检索结果-南通市图书馆

作者：马佩宏云南中医学院

学位级别：硕士

目的:本课题选择云南名中医临床治疗哮喘有效验方——玉屏风散加味方,应用该方干预支气管哮喘小鼠气道重塑病变,检测模型小鼠在使用玉屏风散加味方后肺组织及血清中与气道重塑相关的细胞因子(VEGF、mmp-9、timp-1和TGF-β1等)表达的变化... 详细信息

目的:本课题选择云南名中医临床治疗哮喘有效验方——玉屏风散加味方,应用该方干预支气管哮喘小鼠气道重塑病变,检测模型小鼠在使用玉屏风散加味方后肺组织及血清中与气道重塑相关的细胞因子(VEGF、mmp-9、timp-1和TGF-β1等)表达的变化,以期初步阐明玉屏风散加味方减缓支气管哮喘气道重塑可能的作用机制,为玉屏风散加味方的临床应用提供理论支撑。方法:建立鸡卵清蛋白(OVA)致敏激发的支气管哮喘小鼠模型,采用玉屏风散加味方进行干预。○1按随机原则将受试小鼠随机分为6组,每组8只,分为正常对照组、哮喘模型组、阳性药物对照组、玉屏风散加味方干预高剂量组、中剂量组、低剂量组;○2采用OVA致敏激发的方法建立哮喘小鼠气道重塑模型;○3小鼠肺组织制作病理切片标本染色,观察各组小鼠肺组织结构进行病理学评分并测量肺泡平均内衬间隔(MLI);○4以酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中VEGF、mmp-9、timp-1和TGF-β1的含量,并比较mmp-9/timp-1的比值。结果:1、模型组(B组)小鼠每次OVA雾化激发后均出现:呼吸急促、打喷嚏、口周发绀、烦躁不安、点头呼吸及倦伏等;而正常对照组(A组)无此表现。模型组(B组)小鼠病理切片显示组织支气管及肺泡结构不清晰,气道管壁有大量炎性细胞浸润等病理学改变,正常对照组(A组)小鼠组织支气管及肺泡结构清晰,仅有少量炎性细胞浸润,提示造模成功。2、玉屏风散加味方组小鼠病理切片与模型组比较,标本可见气道上皮杯状细胞增生及肺泡腔间隔扩大、增厚程度不明显。3、玉屏风散加味方组小鼠血清中相关细胞因子(VEGF、mmp-9、timp-1和TGF-β1)的含量较模型组小鼠均有降低,差异显著(Pmmp-9/timp-1的分泌平衡。3、玉屏风散加味方对哮喘气道炎症、气道重塑有一定的调节作用,这一调节的机制可能是通过抑制TGF-β1及VEGF的表达,调节mmp-9/timp-1的分泌平衡达到的。

关键词：哮喘气道炎症气道重塑玉屏风散加味方 TGF-β1 VEGF mmp-9/timp-1

中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化预防作用的实验研究

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中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化预防作用的实验研究

作者：赵田田辽宁医学院

学位级别：硕士

目的通过观察中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响,探讨中药通心络预防糖尿病大鼠心肌纤维化作用的可能机制。方法健康雄性SD大鼠40只,随机取10只作为正常对照(Normal Control,NC)组,余30只尾静脉注射链脲佐菌素(Streptozocin,ST... 详细信息

目的通过观察中药通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的影响,探讨中药通心络预防糖尿病大鼠心肌纤维化作用的可能机制。方法健康雄性SD大鼠40只,随机取10只作为正常对照(Normal Control,NC)组,余30只尾静脉注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ),28只大鼠糖尿病模型制备成功,随机将其分为两组:糖尿病(Diabetes Mellitus,DM)组和通心络(Tong Xinluo,TXL)组,每组各14只。实验用鼠均标准饲料喂养,TXL组给予通心络超微粉(1.43g生药/g干粉)溶于生理盐水中以1.***.kg.d灌胃,NC组与DM组给予等量生理盐水灌胃,共12周。实验末测定各组大鼠血糖水平,光镜下观察心肌组织病理形态学变化,VG胶原染色图像分析仪测量心肌胶原容积分数(Collagen Volume Fraction,CVF)(%);电镜下对比各组大鼠心肌超微结构;免疫组化法检测mmp-9、timp-1、TGF-β蛋白表达水平;Western-Blot检测mmp-9、timp-1、TGF-β蛋白含量。应用SPSS16.0软件系统对实验数据进行分析处理。结果与正常对照组相比,糖尿病组和通心络组实验末血糖值明显升高(P﹤0.01);CVF值明显增大(P﹤0.01);mmp-9、timp-1、TGF-β蛋白表达及含量均明显升高(P﹤0.01),mmp-9/timp-1比值降低(P﹤0.01)。与糖尿病组相比,通心络组实验末血糖值无明显差异(P﹥0.05);CVF值减小(P﹤0.05);mmp-9、TGF-β蛋白表达及其含量均降低(P﹤0.05),timp-1蛋白表达及其含量显著降低(P﹤0.01),mmp-9/timp-1比值显著升高(P﹤0.01);通心络组光镜、电镜下心肌纤维化病理变化明显改善。结论中药通心络可预防糖尿病大鼠心肌纤维化。TGF-β升高、mmp-9/timp-1比值下降可能是糖尿病心肌纤维化发生的机制之一。中药通心络可能是通过下调TGF-β表达,升高mmp-9/timp-1比值,保持心肌间质胶原合成和降解的动态平衡,而抑制糖尿病心肌纤维化的发生。

关键词：通心络糖尿病心肌纤维化 TGF-β1 mmp-9/timp-1

片仔癀对裸鼠原位移植骨肉瘤的作用及机制研究

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片仔癀对裸鼠原位移植骨肉瘤的作用及机制研究

作者：杨德建福建中医药大学

学位级别：硕士

目的：观察片仔癀对裸鼠原位移植骨肉瘤生长及肺脏转移的抑制效应,探讨其抑制骨肉瘤生长及肺转移的机制,为临床应用片仔癀治疗骨肉瘤提供实验依据。方法：1.建立和鉴定自发肺转移的裸鼠骨肉瘤模型：BALB/c-nu/nu裸鼠30只,4周龄,雌性... 详细信息

目的：观察片仔癀对裸鼠原位移植骨肉瘤生长及肺脏转移的抑制效应,探讨其抑制骨肉瘤生长及肺转移的机制,为临床应用片仔癀治疗骨肉瘤提供实验依据。方法：1.建立和鉴定自发肺转移的裸鼠骨肉瘤模型：BALB/c-nu/nu裸鼠30只,4周龄,雌性,体重18±2g,随机分为生理盐水组（n=5）和模型组（n=25）,麻醉后模型组裸鼠右侧胫骨骨髓腔内注射UMR106-01骨肉瘤细胞悬液100ul（5×106个/m1）,生理盐水组裸鼠相同部位注射等剂量生理盐水作为对照组。原位移植后第1、2、3、4、5周末分别随机处死模型组裸鼠5只;观察原位肿瘤生长侵袭、肺转移情况,并取原位瘤块、肺脏组织做病理学检测。2. BALB/c-nu/nu裸鼠32,4周龄,雌性,体重18±2g,采用第一步裸鼠骨肉瘤模型建立的方法造模,裸鼠原位移植1周后随机分为：生理盐水组（n=8）、甲氨蝶呤组（n=8）、片仔癀组（n=8）、联合治疗组（n=8）;观察各组裸鼠一般状况;原位移植后每隔1周测量一次原位肿瘤体积,绘制肿瘤的生长曲线,并计算抑瘤率;给药结束次日剖取4组荷瘤鼠肺脏和原位瘤块,在放大镜下计数肺脏表面转移灶数,并行HE染色病理学观察,通过免疫组化法检测4荷瘤鼠原位瘤块中Survivin、VEGF、mmp-9、timp-1蛋白的表达情况。结果： 1.建立和鉴定自发肺转移的裸鼠骨肉瘤模型：通过原位移植法建立的自发肺转移裸鼠骨肉瘤模型,原位移植1周移植处见肿瘤形成,原位移植5周原位成瘤率为100%及肺转移率为100%,原位瘤块及肺组织病理学观察可见典型的骨肉瘤病理学特征。 2.各组裸鼠一般情况：生理盐水组（A组）裸鼠原位瘤块体积增长显著,裸鼠明显跛行,精神萎靡;甲氨蝶呤组（B组）裸鼠原位瘤块体积增长较慢,裸鼠轻微跛行,精神状态欠佳：片仔癀组（C组）裸鼠原位瘤块体积增长有所减慢,裸鼠跛行,精神状态尚可;联合治疗组（D组）裸鼠原位瘤块体积增长明显减慢,裸鼠轻微跛行,精神状态较好。原位移植5周后生理盐水组、甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组裸鼠原位瘤块体积分别是6.3±0.37cm3、4.74±0.35cm3、5.08±0.55cm3、3.59±0.55cm3,各实验组与生理盐水组相比P＜0.05,甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组荷瘤裸鼠体重两两比较P＜0.05。甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组裸鼠体重分别是24.00±0.33g、25.50±0.33g、27.20±0.21g,与生理盐水组相比P＜0.05;甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组荷瘤裸鼠体重两两比较P＜0.05。 3.抑瘤率情况：甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组抑瘤率分别是24.8%、19.7%、43%,与生理盐水组相比P＜0.05;甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组抑瘤率两两比较P＜0.05。 4.肺脏转移情况：甲氨蝶呤组、片仔癀组、联合治疗组肺表面转移灶数分别是50±1.4个、54±1.6个、44±1.6个,与生理盐水组相比P＜0.05;甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组肺脏表面转移灶数两两比较P＜0.05。 5.各组原位肿瘤Survivin、VEGF、mmp-9、timp-1蛋白的表达情况：甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组Survivin、VEGF、mmp-9蛋白免疫组化平均灰度值比生理盐水组低（P＜0.05）;甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组Survivin、VEGF、mmp-9蛋白免疫组化平均灰度值两两比较P＜0.05。甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组timp-1蛋白免疫组化平均灰度值比生理盐水组高（P＜0.05）;甲氨蝶呤组、片仔癀组和联合治疗组timp-1蛋白免疫组化平均灰度值两两比较P＜0.05。结论： 1.原位移植法建立裸鼠骨肉瘤模型符合临床骨肉瘤特征,造模方法简便,可操作性强,重复性好,成瘤率及肺转移率高,是本实验研究的理想模型。 2.片仔癀与甲氨蝶呤联合应用对原位骨肉瘤有抑制作用。 3.片仔癀对骨肉瘤的肺转移有抑制作用,与甲氨蝶呤联合应用对骨肉瘤肺转移的抑制有协同作用。 4.片仔癀可能是通过抑制Survivin、VEGF、mmp-9蛋白表达,增强timp-1蛋白表达,发挥对骨肉瘤生长及肺转移的抑制效应。

关键词：片仔癀骨肉瘤裸鼠 Survivin VEGF mmp-9/timp-1

钩藤碱对自发性高血压大鼠心脏的保护作用及其机制研究

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钩藤碱对自发性高血压大鼠心脏的保护作用及其机制研究

作者：黄华皖南医学院

学位级别：硕士

目的:观察钩藤碱对自发性高血压大鼠心肌重构过程中的心肌保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:雄性自发性高血压大鼠32只,随机分为SHR模型组(Model)、钩藤碱(Rhynchophylline,Rhy)高、低剂量组(10、2.5mg·kg-1·d-1,n=8)、卡托普利(... 详细信息

目的:观察钩藤碱对自发性高血压大鼠心肌重构过程中的心肌保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:雄性自发性高血压大鼠32只,随机分为SHR模型组(Model)、钩藤碱(Rhynchophylline,Rhy)高、低剂量组(10、2.5mg·kg-1·d-1,n=8)、卡托普利(Captoril,Cap)阳性对照组(17.5mg·kg-1·d-1,n=8)。另设8只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为正常对照组。SHR模型组和WKY正常对照组均给予蒸馏水(5mg·kg-1·d-1,n=8)。每日灌胃给药1次,连续10周,根据体重变化改变给药剂量。分别于给药前和给药后每两周测量尾动脉血压;治疗10周后处死大鼠,于末次给药后称大鼠体重,腹主动脉取血,钝性分离心脏,称取大鼠体重、全心湿重以及左心室湿重,计算全心重量指数(HWI)、左心室重量指数(LVWI);4%多聚甲醛固定心脏,HE染色观察心肌病理学变化,Masson染色观察心肌胶原纤维变化;碱水解法检测心肌中羟脯氨酸(HYP)的含量;放射免疫法测定血浆及心肌中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的含量;硫代巴比妥酸法测定心肌组织丙二醛(MDA)的含量,比色法测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)的含量;生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;免疫组化法测心肌组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3蛋白表达;Western Blot检测心肌TGF-β1、Smad3、Smad7、CTGF、iNOS、mmp-9与timp-l蛋白表达。结果:(1)与WKY正常组相比,模型组SBP、DBP明显升高(Pmmp-9、timp-1蛋白表达以及mmp-9/timp-1的比例显著增高(pmmp-9、timp-1蛋白表达以及mmp-9/timp-1的比例(pmmp-9、timp-1蛋白表达以及mmp-9/timp-1的比值,上调Smad7蛋白表达。

关键词：钩藤碱自发性高血压大鼠 TGF-β1/Smads 氧化应激 mmp-9/timp-1

芝麻素对自发性高血压大鼠肾脏纤维化的改善作用及其机制研究

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芝麻素对自发性高血压大鼠肾脏纤维化的改善作用及其机制研究

作者：宣佳利皖南医学院

学位级别：硕士

目的:观察芝麻素对自发性高血压大鼠肾脏纤维化的改善作用及其机制研究。方法:雄性自发性高血压大鼠(SHR)大鼠28只,体重(220±10)g,随机分为4组,每组7只:芝麻素高剂量组(160 mg·kg-1·d-1)、芝麻素低剂量组(80mg·kg-1·d-1)、卡托普... 详细信息

目的:观察芝麻素对自发性高血压大鼠肾脏纤维化的改善作用及其机制研究。方法:雄性自发性高血压大鼠(SHR)大鼠28只,体重(220±10)g,随机分为4组,每组7只:芝麻素高剂量组(160 mg·kg-1·d-1)、芝麻素低剂量组(80mg·kg-1·d-1)、卡托普利阳性对照组(30 mg·kg-1·d-1)和SHR模型组(0.5%羧甲基纤维素钠5 ml mg·kg-1·d-1)。另设WKY正常对照组(0.5%羧甲基纤维素钠5 ml mg·kg-1·d-1)。按上述设定剂量,每日一次,连续灌胃给药12周。于给药前及给药后每2周用尾袖法测量尾动脉舒张压;12周末称体重、左右肾湿重,计算肾脏重量指数;全自动生化分析仪测定大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)及尿微量白蛋白(mAlb)含量;比色法测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;HE染色和Masson染色分别观察肾脏病理组织学和胶原纤维变化;免疫组化法观察肾脏a-SMA、TGF-β1阳性细胞表达;Western blot法观察肾组织a-SMA、TGF-β1、p47phox、mmp-9、timp-1、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、4EBP1、S6K1、Bax及Bcl-2蛋白表达。结果:①SHR大鼠舒张压明显高于正常组(Pmmp-9、timp-1蛋白表达明显升高(Pmmp-9、timp-1蛋白表达(Pmmp-9/timp-1平衡,上调Bcl-2表达,下调Bax表达,减少细胞凋亡等有关。

关键词：芝麻素自发性高血压大鼠肾脏纤维化氧化应激 AKT/mTOR mmp-9/timp-1 细胞凋亡