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第十届全国免疫学学术大会

作者：赵倩解晴陈忠斌军事医学科学院放射与辐射医学研究所

2012年在中东地区出现的中东呼吸综合征冠状病毒(mers-Co V)是感染人的又一种高致病性冠状病毒。mers已在全球20个国家出现感染病例,2015年5月我国也出现了输入性mers感染病例。目前尚无针对mers的特效疫苗和药物。3CLpro和PLpro是mers... 详细信息

2012年在中东地区出现的中东呼吸综合征冠状病毒(mers-Co V)是感染人的又一种高致病性冠状病毒。mers已在全球20个国家出现感染病例,2015年5月我国也出现了输入性mers感染病例。目前尚无针对mers的特效疫苗和药物。3CLpro和PLpro是mers病毒编码的两种关键蛋白酶,是抗病毒药物研究的重要靶蛋白。本实验首先构建了基于生物传感器的mers冠状病毒蛋白酶研究模型,利用该模型对mers的两个蛋白酶PLpro和3Clpro活性进行了研究,发现PLpro对切割位点nsp2/3,nsp3/4的切割效率高,而对切割位点nsp1/2的切割效率最低;进一步比较了多种冠状病毒蛋白酶分别对各底物切割活性,发现人类冠状病毒如SARS、mers、NL63等蛋白酶对该三个底物的切割效率明显高于动物冠状病毒PEDV PLP2蛋白酶,这可能与病毒宿主特异性相关。实验确定了mers PLpro抑制剂筛选模型的目标酶蛋白为不带跨膜结构域的PLpro,生物传感器信号感应最佳底物nsp2/3。对mers 3CLpro的研究过程中,通过基因工程方法分别合成了带酶切割位点nsp4/5、5/6、6/7、7/8的生物传感器,利用该四种传感器对mers 3CLpro蛋白酶活性进行了研究,发现其对位点nsp7/8之间的SVLQA的切割效率最高;进一步分别对蛋白酶关键位点和底物各个位点进行了突变,发现L、Q、A在蛋白酶识别过程中起着重要的作用。最终确定nsp7/8作为蛋白酶3CLpro抑制剂筛选模型的生物传感器最佳效应底物。利用上述生物传感器分别筛选作用于冠状病毒蛋白酶3CLpro和PLpro的抑制剂,从临床试验候选药物、植物天然提取药物以及非肽类小分子合成药物中,初步获得几种抗mers冠状病毒的候选药物,将为研究开发新型抗mers药物研究奠定基础。

关键词： mers冠状病毒生物传感器 3Clpro PLpro 蛋白酶抑制剂

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一种新的细胞自噬诱导蛋白mers冠状病毒3C样蛋白酶

一种新的细胞自噬诱导蛋白MERS冠状病毒3C样蛋白酶

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：解晴陈晓娟邢雅玲陈晓玲陈忠斌安徽医科大学军事医学科学院放射与辐射医学研究所

目的:冠状病毒3C样蛋白酶(3CLpro)在冠状病毒复制过程中起重要作用,是一种重要的潜在抗病毒药物候选靶标。细胞自噬是宿主重要抗病毒防御机制之一,但目前冠状病毒诱导细胞自噬及其机制还不很清楚。本研究以人类新发高致病性冠状病毒---... 详细信息

目的:冠状病毒3C样蛋白酶(3CLpro)在冠状病毒复制过程中起重要作用,是一种重要的潜在抗病毒药物候选靶标。细胞自噬是宿主重要抗病毒防御机制之一,但目前冠状病毒诱导细胞自噬及其机制还不很清楚。本研究以人类新发高致病性冠状病毒---中东呼吸综合征冠状病毒(mers-Co V)为研究对象,探讨人类冠状病毒感染与细胞自噬的关系。方法:通过免疫荧光法检测发现mers 3CLpro引起细胞内e GFP-LC3B绿色荧光点状聚集,同时mers3CLpro诱导自噬标志蛋白微管相关蛋白1-轻链3基(LC3-II)表达增多,表明mers 3CLpro可激活细胞自噬。结果:进一步研究发现mers 3CLpro诱导细胞自噬体形成而阻断或抑制自噬溶酶体形成,即mers 3CLpro诱导不完全细胞自噬效应,而且mers 3CLpro诱导细胞自噬具有时间依赖性且不依赖于其蛋白酶催化活性。此外发现SARS-Co V和NL63-Co V等其它人类冠状病毒3CLpro也具有诱导细胞自噬效应,表明3CLpro诱导细胞自噬可能是人类冠状病毒所具有的一种普遍生物学特性。结论:本研究首次发现冠状病毒蛋白酶3CLpro能诱导宿主细胞自噬,是一种新型冠状病毒来源的宿主细胞自噬诱导蛋白,这一发现拓展了对人类冠状病毒蛋白酶功能的新认识,为研究冠状病毒与宿主抗病毒天然免疫以及以病毒蛋白酶为靶标的抗病毒药物研究提供了理论基础。

关键词： mers冠状病毒 3C样蛋白酶细胞自噬 LC3-II 不完全自噬

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康复期血浆应用于急性病毒性传染病现状及其治疗新型冠状病毒肺炎前景

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中国生物制品学杂志 2020年第3期33卷 241-245页

作者：杨晓明侯继峰中国生物技术股份有限公司北京100029 中国食品药品检定研究院血液室北京100029

随着康复期血浆(convalescent plasma,CP)被成功地用于治疗多种急性病毒性传染病,其独到的治疗技术优势越来越受到肯定和认同。新近在中国武汉发现并鉴定一种命名为2019-nCoV(SARS-CoV-2)的新型冠状病毒,目前暂无特异性治疗其感染的有... 详细信息

随着康复期血浆(convalescent plasma,CP)被成功地用于治疗多种急性病毒性传染病,其独到的治疗技术优势越来越受到肯定和认同。新近在中国武汉发现并鉴定一种命名为2019-nCoV(SARS-CoV-2)的新型冠状病毒,目前暂无特异性治疗其感染的有效手段。本文就CP应用于埃博拉、大流行流感、严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)、中东呼吸综合征(Middle East respiratory syndrome,mers)的现状作一综述,并对其治疗新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)的前景作一展望。

关键词：康复期血浆大流行流感病毒埃博拉病毒 SARS冠状病毒 mers冠状病毒新型冠状病毒新型冠状病毒肺炎

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