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MicroRNA-149 Regulates Proliferation,Migration,and Invasion of Pituitary Adenoma Cells by Targeting ADAM12 and mmp14

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Current Medical Science 2022年第6期42卷 1131-1139页

作者： Zhuo ZHANG Agnes Schäfer Benjamin Voellger Jun-wen WANG Ting LEI Christopher Nimsky Jörg W.Bartsch Department of Neurosurgery Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhan430030China Department of Neurosurgery Philipps University MarburgBaldingerstrasseMarburg35033Germany Sino-German Neuro-Oncology Molecular Laboratory Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhan430030China Center for Mind Brainand BehaviorHans-Meerwein-Strasse 6Marburg35032Germany

Objective Pituitary adenomas(PAs)can adapt an aggressive phenotype by invading adjacent brain structures with rapid cellular proliferation.Previous studies demonstrated that excessive expression of metalloproteases ADAM12 and MMP-14 is instrumental for the active proliferation and invasiveness of PA cells in vitro and of tumors in vivo.However,the mechanisms regulating ADAM12 and MMP-14 expression in PAs remain unclear.Methods Target gene prediction and transcriptomic profiling of invasive vs.noninvasive human PA samples were performed to identify miRNA species potentially involved in the regulation of ADAM12 and mmp14.For cellular analyses of miRNA functions,two mouse PA cell lines(AtT20 and TtT/GF)were transfected with miR-149-3p and miR-149-5p,respectively.The effects of miR-149(3p and 5p)on expression levels of ADAM12 and mmp14 were determined by Western blotting followed by an analysis of proliferation and colony formation assays,scratch migration assays,and invasion assays.Results A significant downregulation of miRNA-149 was observed in invasive vs.noninvasive PA(0.32 vs.0.09,P149(3p and 5p)caused a significantly reduced cell proliferation and matrigel invasion,whilst the effect on cell migration was less pronounced.Both strands of miRNA-149(3p and 5p)markedly reduced protein levels of ADAM12 and MMP-14 by at least 40%in both cell lines.Conclusion This study proved that the invasiveness of PA cells is,at least partly,regulated by miRNA-149-dependent expression of ADAM12 and MMP-14.

关键词： pituitary adenoma microRNA miRNA-149 ADAM12 MMP-14 invasion

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促血管和血管拟态生成因子VEGFA、MMP-14在肺腺癌中的表达及临床意义

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安徽医科大学学报 2023年第7期58卷 1171-1177页

作者：李辉黄俊峰周静周廷栋陈礼文安徽医科大学第二附属医院检验科合肥230601 安徽医科大学附属阜阳医院检验科阜阳236112

目的探讨经典血管内皮生长因子A(VEGFA)和促血管拟态生成因子基质金属蛋白酶14(MMP-14)在肺腺癌中表达及临床意义。方法采用TCGA和UALCAN数据库分析肺腺癌MMP-14和VEGFA基因及蛋白表达水平及其与生存预后的相关性。收集69例肺腺癌患者... 详细信息

目的探讨经典血管内皮生长因子A(VEGFA)和促血管拟态生成因子基质金属蛋白酶14(MMP-14)在肺腺癌中表达及临床意义。方法采用TCGA和UALCAN数据库分析肺腺癌MMP-14和VEGFA基因及蛋白表达水平及其与生存预后的相关性。收集69例肺腺癌患者及20例健康受试者(对照组)血清,分别采用ELISA和化学发光法检测MMP-14和VEGFA含量,分析二者与肿瘤临床病理学特征相关性及对肺腺癌的预测、诊断价值。结果肺腺癌组织和血清中MMP-14和VEGFA水平均高于对照组。肺腺癌早期组、晚期组和对照组血清VEGFA和MMP-14表达水平差异均有统计学意义(PMMP-14在T3/T4期高于T1/T2分期(P=0.045),N2/N3期高于N0/N1期(P=0.035),胸膜转移组高于未转移组(P=0.034)。VEGFA在M1期高于M0期(P=0.025)。VEGFA水平升高为肺腺癌的危险因素(P=0.002)。MMP-14、VEGFA和癌胚抗原(CEA)单项诊断肺腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.793、0.849、0.851,三项联合检测AUC为0.952。MMP-14、VEGFA低表达组的总生存期(OS)和疾病特异生存期(DSS)均长于MMP-14、VEGFA高表达组。结论MMP-14和VEGFA在肺腺癌中高表达,分别与肺腺癌的生长、侵袭和转移有关,并对生存预后判断有一定意义。

关键词：肺腺癌 VEGFA MMP-14 诊断效能生物信息分析生存预后

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冠心病患者CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14血浆含量与冠状动脉狭窄程度的相关性分析及预测价值

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华中科技大学学报（医学版） 2022年第1期51卷 88-94页

作者：郭娜赵凯金珊王成燕沈西华蔡文平段军仓刘克坚庞丽娟石河子大学医学院第一附属医院病理科/国家卫生健康委中亚高发病防治重点实验室/石河子大学医学院病理学系/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832002 浙江省金华市中心医院心内科金华321000 石河子大学医学院第一附属医院心内科石河子832002

目的借助生物信息学分析和临床样本检测,探究人血浆白细胞分化抗原(CD8)、程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)、细胞程序性死亡配体-1(programmed cell death ligand-1,PD-L1)、转化生长因子-β_(1)(transforming growth factor-β_(1),TGF-β_(1))和膜型基质金属蛋白酶-1(membrane type 1 matrix metalloproteinase, MT1-mmp,又名MMP-14)与冠心病发病过程及冠状动脉狭窄程度的相关性,为冠心病的早期筛查及预测提供新的思路。方法通过生物信息学分析,对CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14进行GO和KEGG通路富集分析,并构建各分子间PPI网络图。选取39例冠心病患者作为研究对象,根据Gensini评分系统将其冠状动脉狭窄程度分为轻、中、重3组,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14血浆含量,并分析各分子血浆含量与患者Gensini评分的相关性,评估其对冠心病发病的预测价值。结果 GO和KEGG通路富集分析显示CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14可作用于冠心病及其炎症反应通路,PPI网络分析显示各分子间具有一定相互作用关系。PD-L1血浆含量与Gensini评分呈显著正相关。CD8、PD-1、TGF-β_(1)、MMP-14与Gensini评分线性关系不显著,但是从趋势上看PD-1及MMP-14血浆含量与Gensini评分存在正相关趋势,CD8及TGF-β_(1)与Gensini评分存在负相关趋势。结论 CD8、PD-1、PD-L1、TGF-β_(1)、MMP-14可联合作用于冠心病的发生发展过程,各分子血浆含量与冠状动脉狭窄程度存在一定程度相关,可能作为冠状动脉狭窄程度的预测指标。

关键词： CD8 PD-1/PD-L1 TGF-β_(1) MMP-14 冠心病

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MMP-14在相关肿瘤中的研究进展

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中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生 2023年第7期 0047-0052页

作者：游夏毅战鹏王爽殷国英佳木斯大学附属第一医院黑龙江佳木斯154000

肿瘤的发生是多基因,多级调控的病理过程,基质金属蛋白酶(mmps)家族在肿瘤侵袭和转移过程发挥重要作用,其中的MMP-14是 mmps 家族的重要成员,属于膜结合的mmp,在多种肿瘤中高表达,可以降解细胞外基质,与上皮-间质转化,肿瘤微环境等密切... 详细信息

肿瘤的发生是多基因,多级调控的病理过程,基质金属蛋白酶(mmps)家族在肿瘤侵袭和转移过程发挥重要作用,其中的MMP-14是 mmps 家族的重要成员,属于膜结合的mmp,在多种肿瘤中高表达,可以降解细胞外基质,与上皮-间质转化,肿瘤微环境等密切相关,但其具体调控机制仍需进一步探究。本文就MMP-14的分子生物学及在各种肿瘤的最新研究进展进行综述,为其在未来功能机制的深入研究及治疗策略提供参考。

关键词： MMP-14 肿瘤治疗靶点

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桑葚水提物调控miR-139/MMP-14促BMSCs成软骨分化

桑葚水提物调控miR-139/MMP-14促BMSCs成软骨分化

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作者：谢芳芳广州中医药大学

学位级别：硕士

目的:骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是全世界60岁以上人群中最普遍的关节疾病,已成为第四大致残性疾病,严重影响了患者的生活质量。随着我国老年人口的不断增多,必将大大增加了整个社会的经济负担。目前临床上OA的治疗主要是减轻关节疼... 详细信息

目的:骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是全世界60岁以上人群中最普遍的关节疾病,已成为第四大致残性疾病,严重影响了患者的生活质量。随着我国老年人口的不断增多,必将大大增加了整个社会的经济负担。目前临床上OA的治疗主要是减轻关节疼痛、延缓OA的发展进程,并未从根本上治愈OA。近年来,有研究者提出通过移植软骨细胞代替凋亡的软骨细胞来治疗OA,但由于软骨细胞获取困难、体外培养不再产生软骨特异性基质等自身局限,限制了该策略在临床的应用。随着干细胞应用于临床多种疾病的治疗,研究者们开始探索将其应用于OA的治疗。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一种来源于中胚层的一类成体干细胞。它不仅参与胚胎时期软骨的发生与形成,出生后BMSCs仍保持着分化为软骨细胞的能力,OA的发生与BMSCs定向分化为软骨细胞的能力退化有关。因此,促进BMSCs成软骨分化,利用BMSCs源性软骨细胞来修复OA的受损软骨是一种新的治疗思路。已经发现某些细胞因子能促BMSCs成软骨细胞分化,因此在培养体系中添加特定的生长因子,或者进行基因转染可促进BMSCs向软骨细胞分化,但是,生长因子价格昂贵、半衰期短、转基因存在生物安全性问题等问题限制了其进一步应用。因此,寻找安全、有效诱导的方法促BMSCs成软骨细胞分化是一个关键。补肾中药可通过调控micro RNAs(miRNAs)促BMSCs成软骨细胞分化。中医认为OA属于“骨痹”范畴,其本在肾。补肾中药可以滋养肝肾、濡养骨骼来治疗OA。BMSCs属于肾精,是补肾中药重要的靶细胞。中医药治疗疾病具有多成分、多靶点的优势,这种作用本身具有正负反馈调节,可实现促促BMSCs成软骨细胞分化而不过度。目前的研究已证实,miRNA通过调控靶mRNA,可促进或抑制BMSCs成软骨细胞分化过程。因此,研究补肾中药通过影响miRNAs的表达调控BMSCs成软骨细胞分化不失为一种具有中医药特色和优势的OA治疗方法。前期预实验发现,药食同源的代表性补肾中药桑葚的水提物可促进BMSCs向软骨细胞分化,并影响部分miRNAs的表达,本研究选取其中下调最显著的miR-139深入研究其对BMSCs向软骨细胞分化的调控机制,并探讨miR-139对BMSCs体内异位软骨分化的影响。方法:1.取SD大鼠的股骨、胫骨,采用全骨髓贴壁培养法获取BMSCs,选取长势良好的BMSCs增殖、传代、冻存,并用于后续实验。2.Cell Counting Kit-8(CCK 8)法检测桑葚水提物对BMSCs增殖的影响。实验分组为Blank组以及不同浓度桑葚水提物作用组,48 h后酶标仪检测各组吸光值。3.初步探讨桑葚水提物促BMSCs成软骨细胞分化效果。实验分组分Blank组和不同浓度(30 μg/mL、60 μg/mL、120 μg/mL)桑葚水提物诱导组,诱导7 d后,分别采用免疫荧光实验观察和Western Blot实验定量早期成软骨细胞分化相关蛋白Sox9、Collagen Ⅱ 的表达。4.RT-qPCR筛选表达有差异的miRNAs。实验分组为Blank组和60μg/mL桑葚水提物诱导组,作用7d后,提取细胞总RNA,RT-qPCR检测miR-139的mRNA含量。5.利用脂质体lip3000将miR-139的mimic、inhibitor及其相应的阴性对照(Negative Control,NC)序列转染到BMSCs中,加桑葚水提物作用7 d后分别采用免疫荧光实验观察和Western Blot、RT-qPCR实验定量早期成软骨细胞分化相关蛋白Sox9、Collagen Ⅱ 的表达。6.通过生物学信息分析预测miR-139的靶基因,构建具有MMP-14-3’ UTR与miR-139结合位点的野生型或者突变型的荧光素酶报告质粒,并与miRNA转染至BMSCs,检测荧光素酶活性来验证miR-139与MMP-14的靶向关系。然后转染miRNA,分别提蛋白、RNA,检测过表达miR-139、抑制miR-139对预测的靶基因MMP-14是否有影响。7.用Western Blot实验筛选出MMP-14的最佳干扰片段,将其转染至BMSCs,加桑葚水提物作用7 d后,分别提取细胞总蛋白Western Blot检测早期成软骨细胞分化相关蛋白Sox9、Collagen Ⅱ的表达。提取细胞总RNA检测,RT-qPCR检测敲降靶基因MMP-14之后miR-139的表达水平是否有变化。8.将转染了 miR-139 mimic、inhibitor的BMSCs移植至6-8 w裸鼠的双侧肩胛部皮下,21 d后取材,常规石蜡切片,免疫组织化学技术检测早期成软骨细胞分化相关蛋白Sox9、Collagen Ⅱ的表达情况。结果:1.全骨髓贴壁法提纯的BMSCs,P3代BMSCs显微镜下呈长梭形、旋涡状排列,其大小均匀长势良好,可用于

关键词：桑葚水提物 miR-139 MMP-14 骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化

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转化生长因子（TGF-β1）、膜型金属基质蛋白酶（MMP-14）、P38 MAPK对继发性冻结肩的影响及作用机制研究

转化生长因子（TGF-β1）、膜型金属基质蛋白酶（MMP-14）、P38 M...

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作者：王盼盼苏州大学

学位级别：硕士

目的:本研究通过关节镜下获取继发性冻结肩患者肩峰下滑膜,肩峰下滑膜成纤维细胞原代培养,冻结肩大鼠动物模型制作,探讨继发性冻结肩发病的病理机制,以及进一步探索TGF-β1、MMP-14、与MAPK通路对继发性冻结肩患者肩峰下滑膜增生、血管... 详细信息

目的:本研究通过关节镜下获取继发性冻结肩患者肩峰下滑膜,肩峰下滑膜成纤维细胞原代培养,冻结肩大鼠动物模型制作,探讨继发性冻结肩发病的病理机制,以及进一步探索TGF-β1、MMP-14、与MAPK通路对继发性冻结肩患者肩峰下滑膜增生、血管形成的影响及作用机制。为继发性冻结肩的防治开辟新思路及新途径。方法:1.关节镜下获取继发性冻结肩患者及正常患者肩峰下滑膜,通过Western Blot,,免疫组化,PCR技术检测相关蛋白及基因（TGF-β1,MMP-14,P38MAPK,VEGF）在继发性冻结肩患者肩峰下滑囊中的表达情况,初步探讨相关基因对肩峰下滑膜增生及血管形成的影响及作用机制。2.获取肩峰下滑囊成纤维细胞进行原代培养,通过TGF-β1细胞因子不同浓度诱导原代成纤维细胞,运用Western Blot,,PCR技术检测MMP-14,P38 MAPK,VEGF相关蛋白及基因的表达情况,进一步探讨相关基因对肩峰下滑膜增生及血管形成的影响及作用机制。3.通过人为将大白鼠肩袖损伤,制作继发性冻结肩模型,12周后通过Western Blot,PCR技术检测肩关节周围滑膜组织相关蛋白及基因的表达情况,进一步验证相关基因对肩峰下滑膜组织增生及血管形成的影响及作用机制。结果:1.关节镜下可见冻结肩患者较正常人肩峰下滑膜增生、血管形成增多,冻结肩患者肩峰下滑膜组织中TGF-β1、MMP-14,P-P38 MAPK,VEGF相关基因表达较正常患者增多。2.成纤维原代细胞到2-3代后达到稳定状态,通过tgf-β1细胞因子不同浓度梯度（0,5,10,20ng/ml）诱导原代细胞,随着浓度的加大成纤维细胞增殖越快。Western Blot,PCR检测显示p-p38,MMP-14,vegf增多,随着浓度的增加,基因表达增多越明显。3.继发性冻结肩大鼠损伤侧肩关节滑膜组织较健侧tgf-β1,p-p38,MMP-14,vegf基因表达明显增多,随着时间的推移其增加趋势更加明显。结论:1.继发性冻结肩患者肩峰下滑膜增生,血管形成增多,是造成患者肩关节囊及周围组织纤维化、肩关节活动受限的重要原因。2.冻结肩患者肩峰下滑膜增生,血管形成增多与tgf-β1、MMP-14及MAPK通路有一定关系,tgf-β1增多通过诱导MAPK通路中P-P38增多,从而使肩峰下滑膜成纤维细胞增殖,组织成纤维化粘连,组织缺氧炎症加重,血管内皮细胞增殖,血管形成增多,造成冻结肩症状,另外一方面tgf-β1可以上调MMP-14,造成mmp/Timp平衡紊乱,促进成纤维细胞增殖,血管形成增多,组织纤维化粘连进一步加重,最终造成继发性冻结肩症状。

关键词：继发性冻结肩肩峰下滑膜增生血管生成 tgf-β1 MAPK通路 P-P38 MMP-14 vegf

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KAI1、Slug及MMP-14与结直肠癌转移侵袭的关系及临床意义

KAI1、Slug及MMP-14与结直肠癌转移侵袭的关系及临床意义

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作者：王梦慧蚌埠医学院

学位级别：硕士

目的:KAI1和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）调节因子Slug以及基质金属蛋白酶-14（matrixmet-alloproteinase-14,MMP-14）在许多恶性肿瘤的转移和预后的过程中起重要作用。探讨KAI1、Slug和MMP-14在结直肠癌中的表达与结直肠癌患者临床病理特征、转移及预后的关系,为结直肠癌患者的治疗及预测预后提供一定的实验依据。方法:收集蚌埠医学院第一附属医院病理科自2012-2013年有完整的临床和病理资料的结直肠癌组织蜡块标本134例,选取病理证实为阴性的正常结直肠粘膜组织蜡块50例作为对照。用免疫组化方法检测上述组织中KAI1、Slug和MMP-14的表达以及结直肠癌组织中E-cadherin（E-cad）和vimentin的表达,探讨KAI1、Slug和MMP-14表达之间的相关性及其与结直肠癌患者分期、分级、淋巴结转移、远处转移和预后的关系。结果:1.结直肠癌组织中KAI1、Slug和MMP-14表达率分别为32.8%、44.8%、61.2%,正常粘膜组织中表达率分别为52.0%、18.0%、16.0%,三者在结直肠癌和正常组织中的表达差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.结直肠癌组织中,KAI1的表达与肿瘤浸润深度、分化程度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期呈负相关（P＜0.05）;Slug的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、远处转移和TNM分期呈正相关（P＜0.05）;MMP-14的表达与淋巴结转移、远处转移和TNM分期其呈正相关（P＜0.05）。3.结直肠癌组织中,KAI1的表达与Slug的表达呈负相关（r=-0.438,P＜0.001）;KAI1的表达与MMP-14的表达呈负相关（r=-0.454,P＜0.001）;Slug的表达与MMP-14的表达呈正相关（r=0.501,P＜0.001）。此外,KAI1的表达与E-cad的表达呈正相关,与vimentin的表达呈负相关;MMP-14的表达与E-cad的表达呈负相关,与vimentin的表达呈正相关。结论:1.KAI1蛋白在结直肠癌组织中低表达,Slug和MMP-14蛋白在结直肠癌中高表达,表明KAI1的高表达可能抑制结直肠癌的发生发展而Slug和MMP-14蛋白的高表达可能参与结直肠癌的发生发展。2.KAI1、Slug和MMP-14可能通过某种机制调控上皮间质转化的过程,从而抑制结直肠癌的转移和侵袭。3.KAI1、Slug和MMP-14蛋白可能作为预测结直肠癌患者转移和预后的新型治疗靶点。

关键词：结直肠癌 KAI1 Slug MMP-14 上皮间质转化

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mmp2、mmp14及IL-6在脊柱结核椎间盘中的表达及其临床意义

MMP2、MMP14及IL-6在脊柱结核椎间盘中的表达及其临床意义

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作者：鲁强武汉大学

学位级别：硕士

目的:通过测定脊柱结核患者椎间盘中的基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2,mmp-2）、基质金属蛋白酶-14（matrix metalloproteinase-14,MMP-14）及白介素-6（Interleukin-6,IL-6）基因表达水平,研究 mmp-2、MMP-14及IL-6在脊柱结核椎间盘破坏机制中的作用,为脊柱结核的治疗提供一定的理论基础。方法:结核组:于2015年5月20日至2016年8月30日收集40例因脊柱结核在广西壮族自治区人民医院接受手术治疗者的椎间盘组织。椎间盘突出组:于2015年5月20日至2016年8月30日收集40例因椎间盘突出在广西壮族自治区人民医院接受手术治疗者的椎间盘组织。正常组:于2015年5月20日至2016年8月30日收集40例因脊柱椎体骨折在广西壮族自治区人民医院接受手术治疗者的椎间盘组织。椎间盘标本收集后立即放入液氮中保存直至提取组织RNA和组织蛋白。采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR,RT-PCR）技术分别检测各组中椎间盘组织mmp-2、MMP-14的mRNA的表达情况以及各组间的差异,通过Western Blot技术检测各组中椎间盘组织MMP-14蛋白的表达,应用免疫组织化学染色法检测各组中椎间盘组织IL-6的表达情况。同时结合实验室检查与临床问卷调查的方法收集患者相关临床资料,分析mmp-2、MMP-14 mRNA转录水平与脊柱结核患者临床资料直接的病理关系。结果:RT-PCR结果显示与正常组比较mmp-2、MMP-14的表达水平在结核组和椎间盘突出组明显增高,差异有统计学意义（P＜0.05）,结核组mmp-2表达水平高于椎间盘突出组,差异有统计学意义（P＜0.05）,结核组MMP-14表达水平高于椎间盘突出组,但差异无统计学意义（P＞0.05）。Western Blot结果显示与正常组比较MMP-14表达水平在结核组和椎间盘突出组增加显著,差异有统计学意义（P＜0.05）。与椎间盘突出组比较,MMP-14蛋白在结核组的表达量更高,但两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。免疫组织化学染色显示结核组、椎间盘突出组IL-6表达水平显著高于正常组,差异有统计学意义（P＜0.05）,结核组IL-6表达水平高于椎间盘突出组,差异有统计学意义（P＜0.05）。临床资料分析显示结核组mmp-2的表达水平与年龄（P=0.007）、吸烟程度（P=0.004）具有正相关性,与患者性别、工作强度、疼痛程度、血沉、C-反应蛋白、脊柱病变节段以及症状持续时间均无相关性（P＞0.05）。MMP-14的表达水平与患者性别、年龄、工作强度、吸烟程度、疼痛程度、脊柱病变节段、症状持续时间、血沉、C-反应蛋白均无相关性（P＞0.05）。结论:mmp-2、MMP-14以及IL-6在脊柱结核和退变性椎间盘组织中的表达显著增加,推测mmp-2、MMP-14以及IL-6与结核性椎间盘破坏和椎间盘突出症有关。本研究同时发现结核性椎间盘组织中mmp-2的表达与吸烟程度有正相关性,推测吸烟可能会加剧脊柱结核椎间盘的破坏。

关键词：脊柱结核 mmp-2 MMP-14 IL-6 椎间盘

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胃癌中Ezrin、MMP-14的表达及相关性

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临床与实验病理学杂志 2014年第6期30卷 614-618页

作者：苗杰许欣徐国萍马沛卿河北医科大学附属邢台人民医院病理科邢台054001 大理学院基础医学院病理教研室大理671000 中国医学科学院肿瘤医院病理科北京100021

目的观察Ezrin、MMP-14蛋白在胃癌中的表达,探讨它们与胃癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化方法检测10例正常胃组织、40例异型增生的胃黏膜组织和198例胃癌组织中Ezrin、MMP-14蛋白的表达。结果 Ezrin、MMP-14在正常胃组织、异型增... 详细信息

目的观察Ezrin、MMP-14蛋白在胃癌中的表达,探讨它们与胃癌侵袭、转移的关系。方法应用免疫组化方法检测10例正常胃组织、40例异型增生的胃黏膜组织和198例胃癌组织中Ezrin、MMP-14蛋白的表达。结果 Ezrin、MMP-14在正常胃组织、异型增生胃黏膜组织和胃癌组织中的表达均依次增高。Ezrin和MMP-14在正常胃组织、异型增生胃黏膜组织和胃癌组织中的阳性率分别为10%、27.5%、76.3%和10%、32.5%、81.3%,差异均有显著性(PMMP-14在分化程度低、侵及浆膜层以及有淋巴结转移的胃癌中表达均明显高于分化程度高、未侵及浆膜层以及无淋巴结转移胃癌组织(PMMP-14在胃癌中表达呈正相关性(PMMP-14在胃癌中均高表达,且Ezrin和MMP-14的表达呈正相关关系,二者可能起协同作用,共同参与胃癌的侵袭和转移。

关键词：胃肿瘤 Ezrin MMP-14 免疫组织化学

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IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA在结直肠癌中的表达及临床意义

IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA在结直肠癌中的表达及临床意义

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作者：孙立园承德医学院

学位级别：硕士

目的:研究并讨论胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）、尿激酶型纤溶酶原激活剂（u-PA）在结直肠癌组织中的表达水平及临床意义,为明确结直肠癌的发生机制提供新的思路... 详细信息

目的:研究并讨论胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）、基质金属蛋白酶-14（MMP-14）、尿激酶型纤溶酶原激活剂（u-PA）在结直肠癌组织中的表达水平及临床意义,为明确结直肠癌的发生机制提供新的思路。方法:应用免疫组化的方法观察IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA在结直肠癌组织、腺瘤组织及正常粘膜组织中蛋白的染色强度变化,并用显微镜观察统计数据;采用免疫印迹方法（Western blot）检测IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA蛋白在结直肠癌组织及正常粘膜组织中的表达水平,同时采用实时荧光定量PCR的实验方法检测IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA mRNA在结直肠癌组织及正常粘膜组织中的表达水平,然后收集实验所得数据应用相应统计学软件进行分析,以P＜0.05为差异有统计学意义。结果:1.免疫组织化学实验结果1.1 IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA蛋白在结直肠癌组织、腺瘤组织及正常粘膜组织中的表达情况IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的阳性表达率在结直肠癌组织中高于腺瘤组织,腺瘤组织高于正常粘膜（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而IGFBP-3蛋白在正常结直肠粘膜组织的阳性表达率高于腺瘤组织,腺瘤组织高于癌组织（P＜0.05）。1.2结直肠癌组织中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA蛋白的表达与临床病理特征之间的关系结直肠癌组织中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA蛋白的阳性表达率与癌组织的分化程度、患者的年龄、性别无关（P＞0.05,P＞0.05,P＞0.05,P＞0.05）。浸润至固有肌层的结直肠癌组织中IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的阳性表达率高于浸润未达到固有肌层的癌组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而IGFBP-3蛋白的阳性表达率与癌组织是否侵及固有肌层差异无统计学意义（P＞0.05）。IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的阳性表达率在有淋巴结转移的结直肠癌组织中高于无淋巴结转移的癌组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而IGFBP-3蛋白的阳性表达率在有淋巴结转移的结直肠癌组织中低于无淋巴结转移的癌组织（P＜0.05）。在TNM分期I+Ⅱ期的结直肠癌组织中IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的阳性表达率低于TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的癌组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而IGFBP-3蛋白的阳性表达率在TNM分期为I+Ⅱ期的结直肠癌组织中高于TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期时的癌组织（P＜0.05）。2.免疫印迹实验结果2.1在结直肠癌组织和正常结直肠粘膜组织中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA蛋白的表达在结直肠癌组织中IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的相对表达量高于正常粘膜组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而在正常粘膜组织中IGFBP-3蛋白的相对表达量高于癌组织中的相对表达量（P＜0.05）。2.2结直肠癌组织中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA蛋白的表达与临床病理特征之间的关系IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA在结直肠癌中的表达均与癌组织的分化程度、患者的性别、年龄无关（P＞0.05,P＞0.05,P＞0.05,P＞0.05）。在有淋巴结转移的癌组织中IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白相对表达量高于无淋巴结转移时的癌组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,在无淋巴结转移的癌组织、有淋巴结转移的癌组织中IGFBP-3蛋白的相对表达量相比,前者大于后者（P＜0.05）。在TNM分期为I+Ⅱ期结直肠癌组织中IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的相对表达量上调,高于TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期时的癌组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而IGFBP-3蛋白的相对表达量在TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的癌组织中上调,高于TNM分期为I+Ⅱ期时的癌组织（P＜0.05）。结直肠癌组织侵及固有肌层时IGF-1、MMP-14、u-PA蛋白的相对表达量高于未侵及固有肌层时的癌组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,而IGFBP-3蛋白的相对表达量与结直肠癌组织是否浸润至固有肌层无关（P＞0.05）。3.实时荧光定量PCR的实验结果3.1结直肠癌组织及正常结直肠粘膜组织中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA mRNA的表达结果显示,IGF-1、MMP-14、u-PA mRNA在结直肠癌组织中的表达水平高于正常粘膜组织（P＜0.05,P＜0.05,P＜0.05）,IGFBP-3 mRNA在结直肠癌组织中的表达水平下调,低于正常粘膜组织mRNA的表达（P＜0.05）。3.2结直肠癌组织中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14、u-PA m

关键词：结直肠癌 IGF-1 IGFBP-3 MMP-14 u-PA

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