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肿瘤坏死因子-α对骨髓源性肥大细胞表达MMP-3、mmp-9、IL-17的影响

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南方医科大学学报 2015年第11期35卷 1633-1637页

作者：陈玉姣欧阳晴晴王然毋静赵进军杨敏南方医科大学南方医院风湿免疫科广东广州510515

目的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对骨髓源性肥大细胞(BMMCs)分泌MMP-3、mmp-9、IL-17的影响。方法原代培养小鼠BMMCs,将培养8周的BMMCs种植于12孔板中。细胞分为4个组:BMMCs+PBS组(对照组)、BMMCs+2 ng/m L TNF-α组(2 ng/m L组)、BMMCs+10 ng/m L TNF-α组(10 ng/m L组)、BMMCs+50 ng/m L TNF-α组(50 ng/m L组),不同浓度TNF-α与BMMCs作用后,在12、24 h收集细胞,用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR),在m RNA水平检测MMP-3、mmp-9、IL-17的表达。结果培养12 h后,2 ng/m L组、10 ng/m L组、50 ng/m L组MMP-3、mmp-9、IL-17 m RNA的表达均高于对照组(PMMP-3 m RNA的表达无差异(P>0.05),其余各组之间MMP-3、mmp-9、IL-17m RNA的表达显著升高(PMMP-3、mmp-9、IL-17,且具有浓度依赖性和时间依赖性。

关键词：骨髓源性肥大细胞肿瘤坏死因子-α MMP-3 mmp-9 IL-17

电针对类风湿关节炎患者关节液中VEGF、MMP-3影响的临床研究

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电针对类风湿关节炎患者关节液中VEGF、MMP-3影响的临床研究

作者：吕昭君南京中医药大学

学位级别：硕士

目的:本次研究主要通过分组对比普通针刺与电针疗法治疗类风湿关节炎的不同疗效,来比较类风湿关节炎患者关节液中VEGF和MMP-3的变化;通过此研究探讨出更加有效的关于类风湿关节炎的针灸治疗方法。通过对比两组实验中患者关节液中细胞因... 详细信息

目的:本次研究主要通过分组对比普通针刺与电针疗法治疗类风湿关节炎的不同疗效,来比较类风湿关节炎患者关节液中VEGF和MMP-3的变化;通过此研究探讨出更加有效的关于类风湿关节炎的针灸治疗方法。通过对比两组实验中患者关节液中细胞因子VEGF和MMP-3的变化,分析其与类风湿关节炎的相关性。同时,也为应用VEGF和MMP-3作为诊断类风湿关节炎的标准提出证据。方法:将60例符合纳入标准的RA患者分为2组。使用随机数字表法分组。治疗组为电针针刺。对照组使用普通针刺。治疗隔日]次,每周治疗3次,每10次为1个治疗区间,共治疗3个治疗区间。统计治疗前后患者的ACR评分（包括关节压痛数、肿胀关节数、VAS视觉模拟分数、健康状况评定表、外周血指标）,关节液中VEGF、MMP-3的数据,评估治疗效果及验证VEGF、MMP-3与疾病的关联性。结果:（1）通过SPSS数据分析,治疗组与对照组在治疗前的性别、年龄、关节压痛数、关节肿胀数、VAS视觉模拟评分、HAQ、外周血指标、关节液中VEGF和MMP-3进行比较,无明显差异,（P＞0.05）,具有可比性。（2）治疗后,两组关节压痛数、肿胀关节数、VAS视觉模拟分数、健康状况评定表、CRP、ESR分别进行组内比较,P均＜0.01,具有差异性。治疗后上述指标除ESR（组间比较P＞0.05）外组间比较P均＜0.05,具有差异性。（3）经治疗后,治疗组ACR判定20%改善以上人数占比96.55%,50%改善以上的人数占比为24.1%。对照组ACR判定20%改善以上的人数占比为93.33%,无50%改善以上的患者。两组组间比较P＜0.05,差异具有统计学意义。（4）治疗后,两组VEGF、MMP-3指标较前均下降（组内的比较P＜0.01）,电针组指标下降更明显（组间比较P＜0.01）。结论:电针与普通针刺均能治疗有效治疗类风湿关节炎,电针效果优于普通针刺。VEGF和MMP-3经治疗后发生了降低,且与其他指标呈正相关。

关键词：电针类风湿关节炎 VEGF MMP-3

Bioresponsive micro-to-nano albumin-based systems for targeted drug delivery against complex fungal infections

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Acta Pharmaceutica Sinica B 2021年第10期11卷 3220-3230页

作者： Liting Cheng Miao-Miao Niu Tong Yana Zhongyi Ma Kexin Huang Ling Yang Xin Zhong Chong Li Medical Research Institute College of Pharmaceutical SciencesSouthwest UniversityChongqing 400715China Key Laboratory of Drug Quality Control and Pharmacovigilance(Ministry of Education) China Pharmaceutical UniversityNanjing 210009China

As a typical human pathogenic fungus,Cryptococcus neoformans is a life-threatening invasive fungal pathogen with a worldwide distribution causing w700,000 deaths annually.Cryptococcosis is not just an infection with multi-organ involvement,intracellular survival and extracellular multiplication of the fungus also play important roles in the pathogenesis of C.neoformans infections.Because adequate accumulation of drugs at target organs and cells is still difficult to achieve,an effective delivery strategy is desperately required to treat these infections.Here,we report a bioresponsive micro-to-nano(MTN)system that effectively clears the C.neoformans in vivo.This strategy is based on our in-depth study of the overexpression of matrix metalloproteinase 3(MMP-3)in infectious microenvironments(IMEs)and secreted protein acidic and rich in cysteine(SPARC)in several associated target cells.In this MTN system,bovine serum albumin(BSA,a natural ligand of SPARC)was used for the preparation of nanoparticles(NPs),and then microspheres were constructed by conjugation with a special linker,which mainly consisted of a BSA-binding peptide and an MMP-3-responsive peptide.This MTN system was mechanically captured by the smallest capillaries of the lungs after intravenous injection,and then hydrolyzed into BSA NPs by MMP-3 in the IMEs.The NPs further targeted the lung tissue,brain and infected macrophages based on the overexpression of SPARC,reaching multiple targets and achieving efficient treatment.We have developed a size-tunable strategy where microspheres"shrink"to NPs in IMEs,which effectively combines active and passive targeting and may be especially powerful in the fight against complex fungal infections.

关键词： Albumin SPARC MMP-3 Size-tunable strategy Microenvironment responsive Complex fungal infection

类风湿关节炎合并肺间质病变患者的血清差异蛋白组学分析

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类风湿关节炎合并肺间质病变患者的血清差异蛋白组学分析

作者：焦薇南昌大学

学位级别：硕士

背景类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种进行性的自身免疫性疾病,以炎症、滑膜增生以及细胞和体液免疫反应异常为主要特点。RA主要累及关节滑膜、软骨和骨质,也可以累及全身多个组织或器官,包括呼吸系统、神经系统、循环系... 详细信息

背景类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种进行性的自身免疫性疾病,以炎症、滑膜增生以及细胞和体液免疫反应异常为主要特点。RA主要累及关节滑膜、软骨和骨质,也可以累及全身多个组织或器官,包括呼吸系统、神经系统、循环系统等。研究表明,RA在肺部受累的发病率高达47%。常见的疾病有间质性肺病(Interstitial lung disease,ILD)、类风湿结节、类风湿尘肺、胸膜病变和气道病变等。其中,ILD被认为是RA的常见并发症之一,治疗效果往往不理想,死亡率高,且ILD早期发病隐匿而易被忽略,严重影响患者的生存预后。因此,检测与RA-ILD相关的生物标志物对于早期发现、及时诊治和促进预后非常重要。近年来,蛋白组学技术逐渐应用于探索自身免疫疾病的致病机制及寻找诊断疾病的分子标记蛋白,为诊断和监测RA疾病活动等方面提供了数据支持。但目前国内外关于RA合并ILD的相关蛋白组学数据仍然较少。目的筛选和验证可提示RA合并ILD发生、发展的临床特异性血清蛋白标志物,探讨这些标志物对RA合并ILD的诊断价值。方法采集南昌大学第二附属医院2021年11月至2022年11月住院治疗的5例初发单纯RA患者,5例初发RA合并ILD患者的外周静脉血,采用串联质量标签(Tandem mass tag,TMT)定量蛋白质组学技术和液相色谱串联质谱(Liquid chromatograph mass spectrometer,LC-MS/MS)技术筛选出差异蛋白。我们对鉴定到的蛋白,采用基因本体论(Gene ontology,GO)数据库提取各注释信息,从生物过程、细胞组分、分子功能三个方面挖掘蛋白功能,利用京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)数据库分析蛋白参与的代谢通路,在基因/蛋白相互作用检索搜查工具(Search tool for the retrieval of interacting genes/proteins,STRING)数据库中挖掘差异蛋白之间的互作关系,以确定潜在的RA合并ILD生物标志物。通过酶联免疫吸附测定(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法对14例初发单纯RA和13例RA合并ILD患者的血清进行验证实验。使用IBM SPSS Statistics软件和Graph Pad Prism 8对数据进行统计学分析,以双侧检验P3(Matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、血管性血友病因子(Von willebrand factor,VWF)、血管紧张素原(angiotensinogen,AGT)和层粘连蛋白亚基α2(laminin subunit alpha 2,LAMA2)四种蛋白在RA合并ILD患者的血清中差异表达,可能与RA合并ILD的发病机制有关。3.利用ELISA方法验证以上四种蛋白在单纯RA组与RA合并ILD组患者中的表达,其中MMP-3和VWF两个蛋白在RA合并ILD组中高于对照组,差异有统计学意义(P=0.025,P=0.027)。MMP-3与VWF呈正相关(r=0.4402,P=0.0216)。采用ROC曲线分析,MMP-3的AUC为0.7592,敏感度及特异度分别为46.2%和92.9%;VWF的AUC为0.7527,敏感度和特异度为100.0%和50.0%。MMP-3和VWF联合诊断RA合并ILD的AUC为0.8022,敏感度为76.9%,特异度为78.6%。结论蛋白组学技术在筛选RA合并ILD患者的生物标志物中有重要价值,MMP-3和VWF与RA并发ILD的发病机制有关,两者联合诊断可作为判断RA患者是否合并ILD的参考指标。

关键词：类风湿性关节炎肺间质病变蛋白组学 MMP-3 VWF

右归丸联合中药熏蒸治疗肾阳虚型老年膝骨关节炎及其对关节液中OPN、S100A12及MMP-3的影响研究

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辽宁中医杂志 2023年第11期50卷 113-116页

作者：孙思东黄群辽宁中医药大学附属第二医院辽宁沈阳110034 辽宁中医药大学附属医院辽宁沈阳110032

目的探讨右归丸联合中药熏蒸治疗肾阳虚型老年膝骨关节炎及其对关节液中骨桥蛋白(OPN)、钙结合蛋白(S100A12)及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法选用2018年1月—2020年5月老年肾阳虚型膝骨关节炎患者89例,将其作为观察对象。随机编... 详细信息

目的探讨右归丸联合中药熏蒸治疗肾阳虚型老年膝骨关节炎及其对关节液中骨桥蛋白(OPN)、钙结合蛋白(S100A12)及基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法选用2018年1月—2020年5月老年肾阳虚型膝骨关节炎患者89例,将其作为观察对象。随机编号的方法分为对照组42例和联合组47例,全部完成治疗和随访。联合组选用右归丸联合中药熏蒸治疗;对照组选用常规疗法,持续治疗4周。比较两组患者的临床疗效,治疗前后分别记录骨关节炎调查量表(WOMAC)、视觉模拟量表评分(VAS)、生存质量测定量表(QOL-BREF)和关节液中OPN、S100A12、MMP-3的水平。结果与对照组比,联合组治疗2周、治疗4周WOMAC评分、VAS评分和QOL-BREF评分较低,差异有统计学意义(PMMP-3水平较低,差异有统计学意义(P34/42),差异有统计学意义(P0.05)。结论右归丸联合中药熏蒸治疗肾阳虚型老年膝骨关节炎的疗效确切,可以降低关节液中OPN、S100A12、MMP-3水平,从而提高生活质量,值得大力推广。

关键词：右归丸中药熏蒸肾阳虚型老年膝骨关节炎 OPN S100A12 MMP-3

火针对兔膝骨关节炎血清中MMP-3、mmp-13及关节软骨中β-catenin表达的影响

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火针对兔膝骨关节炎血清中MMP-3、MMP-13及关节软骨中β-catenin...

作者：袁佳梦内蒙古医科大学

学位级别：硕士

目的观察火针针刺犊鼻、内膝眼两穴对兔膝骨性关节炎模型血清中MMP-3、mmp-13及关节软骨中β-catenin表达的影响,以此初步探讨火针治疗KOA的疗效和作用机理,以及Wnt/β-catenin信号通路与其下游相关因子MMP-3、mmp-13之间的关系。方法4... 详细信息

目的观察火针针刺犊鼻、内膝眼两穴对兔膝骨性关节炎模型血清中MMP-3、mmp-13及关节软骨中β-catenin表达的影响,以此初步探讨火针治疗KOA的疗效和作用机理,以及Wnt/β-catenin信号通路与其下游相关因子MMP-3、mmp-13之间的关系。方法40只日本大耳白兔随机分为空白组、模型组、毫针对照组和火针治疗组,每组10只。除空白组外,其余3组均运用Videman法建立兔KOA模型。造模成功后,毫针对照组每日予常规毫针针刺犊鼻、内膝眼、梁丘、血海治疗,火针治疗组隔1日予火针刺激犊鼻、内膝眼治疗,空白组和模型组不干预。治疗2周后,用酶联免疫法检测血清中MMP-3、mmp-13的浓度,处死实验兔,观察右膝关节软骨情况,切取膝关节软骨做标本,用于HE染色和免疫组化检测软骨中β-catenin的浓度。实验数据使用IBM SPSS Statistics 22.0和Graph Pad Prism 6.0进行统计分析。结果1.观察膝关节情况:（1）空白组兔膝关节正常,无肿胀、粘连,软骨光滑明亮完整。（2）模型组兔膝关节肿胀明显、多处粘连,软骨粗糙无光泽,部分软骨变薄,严重者有明显缺损和裂隙。（3）毫针对照组和火针治疗组,两组之间肉眼观察无明显差异,但情况均优于模型组,膝关节肿胀及粘连者较少,软骨呈浅白色,表面完整程度明显较模型组好,关节边缘较整齐。2.关节软骨HE染色结果及光镜下Mankin’s评分:（1）空白组软骨细胞排列均匀,形态呈正常的圆形,细胞核染色均匀,基质无失染。（2）模型组软骨细胞数目明显减少、排列紊乱、分布不均,可见细胞成簇出现,软骨细胞固缩坏死严重,空泡多。（3）毫针对照组和火针治疗组软骨细胞分布较模型组均匀、排列尚整齐,偶可见细胞成簇出现,软骨细胞基本正常,偶有软骨细胞固缩坏死或空泡,整体情况较模型组好。（4）Mankin’s评分显示模型组评分较空白组显著升高（P＜0.01）,毫针对照组、火针治疗组评分较空白组高（P＜0.01）,但显著低于模型组（P＜0.01）,毫针对照组和火针治疗组相较差异无统计学意义（P＞0.05）。3.血清中MMP-3、mmp-13的浓度:模型组浓度较空白组显著升高（P＜0.01）,毫针对照组、火针治疗组浓度较空白组高（P＜0.01）,但显著低于模型组（P＜0.01）,火针治疗组相较于毫针对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。4.关节软骨中β-catenin的表达情况:模型组阳性表达率较空白组显著升高（P＜0.01）,毫针对照组、火针治疗组阳性表达率较空白组高（P＜0.05）,但显著低于模型组（P＜0.01）,火针治疗组相较于毫针对照组差异无统计学意义（P＞0.05）。结论1.火针针刺治疗膝骨性关节炎效果明确,相较于毫针治疗火针治疗取穴少、治疗次数少,在患者的依存性和连续治疗性上相对更有优势,这也为火针治疗KOA的临床运用提供了依据。2.火针治疗可以降低血清中MMP-3、mmp-13的浓度且降低软骨中β-catenin的表达,其机制可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路,减少其下游MMP-3、mmp-13的表达,从而解缓膝关节退行性病变的进程。

关键词：膝骨性关节炎火针 MMP-3 mmp-13 β-catenin

腰椎间盘突出症患者血清MMP-3、PGE_(2)、IL-1β与疼痛的相关性分析

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中国医学创新 2022年第22期19卷 157-160页

作者：洪启龙王冬连余冬香江西省乐平市中医医院江西乐平333300

目的:分析腰椎间盘突出症患者血清基质金属蛋白酶3(MMP-3)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))、白介素-1β(IL-1β)与疼痛的相关性。方法:选择2019年5月-2021年5月于乐平市中医医院骨科诊治的腰椎间盘突出症患者80例作为观察组,选择同期于本院进... 详细信息

目的:分析腰椎间盘突出症患者血清基质金属蛋白酶3(MMP-3)、前列腺素E_(2)(PGE_(2))、白介素-1β(IL-1β)与疼痛的相关性。方法:选择2019年5月-2021年5月于乐平市中医医院骨科诊治的腰椎间盘突出症患者80例作为观察组,选择同期于本院进行体检的57例健康成年人作为对照组。比较两组血清MMP-3、PGE_(2)、IL-1β水平;根据视觉模拟评分(VAS)将80例腰椎间盘突出症患者分为轻度疼痛组(≤3分)、中度疼痛组(4~6分)、重度疼痛组(7~10分),比较不同疼痛程度腰椎间盘突出症患者血清MMP-3、PGE_(2)、IL-1β水平,并进一步分析三项指标与VAS评分的相关性。结果:与对照组相比,观察组MMP-3、PGE_(2)、IL-1β水平均显著升高(PMMP-3、PGE_(2)、IL-1β均显著升高(PMMP-3、PGE_(2)、IL-1β均显著升高(PMMP-3、PGE_(2)、IL-1β水平均与VAS评分呈正相关(r=0.643、P308、P=0.006)。结论:腰椎间盘突出症患者血清MMP-3、PGE_(2)、IL-1β均显著上调,且与患者疼痛程度密切相关,可为临床治疗腰椎间盘突出症提供参考。

关键词：腰椎间盘突出症 MMP-3 PGE_(2) IL-1β 疼痛

Expression and significance of mmp3 in synovium of knee joint at different stage in osteoarthritis patients

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Asian Pacific Journal of Tropical Medicine 2014年第4期7卷 297-300页

作者： Jun-Jie Chen Jie-Feng Huang Wen-Xi Du Pei-Jian Tong Department of Orthopedics First Hospital Affiliated to Zhejiang University of Traditional Chinese Medicine

Objective:To investigate the expression and significance of MMP-3 in synovium of knee joint at different stage in osteoarthritis(OA)patients.Methods:Knee synovial tissue were collected in90 OA patients(the OA group).Patients in the OA group was divided into 3 subgroups:gradeⅠsubgroup(n=30),gradeⅡsubgroup(n=30),gradeⅢsubgroup(n=30).Thirty patients served as control group,lmmunohistochemical assay was used to detect the expression of MMP-3 protein in the knee synovial tissue.Results:MMP-3 protein was detected in all knee synovial tissue.The expression of MMP-3 protein in the OA group was significantly higher that in the normal synovium(PMMP-3 protein was mainly located in the cytoplasm.There was significant difference in the expression of MMP-3 protein between the gradeⅢsubgroup and the gradeⅠ,gradeⅡsubgroups(all PMMP-3 protein was positively related to the severity of OA(r=0.912,PMMP-3 protein are closely related to pathogenic mechanism of OA.It may be an important indicator of early diagnosis and the activity of the disease of osteoarthritis.

关键词： Osteoarthritis MMP-3 Immunohistochemical

不同疾病分期强直性脊柱炎患者外周血DKK-1、MMP-3、TNF-α和IL-6的表达及治疗前后水平变化

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现代免疫学 2020年第4期40卷 300-305页

作者：刘小莉张红梅唐敏张静邹明黄玉霞四川省骨科医院检验科成都610041

为探讨Dickkopf-1(DKK-1)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP-3)、TNF-α和IL-6在强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者外周血的表达情况及与疾病分期的相关性和中西医结合治疗前后的变化,选取2017年1月至2018年6月在四川省骨科医院初诊为AS的患者40例(病例组),并选取同期健康体检者40例(对照组)。所有患者随访12周,检测分析基线水平(第0周)、治疗第6周、12周及对照组血清DKK-1、MMP-3、TNF-α和IL-6水平,绘制受试者工作曲线(receiver operating curve,ROC),探讨各项指标在AS患者中的诊断价值。结果显示,患者组DKK-1水平低于对照组,MMP-3、TNF-α和IL-6的表达水平高于对照组,差异有统计学意义(PMMP-3、TNF-α和IL-6水平差异有统计学意义(P0.05)。AS患者血清DKK-1、MMP-3和TNF-α水平与IL-6水平呈正相关(r值依次为0.388、0.482和0.373,均PMMP-3、TNF-α和IL-6单独检测诊断AS的AUC分别为0.670、0.653、0.818和0.745,灵敏度分别为87.50%、80.00%、47.50%和62.50%,特异度分别为40.00%、47.50%、90.00%和92.50%。四项指标联合诊断AS的AUC为0.881,敏感度和特异度分别为70.00%和87.50%。由此,该4项指标可作为AS患者早期诊断及评判疗效的参考,其联合检测可提高AS诊断的敏感度和特异度。

关键词：强直性脊柱炎 DKK-1 MMP-3 TNF-α IL-6