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重组人过氧化物还原酶-5通过诱导巨噬细胞极化提高抗肿瘤免疫

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第6期39卷 880-888页

作者：陈浩东王文榜杨琳张志斐金媛媛杨兆勇华北理工大学药学院河北唐山063000 中国医学科学院与北京协和医学院医药生物技术研究所北京100050

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统,使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明,重组人过氧化物还原酶-5(human peroxiredoxin-5,hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应,从而控制与清除肿瘤,然而,其确切的作用机制仍有待深... 详细信息

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统,使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明,重组人过氧化物还原酶-5(human peroxiredoxin-5,hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应,从而控制与清除肿瘤,然而,其确切的作用机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨hPRDX5是否通过激活或者逆转小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化状态,从而发挥其抗肿瘤活性。CCK8法检测结果显示,与对照组相比,不同剂量hPRDX5均能显著增强巨噬细胞活力(P264.7细胞NO分泌水平(P264.7细胞TNF-α(P264.7细胞抗原分化簇(cluster of differentiation,CD)80(Pmor conditional culture solution,TCS)诱导的巨噬细胞CD206(P2细胞的杀伤活性。hPRDX5能够激活小鼠巨噬细胞RAW264.7,促进其m1型极化,并且逆转m2型极化,通过免疫增强作用发挥抗肿瘤活性。

关键词：重组人过氧化物还原酶-5 RAW264.7细胞 m1/m2极化抗肿瘤免疫调节胰腺癌

CysLT受体拮抗剂HAmI3379通过调控小胶质细胞极化减轻大鼠脑缺血损伤

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解放军医学杂志 2023年

作者：李明星应苗法顾胜龙赵蕊浙江大学医学院附属邵逸夫医院药剂科

目的探究半胱氨酰白三烯2(CysLT2)受体拮抗剂HAmI3379对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其可能机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和HAmI3379组，每组10只。模型组大鼠采用大脑中动脉阻断术(mCAO)构建脑缺血损伤模型，HA... 详细信息

目的探究半胱氨酰白三烯2(CysLT2)受体拮抗剂HAmI3379对大鼠脑缺血损伤的保护作用及其可能机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和HAmI3379组，每组10只。模型组大鼠采用大脑中动脉阻断术(mCAO)构建脑缺血损伤模型，HAmI3379组在mCAO术前和术后30 min腹腔注射HAmI3379(0.2 mg/kg)。对脑缺血损伤后的大鼠行神经症状评分，TTC染色法观察大鼠脑梗死体积，免疫荧光染色法检测小胶质细胞活化标志物Iba1,Real-time PCR检测小胶质细胞m1/m2极化表型分子m RNA水平的变化，NeuN染色法观察神经元的数量，Fluoro-Jade B染色法观察神经元变性情况。Western-blotting检测脑组织中CysLT2蛋白和核因子κB相关蛋白PKCα、IκBα、p65和p50蛋白的表达变化。结果与假手术组比较，模型组大鼠神经症状评分、脑梗死体积均明显增高(PmI3379组大鼠的神经症状评分、脑梗死体积明显降低(Pm1极化分子CD86、 IL-1β、 TNF-α和m2极化分子CD206、 TGF-β、 IL-10的m RNA表达均明显增高(PmI3379组m1极化分子表达明显下调(Pm2极化分子表达明显上调(PmI3379组PKCα、 IκBα、p65、p50蛋白表达明显下调(PmI3379组神经元数量增多(PmI3379可能通过调控PKCα/IκBα/NF-κB信号通路，抑制小胶质细胞的m1极化激活，促进其向m2极化转变，抑制神经元的变性，发挥神经保护作用。

关键词：脑缺血损伤 CysLT2受体小胶质细胞激活 m1/m2极化神经元损伤

补肾活血方对去卵巢小鼠冠脉微循环的保护作用及机制研究

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中国中西医结合杂志 2019年第2期39卷 230-236页

作者：贾承明马静陈昌波李颖祺曹亮王方圆周倩王玉珍空军军医大学第一附属医院中医科暨全军中医内科中心西安710032

目的探讨心肌巨噬细胞(macrophages,m)表型m1/m2极化在去卵巢小鼠冠脉微循环障碍(CmD)中的作用及补肾活血方的影响。方法将90只雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为9组:6周正常组(6WC组)、6周假手术组(6WS组)、6周模型组(6Wm组,去卵巢6W)... 详细信息

目的探讨心肌巨噬细胞(macrophages,m)表型m1/m2极化在去卵巢小鼠冠脉微循环障碍(CmD)中的作用及补肾活血方的影响。方法将90只雌性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为9组:6周正常组(6WC组)、6周假手术组(6WS组)、6周模型组(6Wm组,去卵巢6W)、8周正常组(8WC组)、8周假手术组(8WS组)、8周模型组(8Wm组,去卵巢8W)、巨噬细胞清除组(简称Cm组,腹腔注射氯膦酸二钠脂质体0. 01 m L/kg,每周1次)、补肾活血组[简称BG组,补肾活血方灌胃,5 m L/(kg·d),每天1次]及miR-155抑制组(简称mI组,尾静脉注射miR-155抑制剂20 mg/kg,每周1次),每组10只,持续干预8周。采用小动物超声成像系统检测左室短轴缩短率(LVFS)和左室射血分数(LVEF),HE染色观察心肌组织结构,麦胚凝集素染色检测心肌细胞横截面积,免疫荧光染色检测冠脉微血管密度和CD68+表达;实时荧光定量PCR检测心肌miR-155、IL-1β、TNF-α、IL-10及血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达。结果与6WC组比较,6WS和6Wm组心肌LVEF和LVFS值、炎症细胞浸润、心肌细胞横截面积、冠脉微血管密度差异均无统计学意义(P> 0. 05);与8WC和8WS组比较,8Wm组心肌LVEF和LVFS值明显下降,心肌细胞肿胀和炎症细胞浸润增加,心肌细胞横截面积增大,冠脉微血管密度减少,CD68+表达增加,miR-155、IL-1β和TNF-αmRNA表达增加,IL-10和VEGF mRNA表达减少(P 1);与8Wm组比较,BG组心肌LVEF、LVFS值和冠脉微血管密度增加,炎症细胞浸润、细胞横截面积减小,Cm和BG组心肌组织炎症细胞浸润、CD68+表达均减少,Cm、BG和mI组心肌miR-155、IL-1β和TNF-αmRNA表达均减少; BG和mI组心肌IL-10和VEGF mRNA表达均增加,差异均有统计学意义(P 1);与mI组比较,BG组心肌miR-155、IL-1β、TNF-α、IL-10、VEGF mRNA表达差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论补肾活血方可能通过下调心肌miR-155调控m1/m2极化抑制冠脉微血管炎症反应。

关键词：补肾活血方冠脉微循环障碍模型去卵巢小鼠 m1/m2极化 miR-155

芝麻酚通过AmPK信号通路调控巨噬细胞极化减轻脂肪组织炎症

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中国药理学通报 2023年第11期39卷 2082-2088页

作者：刘瞩程明慧张劝劝秦虹中南大学湘雅公共卫生学院营养与食品卫生学教研室湖南长沙410078

目的探讨芝麻酚(sesamol,SEm)对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织炎症的影响及对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞极化的调控分子机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组、肥胖模型对照组和SEm干预组。干预结... 详细信息

目的探讨芝麻酚(sesamol,SEm)对高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织炎症的影响及对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞极化的调控分子机制。方法将C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组、肥胖模型对照组和SEm干预组。干预结束后取小鼠血清和脂肪组织,ELISA法测定小鼠血清和脂肪组织中炎症因子、抗炎因子及趋化因子的分泌水平,Western blot法测定脂肪组织巨噬细胞m1型极化标志物的蛋白表达水平。以LPS刺激RAW264.7巨噬细胞诱导炎症模型并用SEm进行干预,使用AmPK抑制剂compound C进行机制探讨和验证,Western blot法检测巨噬细胞极化标志物及AmPK信号通路相关蛋白表达水平,ELISA法检测巨噬细胞炎症相关因子。结果体内实验发现,SEm可降低肥胖小鼠血清和脂肪组织中IL-6、TNF-α和mCP-1分泌水平,提高IL-10分泌水平,减少m1型巨噬细胞标志物CD11c蛋白表达。体外实验发现,SEm能够激活巨噬细胞AmPK,上调PGC-1α、下调NF-κB表达,降低CD11c、IL-6、TNF-α,升高CD206、IL-10水平,而compound C可以减弱SEm的上述作用。结论SEm可通过激活AmPK信号通路调控巨噬细胞极化减轻脂肪组织炎症。

关键词：芝麻酚肥胖脂肪组织炎症巨噬细胞 m1/m2极化 AmPK信号通路

金藤清痹颗粒通过调节免疫微环境对类风湿关节炎大鼠的干预作用

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中成药 2022年第11期44卷 3459-3468页

作者：唐今扬周彩云王鑫马芳潘峥韩淑花李斌杜丽妍程国良房定亚中国中医科学院西苑医院风湿病科北京100091 中药制药共性技术国家重点实验室山东临沂276000

目的研究金藤清痹颗粒通过调节免疫微环境对类风湿关节炎大鼠的干预作用及其机制。方法通过注射牛Ⅱ型胶原和弗氏不完全佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷组及金藤清痹颗粒低、... 详细信息

目的研究金藤清痹颗粒通过调节免疫微环境对类风湿关节炎大鼠的干预作用及其机制。方法通过注射牛Ⅱ型胶原和弗氏不完全佐剂建立胶原诱导型关节炎(CIA)大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、甲氨蝶呤组、雷公藤多苷组及金藤清痹颗粒低、中、高剂量组,每组10只,另以10只正常大鼠作为正常组,给药组灌胃给予相应剂量药物,模型组和正常组灌胃给予等体积0.9%氯化钠注射液。每7 d进行1次足底厚度检测和关节指数评分,HE染色观察膝关节滑膜病理改变,免疫组化检测滑膜CD68、CD86、CD206表达,流式细胞术检测外周血中辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)比例,Western blot法检测TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达,RT-qPCR法检测TLR4、IKKβmRNA表达。结果金藤清痹颗粒与甲氨蝶呤、雷公藤多苷均能减轻CIA大鼠四肢关节肿胀(Pm1/m2型巨噬细胞比例、Th17/Treg细胞比例、TLR 4 mRNA及TLR4、p-IκBα、细胞核p65蛋白表达(PmRNA表达(Pm1/m2型巨噬细胞极化,调节Th17/Treg细胞平衡,调控TLR4/NF-κB信号通路表达,改善免疫微环境,从而缓解类风湿关节炎大鼠关节肿胀症状。

关键词：金藤清痹颗粒类风湿关节炎巨噬细胞 m1/m2极化 Th17/Treg平衡 TLR4/NF-κB信号通路免疫微环境

蜕膜巨噬细胞与不明原因自然流产关系的研究进展

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中国免疫学杂志 2023年第4期39卷 885-889页

作者：李娜马铭艳杨美霞宋芳(指导) 包头医学院组织学与胚胎学教研室包头014040

母胎界面多种蜕膜免疫细胞在免疫耐受中发挥作用,其中蜕膜巨噬细胞(Dm)是母胎界面数量较多的免疫细胞,可分为m1型和m2型。Dm向m2型极化时,机体维持正常妊娠;Dm向m1型极化时,会引发自然流产(SA)。Dm参与绒毛外滋养细胞侵袭、螺旋动脉重... 详细信息

母胎界面多种蜕膜免疫细胞在免疫耐受中发挥作用,其中蜕膜巨噬细胞(Dm)是母胎界面数量较多的免疫细胞,可分为m1型和m2型。Dm向m2型极化时,机体维持正常妊娠;Dm向m1型极化时,会引发自然流产(SA)。Dm参与绒毛外滋养细胞侵袭、螺旋动脉重塑和免疫耐受等过程,一旦这些功能异常就会引发SA。本文对Dm表型、功能及其与SA的关系进行综述。

关键词：蜕膜巨噬细胞自然流产母胎界面 m1/m2极化

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间充质干细胞及其衍生细胞外囊泡靶向巨噬细胞干预自身免疫性疾病

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中国组织工程研究 2024年

作者：姚兰宣王雪菲刘洋杨雨佳赵怡齐芳芳李颖辉河北医科大学口腔医学院河北省口腔医学重点实验室河北医科大学口腔医院牙体牙髓科河北医科大学口腔医院正畸科

背景：巨噬细胞是机体固有免疫的重要组成部分，当机体内环境发生改变时巨噬细胞可以产生不同的极化表型，并发挥相应的炎性免疫作用。间充质干细胞能够分泌较多数量的细胞外囊泡到机体内环境中，具有细胞间信号传导及免疫调节功能。研... 详细信息

背景：巨噬细胞是机体固有免疫的重要组成部分，当机体内环境发生改变时巨噬细胞可以产生不同的极化表型，并发挥相应的炎性免疫作用。间充质干细胞能够分泌较多数量的细胞外囊泡到机体内环境中，具有细胞间信号传导及免疫调节功能。研究表明，间充质干细胞及间充质干细胞来源细胞外囊泡可以影响巨噬细胞m1/m2极化平衡，从而治疗机体免疫炎症性疾病。目的：探讨间充质干细胞及其来源细胞外囊泡通过调节巨噬细胞极化来干预自身免疫性疾病的信号机制，以及工程化细胞外囊泡在此领域的相关研究进展。方法：第一作者检索Pubmed、中国知网等数据库自建库到2024年6月发表的相关文献，以“间充质干细胞，细胞外囊泡，外泌体，凋亡小体，凋亡囊泡，巨噬细胞极化，m1极化，m2极化，自身免疫性疾病，多发性硬化，类风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，1型糖尿病，炎症性肠病，自身免疫性泪腺炎，工程化细胞外囊泡，工程化外泌体，药物递送”为中文检索词；以“macrophage polarization,m1macrophage,m2macrophage,autoimmunedisease,type1diabetes,multiplesclerosis,rheumatoidarthritis,systemiclupus erythematosus,autoimmunedacryadenitis,inflammatoryboweldisease,mesenchymalstemcells,extracellularvesicles,engineered extracellular vesicles,engineering exosomes,drug delivery”为英文检索词，阅读每篇文献的文题、摘要进行初筛，最终筛选出70篇文献进行归纳分析。结果与结论：(1)间充质干细胞可以通过释放或间接作用于功能性蛋白来调节m1/m2极化；(2)间充质干细胞可以通过作用于炎症小体调控巨噬细胞m2极化；(3)间充质干细胞可以与常用药物组合以增强药物疗效；(4)间充质干细胞受到炎性刺激后可以调控细胞外囊泡的释放影响巨噬细胞极化；(5)间充质干细胞来源细胞外囊泡可以通过PTEN、NOTCH、核因子κB、Toll样受体、PI3K/AKT等通路靶向巨噬细胞极化调节自身免疫性疾病；(6)工程化细胞外囊泡可以实现非侵入式靶向给药，延长药物半衰期，推动外泌体口服给药，减轻移植物异体反应，提高中草药生物利用度并攻克血脑屏障，开辟了一条药物递送新路径。

关键词：间充质干细胞细胞外囊泡外泌体巨噬细胞极化 m1/m2极化自身免疫性疾病工程化细胞外囊泡

银椴苷对激活的原代小胶质细胞极化及神经炎症的影响

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世界科学技术-中医药现代化 2022年第10期24卷 3806-3812页

作者：申小年王俐君王星禹张宗奇徐颖安徽中医药高等专科学校医疗系芜湖241000 上海中医药大学康复医学院上海201203 上海中医药大学生理教研室上海201203 上海中医药大学附属曙光医院上海200021

目的银椴苷(Tiliroside,Tle)是一种天然产物,存在于结香花(Edgeworthia chrysantha Lindl.)、金英(Galphimiagracilis)、和Phlomoidesspectabilis等生物体中。本文主要探讨Tle对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)激活的原代小胶质细胞的m1/m2极化的转化作用及其抑制神经炎症反应的影响。方法mTT检测各浓度Tle对LPS激活的原代小胶质细胞活性的影响;Griess试剂检测LPS激活的原代小胶质细胞的一氧化氮(Nitric oxide,NO)产物生成量的影响;ELISA法检测Tle对LPS激活的原代小胶质细胞的肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)蛋白水平的影响;qRT-PCR检测Tle对LPS激活的原代小胶质细胞的精氨酸酶-1(Arginase-1,Arg-1)和胰岛素生长因子-1(Insulin growth factor-1,IGF-1)的mRNA表达水平。结果Tle(0-80μmol·L^(-1))对LPS激活的原代小胶质细胞活性没有明显影响;Tle显著降低LPS激活的原代小胶质细胞亚硝酸盐的含量,并对炎症因子IL-6、TNF-α蛋白水平有显著抑制作用,同时显著提高抗炎因子Arg-1和IGF-1的mRNA水平。结论Tle能够通过促进LPS激活的原代小胶质细胞m1型向m2型转化从而抑制神经炎症反应,因此Tle具有一定的神经保护作用。

关键词：银椴苷小胶质细胞 m1/m2极化神经炎症

Robo4在脑缺血再灌注损伤大鼠小胶质细胞极化中的作用及其机制研究

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中国现代医学杂志 2023年第18期33卷 36-42页

作者：曹天然刘青芳潘美民陈勇长沙市第一医院临床试验研究中心湖南长沙410005 长沙市第一医院神经医学中心湖南长沙410005 长沙市第一医院皮肤科湖南长沙410005

目的探讨环形交叉轴突导向受体同源物4(Robo4)蛋白对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后小胶质细胞m1/m2极化的影响。方法选取60只SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉短暂性闭塞/再灌注(tmCAO/R)组、tmCAO/R联合过表达Robo4慢病毒阴性载... 详细信息

目的探讨环形交叉轴突导向受体同源物4(Robo4)蛋白对脑缺血再灌注损伤(CIRI)后小胶质细胞m1/m2极化的影响。方法选取60只SD大鼠,随机分为假手术(Sham)组、大脑中动脉短暂性闭塞/再灌注(tmCAO/R)组、tmCAO/R联合过表达Robo4慢病毒阴性载体(tmCAO/R+Lv-scramble)组、tmCAO/R联合过表达Robo4慢病毒载体(tmCAO/R+Lv-Robo4)组,每组15只。tmCAO/R+Lv-scramble组及tmCAO/R+Lv-Robo4组在复制tmCAO前7 d于脑室内注射慢病毒载体。Longa评分评估神经功能缺损,TTC法检测脑梗死面积,实时荧光定量聚合酶链反应及Western blotting检测大脑组织中Robo4的表达,Western blotting检测m1小胶质细胞标志物(iNOS和CD86)、m2小胶质细胞标志物(Arg-1和CD206)和Notch通路蛋白(Notch-1、Hes1和Hes5)表达。酶联免疫吸附试验检测TNF-α、IL-1β、IL-10和TGF-β水平。结果tmCAO/R组Longa评分较Sham组高(PmCAO/R+Lv-scramble组较tmCAO/R+Lv-Robo4组高(PmACO/R组Robo4 mRNA和蛋白相对表达量较Sham组低(PmCAO/R+Lv-Robo4组较tmCAO/R+Lv-scramble组高(PmACO/R组脑梗死面积较Sham组大(PmCAO/R+Lv-Robo4组较tmCAO/R+Lv-scramble组小(PmACO/R组较Sham组高(PmCAO/R+Lv-Robo4组iNOS、CD86较tmCAO/R+Lv-scramble组低,Arg-1、CD206较tmCAO/R+Lv-scramble组高(PmACO/R组较Sham组高(PmCAO/R+Lv-Robo4组TNF-α、IL-1β较tmCAO/R+Lvscramble组低,IL-10、TGF-β较tmCAO/R+Lv-scramble组高(PmACO/R组Notch-1、Hes1和Hes5相对表达量较Sham组高,tmCAO/R+Lv-Robo4组较tmCAO/R+Lv-scramble组低(P极化向m2表型转移,并调控Notch信号通路,缓解CIRI。

关键词：脑缺血再灌注损伤环形交叉轴突导向受体同源物4 Notch信号通路 m1/m2极化小胶质细胞