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myf5基因多态性与山羊生长性状相关分析

中国畜牧杂志 2011年第7期47卷 15-17页

作者：韦宏伟徐刚毅汪代华姜淦黄磊四川农业大学动物科技学院四川雅安625014 遂阳市船山区畜牧食品局四川遂宁629000 绵阳市畜牧兽医局四川绵阳621600

本实验选取145只天府肉羊、62只成都麻羊为实验动物,对山羊myf5基因进行PCR扩增,采用PCR-SSCP技术检测该基因在山羊中的多态性。结果表明:实验羊myf5基因第1外显子第328位发生A→C突变,检测到A、B2个等位基因和AA、AB、BB3种基因型。天... 详细信息

本实验选取145只天府肉羊、62只成都麻羊为实验动物,对山羊myf5基因进行PCR扩增,采用PCR-SSCP技术检测该基因在山羊中的多态性。结果表明:实验羊myf5基因第1外显子第328位发生A→C突变,检测到A、B2个等位基因和AA、AB、BB3种基因型。天府肉羊和成都麻羊的A等位基因频率分别为0.690、0.742;B等位基因频率分别为0.310、0.258。在天府肉羊中,myf5基因AA型和AB型个体的体重极显著大于BB型(P5);成都麻羊AA型和AB型个体的体重、管围均显著大于BB型(P5);而群体内不同基因型在体长、体高和胸围上无显著差异(P>0.05)。

关键词： myf5 PCR-SSCP 遗传多态性天府肉羊成都麻羊

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京海黄鸡myf5基因表达谱及表达规律

中国兽医学报 2016年第2期36卷 320-325页

作者：张涛张向前董新龙张跟喜王金玉樊庆灿王文浩王永娟扬州大学动物科学与技术学院江苏省动物遗传繁育与分子设计重点实验室江苏扬州225009 江苏京海集团江苏南通226103

为了探究myf5基因的表达谱和表达规律,研究其可能的作用机理,本研究根据GenBank上的原鸡(Gallus gallus)myf5基因cDNA序列,跨内含子设计1对荧光定量引物,采用实时荧光定量PCR技术检测myf5基因在不同组织的表达情况,绘制其组织表达谱;并... 详细信息

为了探究myf5基因的表达谱和表达规律,研究其可能的作用机理,本研究根据GenBank上的原鸡(Gallus gallus)myf5基因cDNA序列,跨内含子设计1对荧光定量引物,采用实时荧光定量PCR技术检测myf5基因在不同组织的表达情况,绘制其组织表达谱;并选取4个时间点,检测在高表达组织中的表达情况,以研究其表达规律。结果显示,无论是在公鸡还是母鸡中,myf5基因均在胸肌和腿肌中的表达量最高。在公鸡的其他组织中表达量很低或几乎不表达,母鸡中,除在卵巢中有少量表达外,其他组织中表达量很低或几乎不表达。无论是在公鸡腿肌和胸肌中,还是在母鸡腿肌和胸肌中,myf5基因的表达量总体呈下降趋势,在16周龄接近体成熟时表达量最低。本研究揭示了京海黄鸡(Gallus gallus)myf5基因的表达谱以及随肌肉生长发育的表达规律,为进一步研究myf5基因的作用机理、表达调控以及与MyoG基因相互作用机理奠定基础。

关键词： myf5 京海黄鸡表达谱表达规律

新疆褐牛PPARγ、myf5和AGPAT5基因SNP突变与体尺性状的关联分析

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新疆农业科学 2023年第10期60卷 2590-2600页

作者：韩丽云李艳艳马云虎红红康小龙郭殿芝史远刚宁夏大学农学院银川750021 宁夏农垦贺兰山奶业有限公司银川750021

【目的】鉴定与牛体尺性状相关的基因,筛选PPARγ、myf5和AGPAT5三个基因的SNP多态性,研究SNP突变对牛体尺性状的影响,为新疆褐牛的分子育种提供标记信息。【方法】采用PCR-RFLP方法对新疆褐牛PPARγ、myf5和AGPAT5基因的突变位点进行研... 详细信息

【目的】鉴定与牛体尺性状相关的基因,筛选PPARγ、myf5和AGPAT5三个基因的SNP多态性,研究SNP突变对牛体尺性状的影响,为新疆褐牛的分子育种提供标记信息。【方法】采用PCR-RFLP方法对新疆褐牛PPARγ、myf5和AGPAT5基因的突变位点进行研究,通过单倍型法构建三个目标基因的单倍型块并统计不同单倍型的基因型频率。【结果】三个基因的6个SNP位点对体尺性状均有显著影响,mRNA二级结构预测发现PPARγ-exon7(G74T)和AGPAT5-exon7(G72A)均导致mRNA二级结构和自由能发生改变,蛋白二级结构预测发现牛PPARγ基因外显子1和AGPAT5外显子7的2个SNP位点均为错义突变,改变氨基酸结构,但是蛋白质二级结构未发生改变;myf5外显子1的SNP位点突变为同义突变,氨基酸及蛋白质二级结构均未发生改变。【结论】筛选PPARγ、myf5和AGPAT5基因的6个SNP位点,基因PPARγ、myf5和AGPAT5与牛体尺性状的关系。

关键词：新疆褐牛 PPARγ myf5 AGPAT5 体尺性状

瓢鸡和茶花鸡生长性状及IGF-1基因与myf5基因表达差异研究

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中国家禽 2019年第24期41卷 13-16页

作者：柳明正王坤豆腾飞李正田李丰耘李旭真字美婷杨洪涛李琦华葛长荣贾俊静云南农业大学动物科学技术学院云南省动物营养与饲料重点实验室云南昆明650201 云南省种禽繁育中心云南昆明650212

为研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因和生肌因子5(myf5)基因表达量对鸡生长发育的影响,以300日龄瓢鸡和茶花鸡为研究对象,分析活重与体尺性状(体斜长、胸深、胸骨长、胫长)及IGF-1基因与myf5基因在其胸肌和腿肌中的表达量。结果显示:30... 详细信息

为研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)基因和生肌因子5(myf5)基因表达量对鸡生长发育的影响,以300日龄瓢鸡和茶花鸡为研究对象,分析活重与体尺性状(体斜长、胸深、胸骨长、胫长)及IGF-1基因与myf5基因在其胸肌和腿肌中的表达量。结果显示:300日龄时,瓢鸡的活重与体尺性状(体斜长、胸深、胸骨长、胫长)均极显著高于茶花鸡(Pmyf5基因在瓢鸡的胸肌和腿肌中的表达量均高于茶花鸡,且myf5基因在两种鸡胸肌中的表达差异显著(P5),相同鸡种不同部位间显示,myf5基因在茶花鸡腿肌中的表达量显著高于胸肌(P5);相关性分析显示,IGF-1基因与myf5基因在瓢鸡和茶花鸡的胸肌、腿肌中的表达量与活重、胸骨长、胫长均呈极显著正相关(Pmyf5基因是影响瓢鸡和茶花鸡生长发育的重要候选基因,为其分子选育奠定基础。

关键词：瓢鸡茶花鸡 IGF-1 myf5 生长性状

五指山猪不同组织中myf5与MyoD1基因的表达研究

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家畜生态学报 2012年第5期33卷 12-15页

作者：曹婷侯冠彧施力光周汉林张立岭海南大学农学院海南海口570228 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所/农业部华南作物基因资源与种质创制重点实验室海南儋州571737

MRFs家族成员包括myf5、MyoD1、myf4和Mfy6,利用Real-time PCR技术,检测myf5、MyoD1基因在从出生到体成熟(30d、210d、360d)五指山猪背部肌肉组织中的表达变化趋势,以及myf5、MyoD1基因在体成熟五指山猪心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、... 详细信息

MRFs家族成员包括myf5、MyoD1、myf4和Mfy6,利用Real-time PCR技术,检测myf5、MyoD1基因在从出生到体成熟(30d、210d、360d)五指山猪背部肌肉组织中的表达变化趋势,以及myf5、MyoD1基因在体成熟五指山猪心脏、肝脏、肺脏、脾脏、肾脏、肌、胃和小肠以上组织中的mRNA表达水平。结果表明:myf5和MyoD1基因在出生后五指山猪背部肌肉组织中的mRNA表达水平与五指山猪的生长年龄成正比(P5);myf5及MyoD1基因在成年五指山猪以上8种组织中均有表达,其中在肌肉组织中相对表达量最高。

关键词：五指山猪实时荧光定量PCR myf5 MyoD1

小鼠myf5真核表达载体的构建及其在细胞中的定位

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生物技术 2010年第3期20卷 11-13页

作者：刘向东郭芬黄晓峰刘兆宇张欣李月琴周天鸿暨南大学生命科学技术学院广东广州510632 广东药学院生命科学与生物制药学院广东广州510006

目的:获得小鼠生肌调节因子myf5基因并构建pEYFP-C1真核表达载体,观察myf5在小鼠C3H10T1/2细胞中的定位。方法:利用PCR获得myf5基因克隆到pEYFP-C1载体中,利用脂质体将构建的表达载体转染C3H10T1/2细胞,荧光观察融合蛋白的表达。结果:... 详细信息

目的:获得小鼠生肌调节因子myf5基因并构建pEYFP-C1真核表达载体,观察myf5在小鼠C3H10T1/2细胞中的定位。方法:利用PCR获得myf5基因克隆到pEYFP-C1载体中,利用脂质体将构建的表达载体转染C3H10T1/2细胞,荧光观察融合蛋白的表达。结果:从小鼠cDNA文库中得到760bp的myf5的CDS序列后,重组到pEYFP-C1载体中并转染C3H10T1/2细胞,荧光显示myf5蛋白定位在细胞核中。结论:myf5载体成功构建并在小鼠C3H10T1/2细胞表达,证明了myf5蛋白定位于细胞核,为进一步研究myf5与其他蛋白的相互作用奠定了基础。

关键词： myf5 C3H10T1/2 细胞定位

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猪myf5基因外显子1的多态性分析

江苏农业科学 2006年第3期34卷 125-127页

作者：丁国杰刘娣李景芬东北农业大学动物科学技术学院黑龙江哈尔滨150030

利用PCR-SSCP技术,以民猪、三江白猪、大白猪、长白猪、军牧1号、杜洛克和双肌臀大白猪共7个猪种为研究对象,根据GenBank上猪的myf5基因外显子1序列设计了4对引物,进行了SNPs检测,并检测到了多态,发现在1 288 bp处有一个点突变G→C。经... 详细信息

利用PCR-SSCP技术,以民猪、三江白猪、大白猪、长白猪、军牧1号、杜洛克和双肌臀大白猪共7个猪种为研究对象,根据GenBank上猪的myf5基因外显子1序列设计了4对引物,进行了SNPs检测,并检测到了多态,发现在1 288 bp处有一个点突变G→C。经计算各基因型频率、基因频率和试验统计表明:随民猪、三江白猪、大白猪、长白猪、军牧1号、杜洛克和双肌臀大白猪瘦肉率的升高,等位基因M的基因频率也大致按此顺序呈上升趋势。

关键词：猪品种 myf5 SNPs PCR-SSCP 瘦肉率遗传多态性

利用myf5诱导绵羊骨髓间充质干细胞为成肌细胞的研究

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利用Myf5诱导绵羊骨髓间充质干细胞为成肌细胞的研究

作者：王皓东北林业大学

学位级别：硕士

生肌因子5(myf5)为生肌决定因子(MyoD)基因家族。MyoD基因家族包括生肌决定因子MyoD肌细胞生成素(Myogenin)、生肌因子5(myf5)和生肌调节因子4(Mrf4),它们具有单独或协同调节肌细胞的增殖和分化、肌纤维大小和数量等功能。为了建立利用... 详细信息

生肌因子5(myf5)为生肌决定因子(MyoD)基因家族。MyoD基因家族包括生肌决定因子MyoD肌细胞生成素(Myogenin)、生肌因子5(myf5)和生肌调节因子4(Mrf4),它们具有单独或协同调节肌细胞的增殖和分化、肌纤维大小和数量等功能。为了建立利用小鼠myf5基因诱导绵羊骨髓间充质干细胞为成肌细胞的方法,本研究在克隆小鼠myf5基因的cDNA基础上,依次通过克隆载体pMD18-T Simple和表达载体pcDNA3.1(+)相连,构建真核表达载体pcDNA3.1-myf5;采用脂质体法将pcDNA3.1-myf5转染绵羊骨髓间充质干细胞,以观察转染细胞分化形成成肌细胞的能力。其研究结果如下：***5基因真核表达载体的构建参照GenBank (AK044894)中序列,通过PCR扩增提取小鼠肌肉组织中的总RNA,扩增获得myf5基因,与克隆载体pMD18-T Simple相连,通过双酶切和测序鉴定后,与表达载体pcDNA3.1(+)表达载体连接。经双酶切鉴定和测序结果显示,与理论序列相符,表明成功获得myf5基因的真核表达载体pcDNA3.1-myf5;2.骨髓间充质干细胞转染和分化将冷冻保存的绵羊骨髓间充质干细胞,经复苏后进行传代培养,其结果,培养细胞呈现正常的形态和生长曲线;当传代培养后细胞约达到80%汇合时,分别进行下列处理。A组：转染pcDNA3.1-myf5无内毒素质粒,并加入含有0.5%DMSO的F12培养基;B组：转染pcDNA3.1-myf5无内毒素质粒,加入F12培养基;C组：含0.5%DMSO的F12培养基。当转染后第12d开始,在倒置显微镜下,3组转染细胞均呈现成肌细胞样的细管状形态。3.转染细胞生物学检测(1)免疫荧光检测在转染细胞传代培养后的第17d,将上述3种细胞和作为对照未经转染的骨髓间充质干细胞,用兔MyoD、MyoG、DES抗体处理进行免疫荧光检测。其结果,与对照组不发生绿色荧光相比,三组转染细胞均出现绿色荧光;(2)流式细胞筛选在转染细胞传代培养后的第21d,利用BD Accuri-C6个人型流式细胞仪对3组转染细胞进行流式细胞筛选检测,其结果,三组细胞中三种基因表达(Desmin、MyoD、MyoG)都在96.4%以上(A组,98.6%、99.9%、96.9%;B组,99.9%、98.0%、99.1%;C组,97.4%、96.4%、99.9%)(3) Real-Time PCR检测在转染细胞传代培养后的第28d,对上述三种细胞和作为对照的骨髓间充质干细胞采用实时定量PCR检测(选取三对引物分别为MyoG,myf5和Desmin,一组内参引物GAPDH)。其结果,与转染前细胞(标准化为1)相比,上述三种处理组的myf5、MyoG和Desmi的相对表达量与均升高(A组分别为5.126±0.01倍、4.315±0.01倍和3.099+0.01倍;B组分别为4.484±0.01倍、3.124±0.01倍和2.889±0.01倍;C组分别为3.321±0.01倍、2.557±0.01倍和2.712±0.01倍)。上述结果表明,利用小鼠myf5基因构建的pcDNA3.1-myf5真核表达载体可以诱导绵羊骨髓间充质干细胞分化为成肌细胞。为BMSCs在组织工程中的进一步应用提供理论依据和技术支持。

关键词： myf5 绵羊骨髓间充质干细胞诱导成肌细胞

固始鸡—安卡鸡F2代资源群myf5基因多态性研究

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固始鸡—安卡鸡F2代资源群Myf5基因多态性研究

作者：马新红河南农业大学

学位级别：硕士

本研究以我国优质地方蛋肉兼用品种固始鸡和快大型肉鸡安卡鸡为素材,采用PCR-SSCP、DNA测序、CRS-PCR-RFLP等技术,对F代群体中生肌因子5(myf5)基因的遗传多态性进行了研究,并通过最小二乘分析评价了该基因变异位点与主要经济性状的关联... 详细信息

本研究以我国优质地方蛋肉兼用品种固始鸡和快大型肉鸡安卡鸡为素材,采用PCR-SSCP、DNA测序、CRS-PCR-RFLP等技术,对F代群体中生肌因子5(myf5)基因的遗传多态性进行了研究,并通过最小二乘分析评价了该基因变异位点与主要经济性状的关联性。主要结果如下: (1)本研究在鸡的生肌因子5的外显子1上引入MspI酶切位点,MspI酶切位点为C?CGG,相对原序列CCGA突变了一个碱基,在PCR产物中包含这个酶切位点。经测序和序列比对表明,该位点T188C(NC06088)是同义突变,没有引起氨基酸序列的变化。在该群体中AB基因型居多,AA、BB基因型的检出率相对比较低,等位基因A为优势基因, AB基因型为优势基因型。PIC为0.375,属中度多态,经χ2适合性检验,该位点在该群体极显著的偏离了Hardy—weinberg平衡(P5),对2周龄体重和双翅率的影响达到了极显著的水平(Pmyf5基因的编码区即第一外显子区域设计引物,经PCR-SSCP检测后,取PCR产物直接进行测序,共检测到两个变异位点即A533G和T632C(NC06088),此两个突变位点均没引起氨基酸序列的变化,属同义突变。其中CD基因型居多,CC、DD基因型的检出率相对比较低,等位基因C为优势基因,CD基因型为优势基因型。PIC为0.373,属中度多态,经χ2适合性检验,突变位点在该群体中极显著的偏离了Hardy—weinberg平衡(P5),对高密度脂蛋白和盲肠长度的影响达到了极显著的水平(Pmyf5基因不同基因型组合型与重要经济性状的联合分析结果表明,不同基因型组合型对出生重、8周体重、10周体重、12周体重、屠体重、胸肌重、腿重、盲肠长度、高密度脂蛋白和乳酸脱氢酶等指标存在显著性的影响,对胸肌剪切力值和腿肌失水率这两肉质性状指标也存在显著性的影响。以上结果表明,myf5基因对早期的生长性状有显著性的影响,且对其他一些重要的经济性状的影响也达到了显著的水平,因此可将myf5基因作为候选基因进行深入分析。

关键词：鸡 F2资源群体 myf5 CRS-PCR-RFLP PCR-SSCP