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高分化/去分化脂肪肉瘤的临床病理学和分子生物学研究

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高分化/去分化脂肪肉瘤的临床病理学和分子生物学研究

作者：邹珏南京医科大学

学位级别：硕士

脂肪肉瘤是成人最常见的软组织肿瘤之一，占软组织肉瘤的9.8％～16％，全身各部位都可发生，但主要见于四肢和腹膜后。它在组织学上分为高分化(well diffcrentiated liposarcoma)，去分化(dedifferentiated liposarcoma)，黏液样(myxoid... 详细信息

脂肪肉瘤是成人最常见的软组织肿瘤之一，占软组织肉瘤的9.8％～16％，全身各部位都可发生，但主要见于四肢和腹膜后。它在组织学上分为高分化(well diffcrentiated liposarcoma)，去分化(dedifferentiated liposarcoma)，黏液样(myxoid liposarcoma)，圆形细胞(round cell liposarcoma)和多形性(pleomorphic 1iposarcoma)五型，而根据其细胞和分子生物学特征将其分为三大类：高分化／去分化型，黏液／圆细胞型，多形性型脂肪肉瘤。高分化型在脂肪肉瘤中约占到40～45％，易复发不转移，恶性程度低可进展为高度恶性的去分化型。在去分化型约占脂肪肉瘤的10～15％可发生转移并能致死。它们在组织学士特征不是很明显，高分化与良性脂肪性肿瘤以及去分化与恶性梭形／多形未分化肿瘤的鉴别仍是一个难题。目前细胞和分子生物学研究高分化／去分化型的环状和／或巨大标记染色体都有12q13-15区域的扩增，该区域包括好几种导致肿瘤发生的基因如mdm2(human homologue of the murine double-minute type2)、CDK4(cyclin-dependent kinase 4)等，其中最恒定的扩增子是mdm2基因，它除可致肿瘤发生外还可作用于P53基因而使肿瘤发生。我们研究观察高分化／去分化脂肪肉瘤的组织病理学特征，免疫标记表达特点，检测分子生物学上特征恒定基因的表达，探讨他们对高分化／去分化脂肪肉瘤的诊断、鉴别诊断和预后的判断的价值。材料和方法：1．材料：本实验收集17例高分化／去分化脂肪肉瘤(其中10例高分化型，7例去分化型)，另外收集对照标本18例，梭形细胞脂肪瘤，血管脂肪瘤，脂肪瘤，脂肪母细胞瘤，黏液脂肪肉瘤，多形性脂肪肉瘤，恶性纤维组织细胞瘤，横纹肌肉瘤，纤维肉瘤各2例。2．方法：采用免疫组化方法检测CDK4、mdm2的表达，RT-PCR方法检测mdm2基因mRNA的表达。结果：1．临床病理特点10例WDLPS中，男女之比为7∶3，中位年龄43.1岁，发生在腹膜后及腹腔6例，纵隔1例，臀部1例，四肢2例。7例DDLPS申男女之比为5∶2，中位年龄58.1岁，发生在四肢3例，腹膜后3例，精索1例。随访资料：WDLPS 5例复发，1例进展为DDLPS，DDLPS 5例复发，2例死亡。2．免疫表型17例高分化／去分化脂肪肉瘤中CDK4、mdm2异常表达分别为82％和76％。在对照组中mdm2异常表达率具有差异性(P＜0.05)。而对照组中CDK4异常表达率无统计学意义(P＞0.05)。3．分子生物学10例高分化／去分化脂肪肉瘤均成功提取RNA，且均检测到恒定特异表达的mdm2基因，对照组的9例中只成功提取RNA，但未检测到mdm2基因的表达。结论：1．17例高分化／去分化脂肪肉瘤中mdm2和CDK4异常免疫表达分别为76％和82％。说明它们是高分化／去分化脂肪肉瘤发生发展过程中常见的分子事件，它们与高分化／去分化脂肪肉瘤的发病机制密切相关。***-PCR方法检测高分化／去分化脂肪肉瘤石蜡包埋组织中mdm2基因的表达是可行的，检测结果可作为临床病理诊断，鉴别诊断的参考。3．免疫组化方法检测mdm2蛋白也可辅助高分化／去分化脂肪肉瘤临床病理诊断，作为鉴别诊断的参考。CDK4的蛋白表达不如mdm2特异，对它们鉴别诊断的价值不大。

关键词：高分化/去分化脂肪肉瘤组织病理学免疫组织化学 CDK4 mdm2基因 RT-PCR

胃黏膜病变中突变型p53、mdm2和PCNA蛋白表达及与幽门螺杆菌感染的关系

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山东医药 2009年第49期49卷 1-4页

作者：齐淑文舒徐陈江吕农华南昌大学医学院第一附属医院南昌330006 武警江西省总队第一支队卫生队

目的探讨胃黏膜病变中突变型p53、mdm2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000法染色及Giemsa染色检测胃黏膜病变中突变型p53、mdm2、PC-NA蛋白的表达和Hp感染情况。结果在慢性浅表... 详细信息

目的探讨胃黏膜病变中突变型p53、mdm2、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000法染色及Giemsa染色检测胃黏膜病变中突变型p53、mdm2、PC-NA蛋白的表达和Hp感染情况。结果在慢性浅表性胃炎(CSG)、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生(CAG伴IM)、不典型增生(Dys)及胃癌(GC)中,突变型p53、mdm2、PCNA阳性表达随病变发展而逐渐升高,突变型p53在CSG组高于GC组,GC组高于CAG伴IM组(P均mdm2比较均有统计学差异(Pmdm2、PCNA阳性表达一般高于Hp阴性者,突变型p53在CAG伴IM组Hp阳性与阴性者间有统计学差异(Pmdm2在Dys组Hp阳性与阴性者有统计学差异(Pmdm2、PCNA蛋白表达无相关关系。结论突变型p53、mdm2和PCNA蛋白的表达及Hp感染共同参与胃黏膜病变的发生、发展。

关键词：胃黏膜病变螺杆菌,幽门 p53 mdm2基因增殖细胞核抗原

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9例去分化脂肪肉瘤临床病理分析

现代医学与健康研究电子杂志 2019年第11期3卷 116-117页

作者：郭江红白玮李亚玲山西省肿瘤医院

目的探讨去分化脂肪肉瘤(DDLPS)的临床病理学特征。方法采用HE染色和荧光原位杂交(FISH)法对9例DDLPS进行临床病理分析。结果 9例DDLPS均可见梭形细胞编织状排列,细胞核有异型性,部分可见脂肪母细胞及瘤巨细胞,部分伴有高分化脂肪肉瘤成... 详细信息

目的探讨去分化脂肪肉瘤(DDLPS)的临床病理学特征。方法采用HE染色和荧光原位杂交(FISH)法对9例DDLPS进行临床病理分析。结果 9例DDLPS均可见梭形细胞编织状排列,细胞核有异型性,部分可见脂肪母细胞及瘤巨细胞,部分伴有高分化脂肪肉瘤成分,部分可见黏液变性,形态类似于黏液脂肪肉瘤,9例FISH法检测mdm2基因均出现扩增。结论 DDLPS常由高分化性和去分化性成分构成,病理形态多变,需与黏液脂肪肉瘤等相区别,用FISH法检测DDLPS中mdm2基因阳性率高,可作为DDLPS的精准辅助诊断指标。

关键词：脂肪肉瘤去分化 mdm2基因

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RNA干扰致基因表达沉默细胞模型的建立

解剖学研究 2005年第3期27卷 190-193页

作者：朱有凯林汉良马怡晖顾霞吴红阳廖冰中山大学基础医学院病理学教研室广州510080

目的探讨siRNA和shRNA在基因功能研究中的应用。方法用化学方法合成siRNA,以及用常规的分子克隆方法构建shRNA表达载体。以人类K562细胞为实验对象,采用lipofectamine将mdm2基因的siRNA和shRAN表达载体导入细胞后,用多重RT鄄PCR和Wester... 详细信息

目的探讨siRNA和shRNA在基因功能研究中的应用。方法用化学方法合成siRNA,以及用常规的分子克隆方法构建shRNA表达载体。以人类K562细胞为实验对象,采用lipofectamine将mdm2基因的siRNA和shRAN表达载体导入细胞后,用多重RT鄄PCR和Westernblot检测目标基因mdm2的表达水平。结果K562细胞瞬时转染mdm2siRNA48h后,mdm2蛋白质表达下降超过60%;稳定转染shRNA表达载体后,mdm2基因在mRNA和蛋白质表达水平下降超过70%。实验结果表明成功地建立了mdm2表达下调的实验细胞模型。结论siRNA和shRNA都能有效地导致目标基因表达沉默,在基因功能研究中瞬时转染和稳定转染需要配合使用以获得更理想的实验结果。

关键词： RNA干扰转染细胞模型基因表达 lipofectamine 沉默 mdm2基因 shRNA siRNA 基因功能研究

肝癌组织中p53基因及其下游基因的研究进展

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中国现代医学杂志 2003年第24期 70-73页

作者：赵劲风中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心湖南长沙410008

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mdm2的功能及其在白血病中的作用

国外医学（儿科学分册） 1999年第4期26卷 176-178,184页

作者：蒋莎义张皓刘壮蒋敏山东省立医院儿科 250021 广西医科大学第一附属医院 530021

mdm2是近年来研究较多的癌基因，编码多种蛋白质，能促进细胞由G1期进入S期，阻止细胞凋亡。它是抑癌基因p53的拮抗基因，与p53结合后抑制其功能，促进p53蛋白降解。人类白血病存在着mdmZ的过度表达，这与白血病的发生、发展和预后有关。

关键词：癌基因癌基因蛋白质白血病 mdm2基因

乳腺癌组织mdm2和p53蛋白质的表达水平及其与病理指标的关系

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中国癌症杂志 1997年第2期7卷 82-85页

作者：江明邵志敏陆劲松吴炅韩企夏沈镇宙上海医科大学附属肿瘤医院外科

研究乳腺癌组织ＭＤＭ２和ｐ５３蛋白质的定位、表达水平及其与肿瘤大小、病理分型、分类、分级、癌周浸润程度、纤维组织反应和淋巴细胞反应等临床病理指标的关系。方法应用单克隆抗体和链霉亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（ＳＡＢ... 详细信息

研究乳腺癌组织ＭＤＭ２和ｐ５３蛋白质的定位、表达水平及其与肿瘤大小、病理分型、分类、分级、癌周浸润程度、纤维组织反应和淋巴细胞反应等临床病理指标的关系。方法应用单克隆抗体和链霉亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（ＳＡＢＣ）免疫组织化学染色方法，检测１０６例乳腺癌组织石蜡切片标本ｍｄｍ２和ｐ５３蛋白质的定位和表达水平，比较其与各病理指标的关系。结果（１）乳腺癌组织ｍｄｍ２和ｐ５３蛋白质均明确定位于细胞核；（２）１０６例乳腺癌组织ｍｄｍ２表达阳性率为８１．１％，ｐ５３为７５．３％，ｍｄｍ２与ｐ５３蛋白质的表达水平呈正相关系；（３）乳腺癌组织ｍｄｍ２和ｐ５３蛋白质的表达水平与病理学分级、癌周浸润程度和纤维组织反应有关（Ｐ＜０．０５），而与肿瘤大小、病理分型、分类和淋巴细胞反应无关（Ｐ＞０．０５）。结论检测乳腺癌组织ｐ５３蛋白质和ｍｄｍ２的表达水平可作为判断细胞分级、分化和肿瘤生物学行为的指标之一。

关键词：乳腺癌 mdm2基因 P53蛋白基因表达恶性肿瘤

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p16和mdm2与肿瘤相关性的研究进展

实用肿瘤学杂志 2007年第5期21卷 475-477页

作者：高峥嵘王玉学哈尔滨医科大学附属肿瘤医院骨科哈尔滨150081

近年,随着分子生物学技术的广泛应用,人们已认识到肿瘤的发生是由于细胞基因组的变化,它是由于控制细胞生长和分化的癌基因的激活和抑癌基因的失活所致.因此,目前认为,肿瘤是一种体细胞遗传病.p16是新发现的一个抑癌基因,受到人们的广... 详细信息

近年,随着分子生物学技术的广泛应用,人们已认识到肿瘤的发生是由于细胞基因组的变化,它是由于控制细胞生长和分化的癌基因的激活和抑癌基因的失活所致.因此,目前认为,肿瘤是一种体细胞遗传病.p16是新发现的一个抑癌基因,受到人们的广泛重视.它直接作用于细胞周期,抑制细胞增殖,具有减慢细胞周期的'刹车'的作用.mdm2基因是-原癌基因,它的突变或表达异常将导致平衡的破坏,可能与细胞转化和肿瘤发生有关.

关键词： mdm2基因肿瘤相关性 p16 分子生物学技术抑癌基因体细胞遗传病抑制细胞增殖细胞生长

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mdm2功能及其调控机制

国外医学（肿瘤学分册） 2004年第5期31卷 336-339页

作者：黄越承蔡建明第二军医大学海军医学系放射医学教研室上海200433

mdm2是调节 p5 3通路的重要基因 ,具有降解p5 3及泛素化的功能 ,参与肿瘤的发生、发展 ,并与胚胎发育和组织分化相关。近年来对mdm 2的分子作用机制和调控机制的研究取得了一定进展 ,已用mdm2反义寡核苷酸进行肿瘤的基因治疗。

关键词： mdm2基因基因调控机制基因治疗原癌基因生物学功能 DNA损伤