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mc1r基因在白羽乌骨鸡和黑羽乌骨鸡肌肉和皮肤中的表达分析

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中国畜牧杂志 2024年第6期60卷 204-209页

作者：屠云洁邹剑敏姬改革巨晓军赵伟东郑国庆刘一帆章明单艳菊唐燕飞蒋华连束婧婷江苏省家禽科学研究所江苏省家禽遗传育种重点实验室江苏扬州225125 泰和凤升农牧科技有限公司江西吉安343700 广西富凤农牧集团有限公司广西南宁530024

本试验旨在探明mc1r基因在白羽乌骨鸡和黑羽乌骨鸡黑色素沉积中的影响效应,为更好地开发利用地方乌骨鸡提供理论依据。以白羽乌骨鸡(丝羽乌骨鸡、竹丝鸡)和黑羽余干乌骨鸡为研究对象,屠宰拔毛后立刻测定胸部皮肤、大腿部皮肤的亮度L^(*)... 详细信息

本试验旨在探明mc1r基因在白羽乌骨鸡和黑羽乌骨鸡黑色素沉积中的影响效应,为更好地开发利用地方乌骨鸡提供理论依据。以白羽乌骨鸡(丝羽乌骨鸡、竹丝鸡)和黑羽余干乌骨鸡为研究对象,屠宰拔毛后立刻测定胸部皮肤、大腿部皮肤的亮度L^(*)值,然后把测定过肤色的胸皮和大腿皮剪开,测定皮肤下面的胸肌、腿肌亮度L^(*)值,获得胸肌、腿肌、胸皮和大腿皮乌色度的变化趋势,同时比较mc1r基因在3种乌骨鸡的4种组织中的差异表达量。结果发现:2~17周龄期间,随着周龄的增加,3种乌骨鸡腿皮、胸皮、胸肌和腿肌L^(*)值均呈增加趋势;2周龄时mc1r在3种乌骨鸡胸肌、腿肌中的相对表达量较高,随后表达量呈现下降趋势,而在3种乌骨鸡胸皮和腿皮中的表达量变化趋势不同;2周龄时mc1r基因在黑羽余干乌骨鸡腿肌、胸皮和腿皮中的表达量显著大于2种白羽乌骨鸡;6周龄时mc1r基因在黑羽余干乌骨鸡腿肌和胸皮的表达量显著大于2种白羽乌骨鸡;10周龄时mc1r基因在黑羽余干乌骨鸡腿肌的表达量显著大于2种白羽乌骨鸡;10、12、17周龄时mc1r在丝羽乌骨鸡腿皮的表达量显著高于其他乌骨鸡;mc1r基因表达量与黑羽余干乌骨鸡肤色和肉色L^(*)值不相关,而与白羽乌骨鸡腿肌L^(*)值显著相关。结果提示,mc1r基因对白羽乌骨鸡和黑羽乌骨鸡黑色素沉积的影响效应不同,本研究为培育乌色度更高、不同羽色的乌骨鸡新品种提供了科学理论依据。

关键词：乌骨鸡 mc1r 黑色素基因表达乌色度

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The role of mc1r gene in buffalo coat color

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Science China(Life Sciences) 2010年第2期53卷 267-272页

作者： MIAO YongWang1,2,WU GuiSheng3,WANG Lei2,LI DaLin4,TANG ShouKun5,LIANG JianPing2,MAO HuaMing2,LUO Huairong3 & ZHANG YaPing1,6 1 Laboratory for Conservation and Utilization of Bio-resource,Yunnan University,Kunming 650091,China 2 Faculty of Animal Science and Technology,Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China 3 Kunming Institute of Botany,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650204,China 4 Yunnan Institute of Buffalo Science and Technology,Kunming 650021,China 5 Animal Husbandry and Veterinary Station of Luxi city,Luxi 678400,China 6 State Key Laboratory of Genetic resources and Evolution,Kunming Institute of Zoology,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650223,China Laboratory for Conservation and Utilization of Bio-resource Yunnan University Faculty of Animal Science and Technology Yunnan Agricultural University Kunming Institute of Botany Chinese Academy of Sciences

Melanocortin-1 receptor (mc1r) plays a major role in pigmentation in many *** investigate if the mc1r gene is associated with coat color in water buffalo,the coding region of mc1r gene of 216 buffalo samples was sequenced,which included 49 black river buffalo (Murrah and Nili-ravi),136 swamp buffalo (Dehong,Diandongnan,Dechang,Guizhou,and Xilin) with white and gray body,and 31 hybrid offspring of river buffalo Nili-ravi (or Murrah) and swamp *** the three variation sites found,SNP684 was synonymous,while SNP310 and SNP384 were nonsynonymous,leading to p.S104G and p.I128M changes,*** Individuals carrying homozygote EBr/EBr were *** genotype and phenotype analysis of the hybrid offspring of black river buffalo and gray swamp buffalo further revealed that the river buffalo type allele EBr or the allele carrying the amino acid p.104S was important for the full function of *** in silico functional analysis showed that the amino acid substitutions p.G104S and p.M128I had significant impact on the function of *** results indicate that the allele EBr or the allele carrying the amino acid p.104S was associated with the black coat color in buffalo.

关键词： Buffalo coat color mc1r

利用CrISPr/Cas9在人类黑色素瘤细胞中编辑mc1r与功能分析

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遗传 2022年第7期44卷 581-590页

作者：张充魏子璇王敏陈瑶生何祖勇中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广州510006

mc1r(melanocortin 1 receptor)基因编码黑皮质素1型受体,它在配体α-黑素细胞刺激素(α-melanocyte stimulating hormone,α-MSH)的刺激下,可促进细胞内cAMP(cyclic adenosine monophosaphate)的生成,从而激活PKA(protein kinase A system)信号通路,促进黑色素合成调控的关键转录因子–小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF),以及限速酶–酪氨酸酶(tyrosinase,TYr)的表达,进而调控真黑素和褐黑素的合成,影响动物的毛色表型。有研究表明,杜洛克猪(Susscrofa domestica)mc1r蛋白第6个跨膜结构域(transmembrane domain 6,TM6)发生了A243T突变,该突变可能影响mc1r蛋白生物学功能,被认为是导致杜洛克猪红毛表型的主要因素,然而却一直未被验证过。因此,本研究以单链寡核苷酸(single-stranded oligo-deoxyribonucleotides,ssODN)作为同源重组模板,利用CrISPr/Cas9技术在人类黑色素瘤细胞系SK-MEL-2中引入mc1r基因的c.727G>A(A243T)突变,以分析其对mc1r功能的影响。结果表明ssODN发生同源重组的效率可达10%。通过对共转染ssODN和CrISPr/Cas9表达载体的细胞进行筛选和培养,获得6个单克隆细胞株,进行测序鉴定,结果未能筛选到发生预期突变的单克隆细胞株,所有单克隆细胞株皆在目标位点周围出现突变。对转染后的细胞群进行功能分析,结果发现其cAMP信号强度、MITF基因和TYr基因表达量均显著低于未转染的细胞,表明编辑mc1r可影响细胞的黑色素合成功能。本研究为深入分析mc1r突变影响动物毛色提供了进一步的参考。

关键词： mc1r 基因定点突变 CrISPr/Cas9 A243T

不同毛色绵羊皮肤中mc1r的差异表达及定位

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基因组学与应用生物学 2016年第10期35卷 2614-2620页

作者：王海东李亚楠陈天直赵兵令刘颖常露程薛霖莉山西农业大学动物科技学院太谷030801 山西农业大学信息学院太谷030801

mc1r基因与黑色素细胞的功能、皮肤的色素沉着和皮肤癌风险相关。本研究mc1r基因在不同毛色绵羊皮肤组织中的差异表达及定位,以探索mc1r基因对皮肤色素生成方面的重要作用,确定其与毛色形成的相关性。采用荧光定量PCr方法和免疫印迹方... 详细信息

mc1r基因与黑色素细胞的功能、皮肤的色素沉着和皮肤癌风险相关。本研究mc1r基因在不同毛色绵羊皮肤组织中的差异表达及定位,以探索mc1r基因对皮肤色素生成方面的重要作用,确定其与毛色形成的相关性。采用荧光定量PCr方法和免疫印迹方法分别检测不同毛色绵羊皮肤中mc1r基因m rNA水平和蛋白水平的表达差异;运用免疫组织化学法对不同毛色绵羊皮肤组织中的mc1r基因进行定位。荧光定量PCr结果显示mc1r m rNA在所有绵羊皮肤组织中都表达,在全黑绵羊皮肤中的相对表达量为537.91±150.36**,在花黑和花白绵羊皮肤中的相对表达量分别为27.95±9.3**和4.19±0.57**,而在全白绵羊皮肤中的相对表达量为1.03±0.27;免疫印迹结果显示所有绵羊皮肤组织蛋白中均存在与mc1r反应的阳性条带,mc1r在全黑绵羊皮肤组织中的相对蛋白含量为6.3±0.21**,在花黑和花白绵羊皮肤组织中的相对蛋白含量分别为2.74±0.24**和1.55±0.1**,而在全白绵羊皮肤组织中的相对蛋白含量为1±0.15;免疫组织化学结果显示mc1r蛋白主要表达部位为绵羊皮肤组织毛囊的基质、根鞘等区域。试验表明不同毛色绵羊皮肤组织均正常表达mc1r基因,但其表达水平存在差异,全黑绵羊皮肤中mc1r m rNA和蛋白的表达量显著高于其它三种毛色绵羊,综上可知mc1r基因影响绵羊黑白花毛色的形成,而且真黑素的合成依赖于mc1r的表达水平。

关键词：绵羊毛色 mc1r 荧光定量PCr 免疫组化

Single nucleotide polymorphism analysis on melanocortin receptor 1 (mc1r) of Chinese native pig

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Science China(Life Sciences) 2004年第3期47卷 287-292页

作者： SHI Kerong1,2, WANG Aiguo1, LI Ning2 & DENG Xuemei1 1. College of Animal Science and Technology, China Agricultural University, Beijing 100094, China 2. National Laboratory for Agribiotechnology of China Agricultural University, Beijing 100094, China College of Animal Science and Technology China Agricultural University Beijing 100094 China National Laboratory for Agribiotechnology of China Agricultural University Beijing 100094 China College of Animal Science and Technology China Agricultural University Beijing 100094 China National Laboratory for Agribiotechnology of China Agricultural University Beijing 100094 China

Melanocortin receptor 1 (mc1r) gene, one of the important candidate genes for coat color trait, was used to analyze the single nucleotide polymorphism (SNP) in Chinese native pig breeds by PCr-single strand conformation polymorphism (PCr-SSCP). The study had also taken 3 imported pig breeds as control. The results showed that the three mutations G284A, T309C and T364C found in Chinese native pigs were consistent to the mutation found in the European Large Black individuals. However, 68CC or C492T and G728A were only found in the imported individuals, which were obviously different from the Chinese native pigs. Accordingly, we presumed that the coat colors of Chinese native pigs belonged to dominant black color sys-tem, which was completely distinct to that of imported pig breeds. Thus it was implied that mc1r gene was not the principal factor affecting the coat color differences of Chinese native pig breeds, but could be used to trace the molecular evolution of pig breeds.

关键词： pig, coat color, mc1r gene, polymorphism.

不同毛色牦牛皮肤组织学观察及mc1r基因功能验证

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畜牧兽医学报 2018年第7期49卷 1377-1386页

作者：唐朋凌笑笑高泽成贾聪俊梁春年吴晓云褚敏阎萍中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃省牦牛繁育重点实验室兰州730050 甘肃农业大学动物科技学院兰州730050

旨在阐明不同毛色牦牛皮肤组织形态学特点及mc1r调控黑色素合成的可能分子机制。采集大通牦牛(黑褐色)和天祝白牦牛(白色)各6头的背部皮肤组织,用甲苯胺蓝染色法分别对不同毛色牦牛皮肤组织进行染色,观察黑色素和成熟黑色素细胞的含量... 详细信息

旨在阐明不同毛色牦牛皮肤组织形态学特点及mc1r调控黑色素合成的可能分子机制。采集大通牦牛(黑褐色)和天祝白牦牛(白色)各6头的背部皮肤组织,用甲苯胺蓝染色法分别对不同毛色牦牛皮肤组织进行染色,观察黑色素和成熟黑色素细胞的含量差异及分布特征,并通过实时荧光定量PCr(qrT-PCr)检测mc1r在不同毛色牦牛皮肤中的表达差异。B16小鼠黑色素瘤细胞中转染shrNA mc1r干扰载体后,应用qrT-PCr和Western blot检测转染效率,分析比较各组中与毛色相关基因(Agouti、MITF、TYr)的表达差异性,利用酶标仪检测不同时间点黑色素产量。结果表明,两种毛色牦牛的表皮和毛囊周围均分布着大量的黑色素细胞,但天祝白牦牛仅在表皮基底层和毛根处检测到少量黑色素,而大通牦牛表皮层和毛囊处产生大量黑色素。与大通牦牛相比,天祝白牦牛皮肤中mc1r表达量极显著降低(P1)。在成功抑制mc1r的B16细胞中,TYr表达量极显著降低(P1),MITF表达量显著降低(P0.05);同时黑色素含量减少。综上表明,黑色素大量沉积与mc1r高表达是导致牦牛毛色差异的原因。将shrNA mc1r载体成功转染B16小鼠黑色素瘤细胞后,mc1r的抑制情况与下游调控基因TYr表达一致,进而降低黑色素含量,说明mc1r对黑色素的合成及毛色形成起重要的调控作用。

关键词：牦牛皮肤组织形态 shrNA mc1r 毛色相关基因黑色素合成

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mc1r天然拮抗剂的高通量初步筛选

上海大学学报（自然科学版） 2008年第2期14卷 215-220页

作者：俞佳玲刘志学上海大学生命科学学院上海200444

为了寻找高效稳定的黑色素皮质激素受体1(melanocortin1 receptor,mc1r)的拮抗剂,利用作者前期工作中建立的高通量筛选方法对1000种中草药提取物进行了筛选,并检测了这些提取物对小鼠B16-F1细胞系黑色素生成量的影响.结果表明,补骨脂等1... 详细信息

为了寻找高效稳定的黑色素皮质激素受体1(melanocortin1 receptor,mc1r)的拮抗剂,利用作者前期工作中建立的高通量筛选方法对1000种中草药提取物进行了筛选,并检测了这些提取物对小鼠B16-F1细胞系黑色素生成量的影响.结果表明,补骨脂等10种粗提物具有拮抗促黑激素(MSH)激活mc1r的作用.其中,补骨脂、破茎松萝、桑根和太白树粗提物能明显降低B16-F1细胞的产黑色素能力,但其机制有所不同,补骨脂主要作用于MSH对mc1r的激活过程,而其余3种提取物基本上直接作用于cAMP通路.本实验为利用上述中草药调控皮肤细胞中的黑色素生成提供了初步线索.

关键词： mc1r 拮抗剂高通量筛选中草药

mir-324-3p通过调控mc1r基因影响黑色素的形成

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畜牧兽医学报 2016年第7期47卷 1381-1388页

作者：曾庆宝范瑞文张秋月郝晓娟武良琦任玉红山西农业大学动物科技学院太谷030801

旨在证明mir-324-3p可以通过调控其预测的靶基因mc1r及其下游基因的表达从而对羊驼皮肤黑色素的合成产生影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中转染mir-324-3p过表达载体,应用qrT-PCr与Western blotting分析比较各试验组中mc1r... 详细信息

旨在证明mir-324-3p可以通过调控其预测的靶基因mc1r及其下游基因的表达从而对羊驼皮肤黑色素的合成产生影响。本研究在体外培养的羊驼皮肤黑色素细胞中转染mir-324-3p过表达载体,应用qrT-PCr与Western blotting分析比较各试验组中mc1r基因与毛色相关基因小眼畸形相关转录因子(Microphthalmia-associtated transcription factor,Mitf)、酪氨酸酶(Tyrosinase,Tyr)、酪氨酸相关蛋白2(Tyrosinase related protein 2,Tyrp2)的表达差异性,利用酶标仪检测黑色素产量的变化。结果显示:(1)mir-324-3p在棕色与白色羊驼皮肤中均有表达,且在棕色羊驼皮肤中极显著表达(P1),其相对表达量是白色的1.64倍;(2)黑色素细胞被转染了mir-324-3p过表达载体后,处理组靶基因mc1r及其下游调控基因Mitf、Tyr和Tyrp2的表达量与黑色素产量较空白对照组均有下调,且以Mitf基因表达量极显著下调(P1)。综上表明,羊驼皮肤中mir-324-3p可能通过调控mc1r基因的表达,顺势下调mc1r基因下游调控基因Mitf、Tyr与Tyrp2的表达,最终对羊驼皮肤黑色素细胞中黑色素的类型及合成量产生影响。

关键词： mir-324-3p mc1r 黑色素羊驼

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mc1r基因与朝鲜鹌鹑羽色关系的研究

中国家禽 2012年第8期34卷 17-20页

作者：许华伟张小辉庞有志赵淑娟杨又兵河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003

黑素皮质素受体1(mc1r)又称促黑素细胞激素受体(MSH-r),由毛色扩展位点编码而成,对动物体色的形成起重要作用,本研究分析了mc1r基因突变与朝鲜鹌鹑羽色之间的关系。通过混合样品DNA测序方法寻找mc1r基因的突变位点,采用PCr-SSCP的方法... 详细信息

黑素皮质素受体1(mc1r)又称促黑素细胞激素受体(MSH-r),由毛色扩展位点编码而成,对动物体色的形成起重要作用,本研究分析了mc1r基因突变与朝鲜鹌鹑羽色之间的关系。通过混合样品DNA测序方法寻找mc1r基因的突变位点,采用PCr-SSCP的方法对突变位点在4种羽色鹌鹑(栗羽、黄羽、白羽、黑羽)群体中的分布情况进行了研究,以揭示mc1r基因与鹌鹑羽色性状之间的关系。结果表明,在鹌鹑mc1r基因上存在一个A/G突变位点,导致编码蛋白发生Ile58Val突变,通过PCr-SSCP分析发现,该突变位点在4种羽色鹌鹑群体间没有显著差异(P>0.05)。本研究没有发现与日本鹌鹑报道相同的Glu92Lys突变位点,表明朝鲜鹌鹑的黑羽突变与报道的日本鹌鹑黑羽突变的机制不同,而且朝鲜鹌鹑的黑羽突变可能还与其它基因突变有关。

关键词：朝鲜鹌鹑羽色 mc1r PCr-SSCP