当代医药论丛 2024年第2期22卷 30-32页

作者：贾光明钟祥市中医院湖北钟祥431900

目的:探讨分析弥漫性大b细胞淋巴瘤(DLbCL)组织中mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLbCL患者76例(纳入DLbCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量pCR法检测所有患者淋巴组织中mir-193... 详细信息

目的:探讨分析弥漫性大b细胞淋巴瘤(DLbCL)组织中mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达量及临床意义。方法:选取DLbCL患者76例(纳入DLbCL组)及淋巴结反应性增生(RHL)患者70例(纳入RHL组),采用实时荧光定量pCR法检测所有患者淋巴组织中mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达水平,并分析二者的表达水平与DLbCL临床特征的关系。结果:mir-193a-3p及mir-146b-5p在DLbCL组中的表达水平均低于RHL组(p5),二者的表达水平与Ann-Arbo分期、国际预后指数(IpI)评分有关。mir-193a-3p、mir-146b-5p的表达水平与DLbCL的临床分期呈负相关,随着mir-193a-3p、mir-146b-5p表达水平的降低,DLbCL临床分期越高(p5)。淋巴组织中mir-193a-3p、mir-146b-5p表达下调是DLbCL临床高分期的危险因子(OR>1,p5)。结论:DLbCL组织中mir-193a-3p、mir-146b-5p表达水平下调,可能参与了DLbCL的发生、发展,二者的表达水平与DLbCL的临床分期有关,可作为DLbCL临床诊治的重要参考依据。

关键词：弥漫性大b细胞淋巴瘤 mir-193a-3p mir-146b-5p 抑癌基因

mir-146b-5p靶向E3泛素蛋白连接酶促进高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化

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安徽医科大学学报 2023年第7期58卷 1087-1093页

作者：吴锦李嘉嘉王笑薇王娟泌尿生殖系统疾病安徽省重点实验室合肥230022 安徽医科大学第一附属医院科研实验中心合肥230022

目的探讨mir-146b-5p与E3泛素蛋白连接酶(ZNRF3)对高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化(EMT)进程的影响及作用机制。方法正常培养的小鼠为对照组,采用4.25%葡萄糖透析液和0.1 mg/kg的脂多糖诱导腹膜纤维化小鼠模型,收集小鼠腹膜组织... 详细信息

目的探讨mir-146b-5p与E3泛素蛋白连接酶(ZNRF3)对高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞上皮间质转化(EMT)进程的影响及作用机制。方法正常培养的小鼠为对照组,采用4.25%葡萄糖透析液和0.1 mg/kg的脂多糖诱导腹膜纤维化小鼠模型,收集小鼠腹膜组织,Masson染色观察腹膜组织胶原纤维变化,免疫组化法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原(COL I)表达。Western blot检测腹膜组织上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、α-SMA和COL I表达。qRT-pCR检测腹膜组织中mir-146b-5p和ZNRF3表达。双荧光素酶报告基因检测验证mir-146b-5p和ZNRF3靶向关系。分离对照组小鼠腹膜间皮细胞,高糖诱导构建小鼠腹膜间皮细胞纤维化模型,将细胞分为对照组、模型组、mimic-NC组、mir-146b-5p-mimic组和mir-146b-5p-inhibitor组。Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力。Western blot检测EMT相关蛋白表达。结果与对照组小鼠比较,模型组小鼠腹膜组织增厚,胶原纤维增多,α-SMA和COL I表达增加(p5),mir-146b-5p表达升高(p5),E-cadherin和ZNRF3表达降低(p5)。mir-146b-5p靶向负调控ZNRF3表达。细胞水平检测结果显示,与对照组比较,模型组和mimic-NC组小鼠腹膜间皮细胞迁移和侵袭细胞数增多(p5),E-cadherin表达降低(p5),波形蛋白(Vimentin)和N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达升高(p5)。与模型组比较,mir-146b-5p-mimic组小鼠腹膜间皮细胞变化趋势更为显著,mir-146b-5p-inhibitor组细胞EMT进程受到抑制。结论mir-146b-5p可靶向ZNRF3基因促进高糖诱导的小鼠腹膜间皮细胞EMT进程。

关键词： mir-146b-5p E3泛素蛋白连接酶腹膜透析上皮间质转化侵袭迁移

mir-146b-5p结合RpS14蛋白促进鸭坦布苏病毒增殖的初步研究

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miR-146b-5p结合RPS14蛋白促进鸭坦布苏病毒增殖的初步研究

作者：雷林四川农业大学

学位级别：硕士

microRNA(mirNA)是一种非编码小RNA分子。在病毒感染中,mirNA能通过调节基因转录来调控病毒的增殖。鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu Virus,DTMUV)是黄病毒科黄病毒属单链正股RNA病毒,主要感染禽类。mirNA在其它黄病毒感染中生物学功能已有... 详细信息

microRNA(mirNA)是一种非编码小RNA分子。在病毒感染中,mirNA能通过调节基因转录来调控病毒的增殖。鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu Virus,DTMUV)是黄病毒科黄病毒属单链正股RNA病毒,主要感染禽类。mirNA在其它黄病毒感染中生物学功能已有许多报道,但在DTMUV感染鸭胚成纤维细胞(Duck embryo fibroblast,DEF)中相关报道较少。研究DTMUV与宿主mirNA的相互作用,对阐释DTMUV感染宿主机制提供重要理论依据。实验室前期预示试验表明,DTMUV感染DEF细胞引起mir-146b-5p大量表达,而关于mir-146b-5p有何功能?尚无相关报道。为此开展相关研究,结果报道如下。***-146b-5p 促进 DTMUV 的增殖DTMUV感染DEF细胞12h、24h、36h、48h后发现:细胞内mir-146b-5p表达出现时间依赖性上升趋势。qRT-pCR和western blot和病毒滴度分析显示:将mir-146b-5p模拟物(mimic)转染到DEF细胞后,细胞上清液中病毒滴度显著升高(p＜0.01),DTMUV拷贝数显著增多(p＜0.001),DTMUV E蛋白表达增加。但在转染mir-146b-5p抑制剂(inhibitor)后,均出现显著降低。结果均表明mir-146b-5p可以促进DTMUV增殖。***-146b-5p结合宿主RpS14蛋白RNA pull-down实验沉淀mir-146b-5p结合蛋白复合物并对其进行质谱定性分析。检测到130段多肽以及40个已知蛋白质,其中mir-146b-5p的特异性结合蛋白17个。根据蛋白质匹配分数,检测感染DTMUV后RpS14、Hsp70A8、SRpRb等蛋白mRNA表达变化,结果表明只有RpS14mRNA表达呈现先上升后下降规律性变化,表达水平在36h最高。扩增RpS14核酸序列并以真核表达质粒pCAGGS为载体构建pCAGGS-RpS14 重组质粒。将 pCAGGS-RpS14 质粒转染 DEF 细胞,western blot 验证 mir-146b-5p能与RpS14结合。***14降低DTMUV的拷贝数和E蛋白表达设计并合成shRNA干扰RpS14表达。检测RpS14对DTMUV复制的影响,结果显示:转染pCAGGS-RpS14重组质粒过表达RpS14后,病毒拷贝数和病毒E蛋白表达量显著减少(ppS14表达后,病毒拷贝数和病毒E蛋白表达量显著增多(ppS14可以降低DTMUV的复制,敲低RpS14可以促进DTMUV的复制。***-146b-5p通过结合抑制RpS14促进DTMUV增殖检测mir-146b-5p对RpS14 mRNA和蛋白表达的作用,发现过表达mir-146b-5p使RpS14 mRNA水平和蛋白表达量显著降低(p5);抑制mir-146b-5p表达使RpS14 mRNA水平和蛋白表达量显著升高(p5)。这提示mir-146b-5p能抑制RpS14表达。pCAGGS-RpS14重组质粒与mir-146b-5p共同转染入DEF细胞并接毒后,检测病毒拷贝数和病毒E蛋白表达。结果显示共转pCAGGS-RpS14和mir-146b-5p mimic后病毒拷贝数和E蛋白表达显著增多(ppS14 shRNA和mir-146b-5p mimic共同转染到DEF细胞并接毒,检测病毒拷贝数和病毒E蛋白表达。结果表明共转4shRNA和mir-146b-5p mimic后病毒拷贝数和蛋白表达无显著差异(p>0.05)。综上,本试验发现mir-146b-5p可以通过结合抑制RpS14促进DTMUV增殖。

关键词： mir-146b-5p RpS14 DTMUV mirNA

肾原位抑制mir-146b-5p表达改善UUO小鼠肾纤维化

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中国实验动物学报 2022年第7期30卷 927-934页

作者：谢柯欢郭怀英韩壤乐王丽中西医结合研究中心西南医科大学附属中医医院四川泸州646000

目的明确mir-146b-5p在小鼠肾纤维化模型中的表达情况,并探讨体内敲低mir-146b-5p对小鼠肾损伤及纤维化的影响。方法将24只8周龄C57bL/6雄性小鼠随机分为假手术组(sham),UUO模型组(UUO),UUO+肾mir-146b-5p电转敲低组(UUO-KD),每组8只。S... 详细信息

目的明确mir-146b-5p在小鼠肾纤维化模型中的表达情况,并探讨体内敲低mir-146b-5p对小鼠肾损伤及纤维化的影响。方法将24只8周龄C57bL/6雄性小鼠随机分为假手术组(sham),UUO模型组(UUO),UUO+肾mir-146b-5p电转敲低组(UUO-KD),每组8只。Sham组仅切开皮肤,暴露且游离右侧肾输尿管,不做结扎或离断处理。UUO组,行单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型。UUO-KD组通过先电转CRISpR/RfxCas13 d质粒于小鼠肾进行特异性mir-146b-5p敲低,24 h后按模型组方法建立UUO小鼠模型,7 d后处死小鼠收集肾标本。HE染色观察肾病理变化,Masson检测肾间质纤维化程度,免疫组化检测纤维化相关蛋白(α-SMA、FN、Col-1)表达,Western blot、Real-time pCR检测mir-146b-5p、α-SMA、FN、IL-1β、IL-6、TNF-α等基因的变化。结果mir-146b-5p在UUO模型中显著升高,电转敲低mir-146b-5p后该基因显著下降(p5),同时,IL-1、IL-6、TNF-α等炎性因子表达出现显著下调(p5)经HE、Masson染色后观察到,UUO-KD组较UUO组相比肾结构良好,肾小管变形轻微,肾损伤及纤维化程度均明显改善。且免疫组化结果发现:α-SMA、FN、Col-1等纤维化指标在UUO-KD组也显著降低(pmir-146b-5p可明显改善肾纤维化,mir-146b-5p可能是肾纤维化的一个潜在治疗靶标。

关键词： mir-146b-5p 靶向电转敲低技术肾纤维化慢性肾疾病

Inhibitory Effects of mir-146b-5p on Cell Migration and Invasion of pancreatic Cancer by Targeting MMp16

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2011年第4期31卷 509-514页

作者：林凡王欣揭志刚洪晓泉李旭王敏俞亚红 Department of biliopancreatic Surgery Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology

previous studies have shown that mirNAs participate in a wide range of biological functions and play important roles in various human diseases including *** found mir-146b-5p significantly dysregulated in human pancreatic cancer cells by *** demonstrate its function and regulation mechanism,we overexpressed mir-146-5p by transfecting the *** data showed that mir-146b-5p overexpression significantly reduced the abilities of migration and invasion of MIA paCa-2 pancreatic cancer ***,we found that matrix metalloproteinase 16（MMp16） was a downstream target of mir-146b-5p by dual-luciferase reporter ***,our findings suggest that mir-146b-5p may be involved in pancreatic cancer cell migration and invasion by targeting MMp16,and mir-146b-5p may be a potential therapeutic target for the pancreatic cancer.

关键词： mir-146b-5p pancreatic cancer matrix metalloproteinase migration invasion

Gpx-3受mir-146b-5p下调导致甲状腺癌细胞中过氧化物清除障碍

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GPx-3受miR-146b-5p下调导致甲状腺癌细胞中过氧化物清除障碍

作者：张丹西南医科大学

学位级别：硕士

背景:谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,Gpx)是一种抗氧化酶,它主要作用是清除细胞内的过氧化氢(HO),分为Gpx1-Gpx8八种亚型。甲状腺在合成甲状腺激素过程中会释放大量的HO,为了维持甲状腺细胞内氧化还原平衡,需要抗氧化系统... 详细信息

背景:谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,Gpx)是一种抗氧化酶,它主要作用是清除细胞内的过氧化氢(HO),分为Gpx1-Gpx8八种亚型。甲状腺在合成甲状腺激素过程中会释放大量的HO,为了维持甲状腺细胞内氧化还原平衡,需要抗氧化系统清除过量的过氧化物。Gpx是甲状腺滤泡细胞中一种重要的抗氧化酶。甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,pTC)中Gpx-3表达水平降低与肿瘤的转移有关,但是Gpx-3表达水平降低的原因尚不清楚。因此,本研究主要目的是探索pTC中Gpx-3表达降低的原因以及它对甲状腺癌过氧化物清除的影响。方法:从癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中获取Gpx-3在甲状腺癌和正常甲状腺组中的表达情况,通过蛋白免疫印迹实验(Western blot)验证。用生物信息学工具预测Gpx-3的表达水平与pTC患者的性别、年龄、分期、淋巴结转移、bRAF和无复发生存期(Recurrence-free survival,RFS)之间的关系。分析Gpx-3可能的上游micro RNAs。酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和双荧光素酶报告基因实验验证了Gpx-3与mir-146b-5p之间的靶向关系。结果:甲状腺乳头状癌中Gpx-3表达降低,在老年、伴淋巴结转移、更晚分期或伴有bRAF基因突变的甲状腺患者中表达更低(p5)。Gpx-3的低表达提示不良预后,表现为较低的RFS。mir-146b-5p在甲状腺癌中过表达。甲状腺癌细胞系TpC-1和bCpAp中mir-146b-5p的敲除导致Gpx-3表达水平的增加,并且促进GSH转化为GSSG。双荧光素酶报告试验证实了mir-146b-5p与Gpx-3 m RNA的3’UTR结合。结论:mir-146b-5p在甲状腺癌中高表达,通过直接靶向Gpx-3 m RNA干扰细胞内过氧化物清除。由于低Gpx-3水平导致的细胞内过氧化物的积累可能与甲状腺癌的不良预后相关。

关键词：甲状腺乳头状癌谷胱甘肽过氧化物酶3 氧化应激 mir-146b-5p

mir-146b-5p和TRIM29在子宫内膜癌中的表达

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徐州医科大学学报 2023年第1期43卷 59-64页

作者：马成蕾张亚洁仝建业闫洪超徐州医科大学研究生院江苏徐州221004 徐州医科大学第二附属医院妇产科江苏徐州221006 徐州医科大学附属医院妇产科江苏徐州221002

目的探讨mirNA-146b-5p(mir-146b-5p)和三结构域蛋白29(TRIM29)在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法选取2019年10月—2020年10月徐州医科大学附属医院、徐州医科大学第二附属医院手术切除的子宫内膜癌组织60例、正常增生期子宫内膜组... 详细信息

目的探讨mirNA-146b-5p(mir-146b-5p)和三结构域蛋白29(TRIM29)在子宫内膜癌中的表达及临床意义。方法选取2019年10月—2020年10月徐州医科大学附属医院、徐州医科大学第二附属医院手术切除的子宫内膜癌组织60例、正常增生期子宫内膜组织30例。采用免疫组化法检测组织中TRIM29表达水平,qRT-pCR法检测mir-146b-5p、TRIM29 mRNA表达水平,Spearman法分析两者相关性,Kaplan-Meier法及Cox比例风险回归模型进行预后分析。结果免疫组化显示,TRIM29在子宫内膜癌组织中的阳性表达率(55.0%)低于正常增生期子宫内膜组织(76.7%)(p5)。qRT-pCR检测显示,子宫内膜癌组织中mir-146b-5p的表达显著高于正常增生期子宫内膜组织,而TRIM29的表达明显低于正常增生期子宫内膜组织(p5)。Spearman分析提示,mir-146b-5p与TRIM29的表达呈负相关(r=-0.595,p5)。Kaplan-Meier分析显示,mir-146b-5p高表达组、TRIM29低表达组患者的预后较差(p5)。Cox多因素回归分析显示,mir-146b-5p、TRIM29是影响子宫内膜癌患者预后的独立影响因素。结论子宫内膜癌组织中mir-146b-5p高表达,TRIM29低表达,二者的表达失调可能共同参与子宫内膜癌的发生发展。

关键词：子宫内膜癌 mir-146b-5p 三结构域蛋白29 预后