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肝癌mage-n抗原HLA-A2限制性细胞毒性T细胞表位的预测

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现代肿瘤医学 2003年第5期11卷 325-327页

作者：黄小兰董海龙隋延仿西安市中心医院医务科陕西西安710003 第四军医大学病理学教研室陕西西安710032

目的　预测肝癌mage -n抗原HLA -A2限制性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)表位。方法　应用SYFPEITHI超基序多项式法远程预测系统和量化基序多项式法结合的预测方法 ,筛选mage -n抗原HLA -A2限制性CTL表位。结果　筛选到mage -n抗原 5个HLA -A... 详细信息

目的　预测肝癌mage -n抗原HLA -A2限制性细胞毒性T淋巴细胞 (CTL)表位。方法　应用SYFPEITHI超基序多项式法远程预测系统和量化基序多项式法结合的预测方法 ,筛选mage -n抗原HLA -A2限制性CTL表位。结果　筛选到mage -n抗原 5个HLA -A2限制性CTL表位 (九肽 )。结论　SYFPEI

关键词：肝癌免疫治疗 mage-n CTL表位 SYFPEITHI超基序法量化基序多项式法

树突状细胞负载mage-n表位肽的体外免疫学效应研究

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现代肿瘤医学 2011年第12期19卷 2386-2389页

作者：张秀敏郭风林慧曲萍第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室陕西西安710032 第四军医大学西京消化病医院陕西西安710032 第四军医大学教学实验中心陕西西安710032

目的:研究树突状细胞(dendritic cell,DC)负载mage-n表位肽QLVFGIEVV体外诱导特异性CTL的能力及其抗肿瘤效应。方法:mage-n表位肽以固相多肽合成技术合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定,以流式细胞仪筛选HLA-A2+人外周血PBMC,连续贴... 详细信息

目的:研究树突状细胞(dendritic cell,DC)负载mage-n表位肽QLVFGIEVV体外诱导特异性CTL的能力及其抗肿瘤效应。方法:mage-n表位肽以固相多肽合成技术合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定,以流式细胞仪筛选HLA-A2+人外周血PBMC,连续贴壁法分离培养人外周血来源树突状细胞,用成熟的DC负载mage-n表位肽QLVFGIEVV反复刺激活化诱导抗原特异性CTL,用51Cr释放法检测CTL的杀伤活性,并用抗HLA-A2分子单抗进行杀伤抑制实验。结果:用DC负载mage-n表位肽QLVF-GIEVV可诱导特异性CTL反应,对mage-n阳性表达细胞有较强的杀伤作用。结论:DC负载抗原肽QLVF-GIEVV在体外可诱发较强的特异性免疫反应。

关键词：树突状细胞疫苗限制性表位肽 mage-n HLA-A2

新基因mage-n表位肽与人HSP70融合基因的构建及表达纯化

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中国医药生物技术 2010年第4期5卷 257-260页

作者：张秀敏史琪琪李增山叶菁王军伟林慧曲萍胡沛臻隋延仿第四军医大学基础部病理与病理生理学教研室/肿瘤生物学国家重点实验室西安710032 第四军医大学教学实验中心

目的构建mage-n159-167(QLVFGIEVV)表位肽与人热休克蛋白70(HSP70)的融合基因并表达纯化。方法应用PCR方法,将QLVFGIEVV的cDnA序列融合到人HSP70基因的3'端,将融合基因克隆入原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-28a(+)QLVFGIEVV-HSP70;采用双酶切(Sac Ⅰ、Hind Ⅲ)及PCR鉴定后测序;转化大肠杆菌*** BL21(DE3),用IPTG诱导表达,ni Sepharose6FF亲和填料进行分离纯化,SDS-PAGE检测表达及纯化结果。结果经PCR扩增成功获得约2.0kb的目的片段,重组体经Sac Ⅰ、Hind Ⅲ双酶切分析及PCR结果与预期结果一致,测序正确。转入重组质粒的*** BL21(DE3)经IPTG诱导、SDS-PAGE分析得到71kD左右的目的蛋白条带。用ni Sepharose6FF亲和填料分离纯化,获得了纯化的融合蛋白。结论成功构建原核表达载体pET-28a(+)QLVFGIEVV-HSP70,并获得纯化的融合蛋白,为基于mage-n的肿瘤疫苗研制提供良好的抗原奠定了实验基础。

关键词： HSP70热休克蛋白类基因融合癌症疫苗 mage-n 表位肽原核表达

联合表位肽诱导HLA-A2^+人PBMC产生抗原特异性CTL及杀伤活性研究

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现代肿瘤医学 2006年第8期14卷 913-916页

作者：张秀敏隋延仿司少艳胡沛臻黄杨葛伟李侠马斌第四军医大学基础部病理学教研室陕西西安710033

目的:探讨mage-3,mage-n抗原表位体外联合诱导的CTL,并研究其特异性杀伤活性。方法:候选抗原表位以固相多肽合成技术合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定,以流式细胞仪筛选HLA-A2+人外周血PBMC,T2细胞负载抗原肽反复刺激活化诱导抗原... 详细信息

目的:探讨mage-3,mage-n抗原表位体外联合诱导的CTL,并研究其特异性杀伤活性。方法:候选抗原表位以固相多肽合成技术合成,并用HPLC进行纯化,质谱法(MS)鉴定,以流式细胞仪筛选HLA-A2+人外周血PBMC,T2细胞负载抗原肽反复刺激活化诱导抗原特异性CTL,LDH检测其杀伤活性。结果:联合表位肽体外刺激人PBMC,能够较强地诱导抗原特异性CTL并产生特异性杀伤。结论:mage-3与mage-n的HLA-A2限制性CTL表位肽的联合应用能够产生较强的体外抗肿瘤免疫反应。

关键词：肿瘤抗原 mage-3 mage-n 细胞毒性T淋巴细胞表位