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中国组织工程研究 2023年第35期27卷 5676-5680页

作者：李昊叶枝茂罗诒财李孔梅麦昱颖王琪广西医科大学口腔医学院/附属口腔医院口腔修复科广西壮族自治区南宁市530021 广西口腔颌面修复与重建研究重点实验室广西壮族自治区南宁市530021 四川大学华西口腔医学院口腔修复科四川省成都市610041

背景:目前牙周炎的发生发展机制仍不十分明确,治疗靶点有待探讨。近年研究发现,miR-185-5p在多种疾病中表现出抗炎作用,其在牙周炎中的作用尚不清楚。目的:探讨调节miR-185-5p表达对小鼠实验性牙周炎炎症反应的影响。方法:C57B/6J小鼠2... 详细信息

背景:目前牙周炎的发生发展机制仍不十分明确,治疗靶点有待探讨。近年研究发现,miR-185-5p在多种疾病中表现出抗炎作用,其在牙周炎中的作用尚不清楚。目的:探讨调节miR-185-5p表达对小鼠实验性牙周炎炎症反应的影响。方法:C57B/6J小鼠24只随机分为正常对照组、牙周炎对照组、牙周炎miR-NC组、牙周炎miR-mimics组,每组6只。除正常对照组外,其余组均构建实验性牙周炎模型。造模4周后,在牙周炎miR-mimics组小鼠双侧下颌第二磨牙近远中牙龈乳头注射100μL含0.5 mmol/L miR-185-5p mimics的生理盐水,在牙周炎miR-NC组注射100μL含0.5 mmol/L阴性对照miR-NC的生理盐水,在正常对照组、牙周炎对照组注射等量生理盐水。给药8周后处死小鼠,Micro-CT检测左下颌骨,qRT-PCR检测左下颌牙龈miR-185-5p、mzb1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6基因表达,免疫组织化学染色检测小鼠右下颌牙龈mzb1、磷酸化p65核因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6蛋白表达。结果与结论:①Micro-CT检测显示,与牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组相比,牙周炎miR-mimics组的牙槽骨丧失减少(P185-5p表达高于正常对照组、牙周炎对照组及牙周炎miR-NC组(Pmzb1、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的mRNA表达降低(Pmzb1、磷酸化p65核因子κB、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6蛋白表达减少(P185-5p表达能抑制牙周炎炎症反应,抑制牙槽骨吸收,该作用可能与下调牙龈组织中mzb1、核因子κB通路有关。

关键词：牙周炎 miR-185-5p 炎症反应 mzb1 牙槽骨核因子κB

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mzb1在牙周炎进程中的作用及机制研究

MZB1在牙周炎进程中的作用及机制研究

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作者：李丁一重庆医科大学

学位级别：硕士

目的探讨与牙周炎相关的新型分子mzb1（Marginal Zone B and B-1Cell-Specific Protein）在人牙周膜细胞（h PDLCs）中发挥迁移和对牙槽骨的作用。方法1.在基因表达综合数据库（GEO）中获取人类牙龈组织的基因表达谱,通过生物信息学分... 详细信息

目的探讨与牙周炎相关的新型分子mzb1（Marginal Zone B and B-1Cell-Specific Protein）在人牙周膜细胞（h PDLCs）中发挥迁移和对牙槽骨的作用。方法1.在基因表达综合数据库（GEO）中获取人类牙龈组织的基因表达谱,通过生物信息学分析选择候选分子。通过免疫荧光、RT-q PCR和Western blot检测候选分子mzb1在人牙龈组织、小鼠和人牙周膜细胞（human periodontal ligament cells,h PDLCs）中的定位和表达。2.评估在h PDLCs中分别过表达和敲低mzb1时对h PDLCs的生物学的影响。此外,采用细胞划痕试验、transwell试验、CCK-8试验和流式细胞术检测mzb1对体外细胞迁移、增殖和凋亡的影响。3.通过生物信息学预测和双荧光素酶报告实验评估mi R-185-5p与mzb1的结合。4.通过蛋白免疫印迹方法检测mzb1影响迁移的信号通路。5.通过Micro-CT分析观察mzb1在体内对牙槽骨丢失的影响。结果1.生物信息学分析发现,mzb1基因是牙周炎患者中增加最显著的基因之一。并且,mzb1在牙龈卟啉单胞菌脂多糖（LPS-PG）处理的h PDLCs,牙周炎患者和牙周炎小鼠牙龈组织中显著升高,与GEO数据库中的芯片结果一致。2.在h PDLCs中过表达mzb1可以抑制h PDLCs迁移,反之,敲低mzb1后,促进h PDLCs的迁移,但细胞的增殖能力及凋亡均未受影响。3.生物信息学和双荧光素酶报告实验证实mzb1是mi R-185-5p的靶基因。4.体外实验表明,mzb1作为mi R-185-5p的靶基因,通过NF-κB信号通路抑制h PDLCs的迁移。牙周膜细胞过表达mzb1后,p-p65表达升高,NF-κB信号通路被激活,相反,沉默mzb1后,p-p65表达降低,NF-κB信号通路受到抑制。过表达mzb1后再加入PDTC（NF-κB抑制剂）,受抑制的细胞迁移能力增强。5.mzb1过表达的h PDLCs抑制碱性磷酸酶（ALP）和Runx相关转录因子2（Runx2）m RNA表达水平,敲低反之。此外,体内实验表明,敲除mzb1可以减少牙槽骨的损失。结论mzb1作为mi R-185-5p的靶基因,通过NF-κB信号通路抑制迁移,在牙槽骨丢失中发挥重要作用。目的:探究mzb1在口腔上皮屏障中发挥的作用以及对口腔菌群的影响。方法:通过蛋白免疫印迹,免疫荧光染色检测LPS-PG刺激KB细胞（人口腔上皮癌细胞）后mzb1的表达、定位及相关信号通路的激活。接下来,采用KB细胞建立口腔上皮屏障模型,检测mzb1过表达或敲低后KB细胞的跨膜电阻值（TER）和FITC（异硫氰酸荧光素）-葡聚糖通量的变化评估细胞通透性。WB和IF检测敲低或过表达mzb1对紧密连接蛋白结构、分布和表达的影响。最后,采用simzb1处理牙周炎小鼠,16s RNA测序分析口腔菌群变化。结果:WB结果显示LPS-PG通过激活NF-κB信号通路上调口腔上皮细胞中mzb1的表达,且mzb1在细胞核中表达。成功构建KB细胞口腔上皮屏障模型后,过表达mzb1降低TER值,而FD4增高,敲低mzb1后则反之。WB和IF证实mzb1过表达会降低紧密连接蛋白的表达并破坏其分布,从而破坏口腔上皮屏障,敲低mzb1则反之。16s RNA测序分析显示,与对照组相比,si-mzb1处理组的小鼠口腔菌群组成发生变化。结论:mzb1破坏牙龈上皮屏障致口腔菌群失衡,在维持口腔上皮屏障功能方面发挥作用。

关键词：牙周炎人牙周膜细胞 mzb1 迁移牙槽骨丢失人口腔上皮细胞口腔菌群

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mzb1通过内质网应激途径改善过氧化氢所致人心肌细胞损伤的研究

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中国卫生标准管理 2023年第18期14卷 168-172页

作者：薛姣姣顾晶张棋周明生姚阳蔡瑞平徐茜徐志华贾辉张璐沈阳医学院基础医学院辽宁沈阳110034 沈阳医学院科学实验中心辽宁沈阳110034 沈阳医学院中医药学院辽宁沈阳110034

目的观察边缘区B和B1细胞特异性蛋白(marginal zone B and B1 cell specific protein,mzb1)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_(2)O_(2))诱导的人心肌细胞损伤的影响并探求其机制。方法培养人心肌细胞系AC16,H_(2)O_(2)(200μmol/L)诱导心肌细胞损伤模型,通过Lipofectamine®3000脂质体转染mzb1;将细胞分为(1)对照组:培养液。(2)H_(2)O_(2)组:H_(2)O_(2)(200μmol/L)诱导12 h。(3)mzb1+H_(2)O_(2)组:转染mzb1,36 h后加入H_(2)O_(2)(200μmol/L)继续培养12 h。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]法检测细胞活力;以蛋白质印迹法检测mzb1,内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白94(glucose-regulated protein 94,GRP94)、CCAAT/增强子结合蛋白的同源蛋白(CCAAT/enhancer binding protein homologous protein,CHOP)以及凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase3)的表达水平。结果与对照组比较,H_(2)O_(2)组细胞活力显著下降,Cleaved-Caspase3水平显著升高,内质网应激相关蛋白GRP94、CHOP表达水平升高,mzb1表达量显著降低;与H2O2组比较,过表达mzb1后,AC16细胞中mzb1的细胞活力有所恢复,内质网应激相关蛋白GRP94、CHOP蛋白表达水平下降,细胞内Cleaved-Caspase3水平显著降低。结论mzb1通过抑制内质网应激抑制凋亡,改善H_(2)O_(2)引起的心肌细胞损伤。

关键词： mzb1 心肌细胞凋亡内质网应激过氧化氢 Caspase3

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mzb1 regulates the secretion of IgA and IgM but not IgG1

Mzb1 regulates the secretion of IgA and IgM but not IgG1

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第十二届全国免疫学学术大会

作者： Xiong Ermeng Min Qing Wang Jiyang Department of Immunology School of Basic Medical SciencesFudan University

Background:mzb1 is an endoplasmic reticulum-localized protein implicated in efficient IgM assembly and secretion.However,the role of mzb1 in the secretion of IgA and IgG remains unknown.

关键词： mzb1 IgA Colitis

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