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乳腺浸润性导管癌患者血清PF4、VEGF蛋白表达的临床意义

乳腺浸润性导管癌患者血清PF4、VEGF蛋白表达的临床意义

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作者：张文进河北医科大学

学位级别：硕士

目的:乳腺癌是一种血管依赖性实体肿瘤,它的生长、转移与血管新生密切相关,血管新生受到一系列血管生成调节因子的作用,这些因子控制着血管内皮细胞的生长。血小板第4因子(platelet factor-4,PF4)是一种血小板衍生因子,具有抑制血管生... 详细信息

目的:乳腺癌是一种血管依赖性实体肿瘤,它的生长、转移与血管新生密切相关,血管新生受到一系列血管生成调节因子的作用,这些因子控制着血管内皮细胞的生长。血小板第4因子(platelet factor-4,PF4)是一种血小板衍生因子,具有抑制血管生成的作用。研究证实PF4通过抗血管生成作用,抑制肿瘤的发生和发展,但其在乳腺癌中的表达国内外少有报道。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是一种强有力的,最具特征性的促血管生成因子,在乳腺癌的发生、生长和转移过程中起重要作用。肿瘤组织和外周血中VEGF水平可以作为肿瘤诊断及评估预后的指标。检测外周血中VEGF的水平更方便,更易于临床应用。cd31即血小板内皮粘附因子,可以标记血管内皮细胞,用来检测微血管密度(microverssel density,mvd),能定量反映乳腺癌组织的血管生长情况。本研究通过检测血清中PF4、VEGF浓度及组织中mvd-cd31表达,来了解PF4、VEGF及mvd-cd31在乳腺浸润性导管癌患者中的变化规律,探讨它们之间及与其他各临床病理特征的关系。方法:1研究对象:选取2014年1月—2014年7月在河北医科大学第四医院乳腺中心就诊,经空芯针穿刺,病理证实为乳腺浸润性导管癌患者60例,均为原发性单侧、未接受过化疗、放疗、内分泌治疗和分子靶向治疗,既往无肿瘤病史的患者。术前抽取空腹静脉血2ml,1000r/min离心3分钟,取上层血清置-80℃冰箱中保存待检测。组织标本在离体30分钟内取肿瘤组织、10%中性福尔马林固定,石蜡包埋待检测。同法用30例乳腺良性疾病(乳腺腺病、纤维腺瘤等)患者的血清和乳腺组织作对照。以上样本的采集均通过河北医科大学第四医院伦理委员会审批。2用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中PF4、VEGF蛋白表达,采用美国全自动酶标检测仪VERSAmax,30分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔OD值。根据OD值绘制Log-logit双对数标准曲线,使用logit-log或四参数数据处理模式(采用SOFTmax PRO4.3LS分析软件),由电脑自动计算得出血清PF4,VEGF结果。3组织切片采用免疫组化SP法染色,经抗原热修复,加入一抗,4℃过夜;加入二抗,室温孵育30min;加入三抗;DAB显色;复染,封片。ER、PR的判读参照2010年ASCO/CAP指南。HER-2的判读参照2007年ASCO/CAP指南。mvd-cd31的mvd判读参照Weidner等报道的方法。4统计分析:采用SPSS11.5统计软件,数据经过方差齐性检验均符合正态分布,计量资料采用均数±标准差表示,两组间均数比较用t检验,三组间均数比较用方差分析,两两比较用LSD法。相关性分析使用Person检验。检验水准α=0.05,Pmvd-cd31分别为16.58±9.528和10.40±3.050,二者差异有统计学意义,P=0.005。2乳腺浸润性导管癌患者血清PF4、VEGF之间有显著的相关性,为正相关,r=0.693,P=0.000。血清PF4与mvd-cd31表达无相关性,r=0.01,P=0.947。血清VEGF与mvd-cd31表达无相关性,r=-0.075,P=0.605。3有脉管瘤栓患者的血清PF4表达为0.233±0.089ng/ml,低于无脉管瘤栓者0.396±0.209ng/ml,二者有统计学差异,P=0.009。血清PF4与患者月经状况、肿瘤的大小、TNM分期、组织学分级、淋巴结是否转移、ER、PR、HER-2表达均无相关性,差异均无统计学意义,P>0.05。4血清VEGF与患者月经状况无相关性、血清VEGF与肿瘤的大小、TNM分期、组织学分级、淋巴结是否转移、有无脉管瘤栓、ER、PR、HER-2表达均无相关性,差异均无统计学意义,P>0.05。5 mvd-cd31在直径>2cm的肿瘤组织中表达为21.080±9.358,明显高于直径≤2cm的肿瘤中的12.080±7.455,差异有统计学意义,P=0.000。随着肿瘤TNM分期增高组织中mvd-cd31表达也增高(9.863±5.985,15.304±8.646,22.776±8.348),差异有统计学意义,F=2.983,P=0.002。mvd-cd31与患者月经状况、组织学分级、有无脉管瘤栓、淋巴结是否转移、ER、PR、HER-2表达均无相关性,

关键词：乳腺浸润性导管癌 PF4 VEGF mvd-cd31 血清肿瘤组织

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