检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=MXC3基因"

共 1 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

杨树mxc3基因RNAi载体构建及遗传转化研究

杨树MXC3基因RNAi载体构建及遗传转化研究

引用

作者：熊瑞婷华中农业大学

学位级别：硕士

近年来,杨树叶锈病发生十分严重,导致杨树人工林的生长受到制约,因此培育速生抗病新品种是目前面临的十分紧迫的问题之一。杨树是多年生植物,生长期较长,短时间内很难利用常规育种手段培育出具有目标性状的优良品种。现代基因工程手段... 详细信息

近年来,杨树叶锈病发生十分严重,导致杨树人工林的生长受到制约,因此培育速生抗病新品种是目前面临的十分紧迫的问题之一。杨树是多年生植物,生长期较长,短时间内很难利用常规育种手段培育出具有目标性状的优良品种。现代基因工程手段可对现有优良品种进行抗病性的特异改造,在较短时间内培育出所需的抗病良种。mxc3基因含有Thaumatin family和Protein kinase domain两个功能域,可能在杨树抗叶锈病中起着重要的作用。RNAi(RNA interference)是一种重要的基因沉默技术,广泛应用于植物基因功能和遗传改良研究中。本文以杨树抗锈病mxc3基因为对象,构建其RNAi载体,以南林895杨(Populus×euramericana cv.‘Nanlin895’)作为受体材料,开展了农杆菌介导的杨树遗传转化研究,以期为mxc3基因的功能研究奠定一定理论基础。本研究获得的主要结果如下:1、利用Gateway技术构建了杨树mxc3基因的RNAi表达载体,并成功将其导入农杆菌C58中;2、优化了南林895杨茎段初代培养基:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+0.25%MES+0.2%肌醇;3、以南林895杨的组培苗叶片作为抗锈病基因mxc3转化的受体材料,建立了高效、稳定的遗传转化体系:(1)本试验用卡那霉素(Kan)作为筛选抗生素,筛选出卡那霉素(Kan)的适宜浓度为20mg/L;(2)用农杆菌介导法转化mxc3基因,对影响转化效率的菌液浓度、侵染时间和筛选方式等因子进行研究,得出最优转化条件:去除叶片边缘和主脉,采用远轴面接触培养基的方式,将叶片接种于分化培养基中暗处预培养3d,然后将叶片浸入到OD600值为0.8的菌液里侵染20min,暗处共培养4d,再延迟筛选10d。利用此转化体系,南林895杨抗性芽诱导率最高达到19.39%;(3)用CTAB法提取本试验获得的28株抗性植株的DNA,并进行PCR检测,结果表明有22株呈阳性,初步证明杨树mxc3 RNAi载体整合到南林895杨树基因组中,阳性率达到78.57%;(4)CTAB法提取转基因植株的m RNA,RT-PCR检测结果表明,22株转基因植株的mxc3基因的表达量与对照(未转化植株)相比均有所降低,表明外源基因影响了杨树内源mxc3基因的表达4、采用炼苗移栽的方法进行转基因阳性组培苗移栽,共移栽转基因阳性植株22株,移栽成活19株,成活率达到86.36%。

关键词： mxc3基因 Gateway克隆 RNA干扰南林895杨遗传转化

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共1页 << < 1 > >>

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：