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伊犁马mct1基因多态性与速度性能的关联性分析

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新疆农业科学 2022年第11期59卷 2815-2821页

作者：吴金秋张冲孟军曾亚琦加娜尔·努尔顿王川坤袁鑫鑫王彤亮姚新奎新疆农业大学动物科学学院乌鲁木齐830052 新疆农业大学马产业研究院乌鲁木齐830052 新疆马繁育与运动生理重点实验室乌鲁木齐830052 新疆伊犁哈萨克自治州昭苏马场新疆昭苏835000

【目的】研究伊犁马mct1基因多态性与速度性能的关联性,为专门化用途速度马的选种育种提供技术支撑。【方法】以50匹参加2000 m速度赛的2岁伊犁马为研究对象,运用DNA直接测序法筛选伊犁马mct1基因第2、3外显子的突变位点,分析其多态性... 详细信息

【目的】研究伊犁马mct1基因多态性与速度性能的关联性,为专门化用途速度马的选种育种提供技术支撑。【方法】以50匹参加2000 m速度赛的2岁伊犁马为研究对象,运用DNA直接测序法筛选伊犁马mct1基因第2、3外显子的突变位点,分析其多态性位点以及与伊犁马2000 m比赛成绩的关联性。【结果】在伊犁马mct1基因第2外显子上发现一个SNP位点,在伊犁马mct1基因第3外显子上没有发现突变位点,在g.52168582处,碱基T突变为碱基G,此突变位点为错义突变,该突变导致其编码氨基酸由苯丙氨酸变为亮氨酸,属于中度多态位点,处于Hardy-Weinberg平衡状态,共存在TT、TG、GG 3种基因型,TT基因平均速度高于GG和TG基因型平均速度,且TT基因型平均速度显著高于GG基因型平均速度(Pmct1基因第2外显子g.52168582T>G处TT基因型更有利于伊犁马2000 m比赛速度。

关键词：伊犁马 mct1基因遗传多态性速度性能

抑制人肺腺癌细胞mct1基因的表达对其增殖、凋亡的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2002年第2期9卷 101-104页

作者：张桂芝黄桂君成党校郭先健钱桂生第三军医大学新桥医院呼吸研究所重庆400037

目的:研究抑制单羧酸转运蛋白第1亚型(mct1)基因的表达对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法:用电穿孔法将mct1反义基因表达载体转染进人肺腺癌A549细胞中,以抑制mct1基因表达。经G418筛选阳性克隆。用PCR,RT-PCR方法鉴定mct1反义基因与A54... 详细信息

目的:研究抑制单羧酸转运蛋白第1亚型(mct1)基因的表达对肿瘤细胞增殖、凋亡的影响。方法:用电穿孔法将mct1反义基因表达载体转染进人肺腺癌A549细胞中,以抑制mct1基因表达。经G418筛选阳性克隆。用PCR,RT-PCR方法鉴定mct1反义基因与A549基因组的整合;用分光光度法和生物发光法分别测定细胞内pH(intracellular pH,pHi)、乳酸含量和ATP含量。用原位凋亡试剂盒测定细胞凋亡情况,并接种转染mct1反义基因的细胞和A549细胞于裸鼠皮下,观察移植瘤的生长。结果:与A549细胞比较,转染mct1反义基因的细胞pHi降低(Pmct1反义基因的细胞凋亡率明显高于A549细胞(Pmct1反义基因的细胞移植瘤明显比接种A549细胞的轻且小(Pmct1基因对肿瘤细胞增殖凋亡具有重要的调节作用。

关键词：单羧酸转运蛋白基因肺肿瘤 pHi 乳酸 ATP 移植瘤 mct1基因

伊犁马mct1、PPARα、NOS3、HIF-1α基因多态性与2000m运动性能关联性分析

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伊犁马MCT1、PPARα、NOS3、HIF-1α基因多态性与2000m运动性能关...

作者：吴金秋新疆农业大学

学位级别：硕士

本研究主要以50匹伊犁马为研究对象,利用DNA测序和生物信息学的研究方法,研究伊犁马mct1、PPARα、NOS3、HIF-1α基因多态性,判定不同突变位点基因型,并将不同基因型与伊犁马运动性能进行关联性分析,研究伊犁马mct1、PPARα、NOS3、HIF-... 详细信息

本研究主要以50匹伊犁马为研究对象,利用DNA测序和生物信息学的研究方法,研究伊犁马mct1、PPARα、NOS3、HIF-1α基因多态性,判定不同突变位点基因型,并将不同基因型与伊犁马运动性能进行关联性分析,研究伊犁马mct1、PPARα、NOS3、HIF-1α基因对2000 m运动性能的影响,探索对伊犁马2000 m运动性能影响的突变位点,为速度马早期选育提供理论依据,研究结果如下:(1)通过对伊犁马mct1基因第2-3外显子及其附近区域测序结果分析显示:第2外显子检测到SNP1(g.52168582T>G),但第3外显子序列未检测到突变位点。SNP1为错义突变位点,共检测到三种基因型,处于Hardy-Weinberg平衡状态且属于中度多态位点。通过将伊犁马mct1基因SNP1不同基因型与2000 m速度关联性分析表明,g.52168582T>G突变位点TT基因型2000 m速度显著高于GG基因型(P基因第1-3外显子及其附近区域测序结果分析显示:第1外显子和第3内含子各检测到1个突变位点,SNP2(g.43225009T>G)和SNP3(g.43233663A>G),在第2、3外显子序列未检测到突变位点。SNP2为同义突变位点,SNP3为内含子突变位点,均检测出三种基因型,处于Hardy-Weinberg平衡状态且属于中度多态位点。通过将伊犁马PPARα基因SNP2不同基因型与2000 m速度关联性分析发现,g.43225009T>G突变位点TT基因型2000 m速度显著快于TG基因型(P基因第1与第5-7外显子及其附近区域测序结果分析显示:第2内含子与第6外显子分别检测到SNP4(g.102724192G>A)和SNP5(g.102728344A>G),SNP4为内含子突变位点,共检测到两种基因型,为低度多态位点;SNP5为错义突变位点,共检测到三种基因型,属于中度多态位点。SNP4与SNP5均处于Hardy-Weinberg平衡状态。通过对伊犁马NOS3基因SNP5不同基因型与2000 m速度关联性分析显示,g.102728344A>G突变位点AA基因型2000 m速度显著快于AG和GG基因型(P基因第3-4、7与9外显子及其附近区域测序结果分析显示:仅在第2内含子上检测到1个突变位点SNP6(g.8830772A>G),故SNP6为内含子突变位点,共检测出两种基因型且为低度多态位点,处于Hardy-Weinberg平衡状态。通过将伊犁马HIF-1α基因SNP6不同基因型与2000 m速度关联性分析表明,g.8830772A>G突变位点AG基因型2000 m速度快于AA基因型,但两者之间差异不显著(P>0.05)。综上可知,SNP1中TT基因型、SNP2中TT基因型以及SNP5中AA基因型均对伊犁马2000 m运动性能产生积极的影响。在今后的专项选育中可加强对以上基因型的选择,从而提高伊犁马竞赛速度和伊犁马运动选材及早期选种选育的准确性,加速伊犁马专门化品系培育的育种进程,并且对于快速选择和培育优质速度型伊犁马、提高农牧民经济收入、加快新疆现代马业的发展具有重要战略意义和实际应用价值。

关键词：伊犁马 mct1基因 PPARα基因 NOS3基因 HIF-1α基因 2000m运动性能

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单羧酸转运泵基因反义真核表达载体的构建

第三军医大学学报 2000年第8期22卷 807-809页

作者：成党校钱桂生黄桂君第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所重庆400037

目的　构建单羧酸转运泵基因反义逆转录病毒真核表达载体。方法　应用RT PCR方法扩增带有双酶切位点的单羧酸转运泵目的基因片段 ,与带有相同酶切位点的pLXSN逆转录病毒真核表达载体粘末端进行反向基因插入连接 ,构建具有反义表达的逆... 详细信息

目的　构建单羧酸转运泵基因反义逆转录病毒真核表达载体。方法　应用RT PCR方法扩增带有双酶切位点的单羧酸转运泵目的基因片段 ,与带有相同酶切位点的pLXSN逆转录病毒真核表达载体粘末端进行反向基因插入连接 ,构建具有反义表达的逆转录病毒载体。结果　构建载体进行双酶切电泳分析及插入片段基因序列分析 ,证明反义载体构建成功。结论　应用RT PCR方法扩增插入DNA片段 ,简单、灵活、快捷。双酶切定向连接构建反义表达载体可实现构建一步到位 ,免去正反向筛选的麻烦。

关键词：单羧酸转运泵肿瘤 mct1基因反义真核表达载体

短链脂肪酸对亚急性瘤胃酸中毒的影响和钠离子耦合单羧酸转运蛋白1和氢离子耦合单羧酸转运蛋白1对短链脂肪酸的转运机制

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动物营养学报 2022年第12期34卷 7574-7584页

作者：张剑霞胡红莲宋利文高民内蒙古农业大学动物科学学院呼和浩特010018 内蒙古自治区农牧业科学院动物营养与饲料研究所呼和浩特010031

高精料饲粮在反刍动物瘤胃内经微生物发酵可产生大量短链脂肪酸(SCFA),使瘤胃内环境处于低pH状态,因此引起反刍动物亚急性瘤胃酸中毒(SARA)。在SARA发生时,SCFA不仅参与瘤胃上皮的糖、脂和能量代谢,还在维持黏膜屏障和减轻炎性反应等方... 详细信息

高精料饲粮在反刍动物瘤胃内经微生物发酵可产生大量短链脂肪酸(SCFA),使瘤胃内环境处于低pH状态,因此引起反刍动物亚急性瘤胃酸中毒(SARA)。在SARA发生时,SCFA不仅参与瘤胃上皮的糖、脂和能量代谢,还在维持黏膜屏障和减轻炎性反应等方面发挥重要调节作用,而单羧酸转运蛋白中的钠离子耦合单羧酸转运蛋白1(SLC5A8)与氢离子耦合单羧酸转运蛋白1(mct1)负责瘤胃上皮内SCFA的转运与吸收,对于探究反刍动物发生SARA时,SLC5A8与mct1基因的表达在SCFA转运机理上有重要意义。本文主要对SARA的定义、SCFA的调控机制以及SLC5A8、mct1基因的表达与转运机制进行综述。

关键词：亚急性瘤胃酸中毒短链脂肪酸 SLC5A8基因 mct1基因