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细胞分裂周期素25A影响放射线照射后HEp-2细胞的G_2/m期阻滞及凋亡

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武汉大学学报（医学版） 2013年第2期34卷 201-204页

作者：叶俊杰梅自洁李杰谢丛华武汉大学中南医院放化疗科/湖北省肿瘤生物学行为重点实验室湖北武汉430071

目的:研究放射线照射后HEp-2细胞的G2/m期阻滞与细胞分裂周期素(CDC)25A表达的相关性及过表达CDC25A蛋白对细胞周期及凋亡的影响。方法:通过流式细胞仪和Western blot方法检测4Gy X线照射后在不同时间点细胞周期及CDC25A蛋白含量;经脂... 详细信息

目的:研究放射线照射后HEp-2细胞的G2/m期阻滞与细胞分裂周期素(CDC)25A表达的相关性及过表达CDC25A蛋白对细胞周期及凋亡的影响。方法:通过流式细胞仪和Western blot方法检测4Gy X线照射后在不同时间点细胞周期及CDC25A蛋白含量;经脂质体转染pEGFP-N1-CDC25A质粒的HEp-2细胞为CDC25A组,转染pEGFP-N1质粒的为空载对照组,通过实时荧光定量PCR法检测这两组细胞中CDC25A的mRNA含量以鉴定转染效率;通过流式细胞仪检测CDC25A组和空载对照组细胞经4Gy放射线照射后细胞周期和细胞凋亡率;通过mTT法检测两组细胞的存活曲线。结果:放射线照射后G2/m期在细胞周期中的比例与CDC25A蛋白含量成正相关;CDC25A组细胞的CDC25A mRNA含量为空载对照组的15倍;过表达CDC25A联合4Gy放射线照射可废除G1/S关卡阻滞,促进G2/m期聚集和提前进入有丝分裂,可导致细胞凋亡增加和细胞存活率降低。结论:CDC25A的含量与G2/m期的比例正相关,调控CDC25A的表达可影响放射线照射后肿瘤细胞的细胞周期和凋亡水平。

关键词： CDC25A 放射治疗 G2 m期细胞周期关卡凋亡

蛋白激酶A对小鼠受精卵早期发育过程中m期促进因子活性的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第2期18卷 222-226页

作者：王亚杰赵咏梅付伟刘奕宗志红于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001

为研究小鼠体内 1 细胞期受精卵m期蛋白激酶A(PKA)对m期促进因子 (mPF)活性的影响 ,应用PKA激动剂cAmP及热稳定性抑制剂PKI显微注射入 1 细胞期受精卵内 ,观察mPF及PKA活性变化 .未经注射的对照组mPF活性在分裂期增高 ,分裂间期下降 ;而... 详细信息

为研究小鼠体内 1 细胞期受精卵m期蛋白激酶A(PKA)对m期促进因子 (mPF)活性的影响 ,应用PKA激动剂cAmP及热稳定性抑制剂PKI显微注射入 1 细胞期受精卵内 ,观察mPF及PKA活性变化 .未经注射的对照组mPF活性在分裂期增高 ,分裂间期下降 ;而PKA活性在进入分裂期下降 ,分裂间期升高 .cAmP组PKA活性维持高峰值 ,直至注射HCG后 2 8h ,mPF活性高峰延迟 30min出现 ;PKI显微注射组PKA活性低 ,而mPF活性在注射HCG后 2 7 5h即达高峰 ,且维持高峰时间达1 5h .结果表明 ,PKA活性在细胞周期中也呈波动性 ,间期活性高 ,分裂期活性低 ;PKA高活性抑制mPF活性 ,而抑制PKA活性则mPF活性高峰提前出现 .

关键词：蛋白激酶A 小鼠受精卵早期发育过程 m期促进因子活性

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m期启动调节的普遍机制

细胞生物学杂志 1991年第2期13卷 70-74页

作者： Paul Nurse 杨新林

细胞周期内发生的事件是细胞正常繁殖所必需的。对于所有的细胞周期来说,有两个事件是主要的:S期和m期。前者是染色体复制时期,后者是复制了的染色体分离并进入两个子细胞的时期。本文讨论细胞周期中m期启动的调控。据现在所知,所有的... 详细信息

细胞周期内发生的事件是细胞正常繁殖所必需的。对于所有的细胞周期来说,有两个事件是主要的:S期和m期。前者是染色体复制时期,后者是复制了的染色体分离并进入两个子细胞的时期。本文讨论细胞周期中m期启动的调控。据现在所知,所有的真核细胞存在一个共同的调控机制,其中心是蛋白激酶P34^(cdc2),它在有丝分裂及减数分裂的m期都被活化。在活化时,该激酶的磷酸化状态需要发生改变,并要和周期素(cyclin)相互作用。周期素是一类在细胞周期过程中水平发生变化的蛋白质。P34^(cdc2)

关键词：细胞周期 m期启动调节

诺考达唑对体外小鼠卵裂球m期阻抑及后续发育的影响

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沈阳农业大学学报 2015年第2期46卷 181-186页

作者：罗光彬夏文明李元玲白文林杜新沈阳农业大学畜牧兽医学院沈阳110161

为获得更多具有后续发育能力的小鼠m期卵裂球,以测定细胞间期和m期的重编程因子表达情况,用不同浓度的诺考达唑(Nocodazole)对小鼠1-cell胚胎及2-cell胚胎进行了不同时间的处理,筛选出了控制卵裂球停留在m期的最佳处理浓度及处理时间。... 详细信息

为获得更多具有后续发育能力的小鼠m期卵裂球,以测定细胞间期和m期的重编程因子表达情况,用不同浓度的诺考达唑(Nocodazole)对小鼠1-cell胚胎及2-cell胚胎进行了不同时间的处理,筛选出了控制卵裂球停留在m期的最佳处理浓度及处理时间。结果表明:0.10,0.15和0.20μg·m L-1的诺考达唑可有效且可逆地使小鼠1-cell胚胎或2-cell胚胎阻抑在m期;在诺考达唑去除后的1~2h,胚胎细胞重新恢复有丝分裂,完成卵裂;0.10μg·m L-1的诺考达唑处理12h可很好地将1-cell胚胎阻抑于m期,且对胚胎的后续发育影响不大;0.20μg·m L-1的诺考达唑处理18h对2-cell胚胎阻抑效果最好,而解除诺考达唑处理后3h内的胚胎发育能力略低于0.15μg·m L-1处理组,但差异不显著(p>0.05)。由于两组(0.15μg·m L-1组和0.20μg·m L-1组)对2-cell胚胎阻抑效果及发育能力两方面均差异不显著(p>0.05),因此选用0.15μg·m L-1的诺考达唑处理2-cell胚胎。用0.10μg·m L-1和0.15μg·m L-1的诺考达唑分别对小鼠的1-cell胚胎及2-cell胚胎处理12h和18h,可获得更多有发育能力的小鼠m期卵裂球。

关键词：小鼠重编程诺考达唑 m期卵裂球

小陷胸汤通过G2/m期阻滞抑制A549和H1299细胞增殖并抑制其侵袭和转移(英文)

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中华中医药杂志 2014年第5期29卷 1483-1489页

作者：倪露露方志红方媛吴建春李雁上海中医药大学附属上海市中医医院肿瘤科上海200071 上海中医药大学上海201203

目的:从体内体外实验共同着手,探讨祛痰剂小陷胸汤对非小细胞肺癌的抑制作用。方法:采用细胞增殖抑制、侵袭和转移以及细胞周期分析等进行体外研究。裸鼠异体移植A549肿瘤模型用于体内实验研究。mTT和软琼脂克隆形成实验用于细胞增殖测... 详细信息

目的:从体内体外实验共同着手,探讨祛痰剂小陷胸汤对非小细胞肺癌的抑制作用。方法:采用细胞增殖抑制、侵袭和转移以及细胞周期分析等进行体外研究。裸鼠异体移植A549肿瘤模型用于体内实验研究。mTT和软琼脂克隆形成实验用于细胞增殖测定;划痕和Transwell检测肺癌细胞的侵袭和转移能力;流式和PCR用于细胞周期分析。结果:通过细胞活力的丧失,形态变化以及G2/m周期阻滞的分析,发现A549和H1299细胞在小陷胸汤的干预下发生生长阻滞。PCR结果显示细胞周期相关基因GADD45A上调,CCNB1和CCNB2下调。此外,在小陷胸汤的作用下,A549和H1299细胞侵袭和转移能力呈剂量依赖性下降。通过小鼠右侧腋部皮下接种A549细胞建立肺癌小鼠异体移植模型,小陷胸汤处理后能够抑制肿瘤的生长。结论:小陷胸汤干预后肺癌细胞生长阻滞以及细胞的周期阻滞阐明小陷胸汤可以作为一种新的治疗肺癌的药物。小陷胸汤在体内外实验中减少肿瘤发生及转移潜能,这对临床治疗肿瘤至关重要。

关键词：肺癌小陷胸汤 G2 m期侵袭及转移

大蒜素对人胃癌细胞SGC-7901及BGC-823G_2/m期的阻滞调节机制

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世界华人消化杂志 2005年第20期13卷 2409-2412页

作者：柳星马锐陈威白雪蕾袁媛中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所第三研究室辽宁省沈阳市110001

目的:研究大蒜素对人胃癌细胞SGC-7901及BGC-823G2/m期阻滞作用及其调节机制.方法:应用mTT法测定大蒜素对人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823细胞增殖抑制率及72h的IC50.通过流式细胞仪检测IC50浓度的大蒜素对SGC-7901和BGC-823细胞周期的影... 详细信息

目的:研究大蒜素对人胃癌细胞SGC-7901及BGC-823G2/m期阻滞作用及其调节机制.方法:应用mTT法测定大蒜素对人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823细胞增殖抑制率及72h的IC50.通过流式细胞仪检测IC50浓度的大蒜素对SGC-7901和BGC-823细胞周期的影响.应用免疫组化染色检测大蒜素作用前后SGC-7901和BGC-823细胞CDC2和CyclinB蛋白表达.结果:不同浓度的大蒜素可以抑制人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823的增殖,且随着大蒜素浓度的增大,抑制率逐渐增高.大蒜素抑制SGC-7901细胞增殖50%的药物浓度(IC50):72h为23mg/L;大蒜素抑制BGC-823细胞增殖50%的药物浓度(IC50):72h为35mg/L.大蒜素作用于两种细胞,其细胞周期均发生了明显的变化,主要表现为G0/G1期细胞减少,G2/m期细胞增多(SGC-7901细胞24,48hvs对照:26.47±2.54%,28.88±2.75%vs24.30±2.74%,P期细胞无明显变化.未经大蒜素处理的两种细胞,CDC2和CyclinB蛋白表达均为阳性,大蒜素处理后,CDC2和CyclinB蛋白表达下降.SGC-7901细胞经23mg/L大蒜素处理后,CDC2蛋白相对阳性表达率为87.2%;CyclinB蛋白相对阳性表达率为59.3%.BGC-823细胞CDC2蛋白在35mg/L大蒜素作用后,相对阳性表达率为84.4%;CyclinB蛋白相对阳性表达率为62.8%,与对照组相比均有显著性差异(Pm期,其机制是通过CDC2和CyclinB蛋白表达下降实现的.

关键词：大蒜素 SGC-7901 BGC-823 G2/m期阻滞 CDC2 CyclinB 人胃癌细胞SGC-7901 BGC-823细胞阻滞作用 m期

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CHO m期同步细胞的研究

北京师范大学学报（自然科学版） 1981年第4期17卷 89-93页

作者：张鸿卿吴同乐北京师范大学生物系中国科学院生物物理所

引言 1953年,Howard和Pelc以蚕豆根端细胞为材料,用同位素示踪方法摻入32P到蚕豆根细胞DNA中,发现只有在DNA合成时才有32P的掺入,而在DNA合成后到有丝分裂期之间有一间隙（gap）存在,此时32P不能掺入,因此,首先提出细胞周期的概念。1959... 详细信息

引言 1953年,Howard和Pelc以蚕豆根端细胞为材料,用同位素示踪方法摻入32P到蚕豆根细胞DNA中,发现只有在DNA合成时才有32P的掺入,而在DNA合成后到有丝分裂期之间有一间隙（gap）存在,此时32P不能掺入,因此,首先提出细胞周期的概念。1959年Oastler和Sherman利用3H-Td标记小鼠肠腺窝上皮细胞的有丝分裂象的方法测定细胞周期各时相的时间,为细胞动力学的研究提供了重要手段。

关键词：有丝分裂象 CHO m期有丝分裂期 DNA 根端上皮细胞根细胞增殖周期同位素示踪抑制状态

不同发育阶段小鼠胚胎S-期、m-期卵裂球的检测以及低温对胚胎细胞DNA合成的影响

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中国兽医学报 2001年第4期21卷 377-380页

作者：于元松严云勤李光鹏孙兴参刘忠华杨信志李树峰谭景和东北农业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150030

利用放射自显影技术检测了小鼠着床前胚胎 ( 4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚 )不同发育阶段 (早、中、晚 ) S期和 m期卵裂球的比率 ,并研究了低温 ( 4℃ )对小鼠胚胎发育及 DNA合成的影响。结果显示 ,早期和中期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球... 详细信息

利用放射自显影技术检测了小鼠着床前胚胎 ( 4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚 )不同发育阶段 (早、中、晚 ) S期和 m期卵裂球的比率 ,并研究了低温 ( 4℃ )对小鼠胚胎发育及 DNA合成的影响。结果显示 ,早期和中期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球比率较高 ,分别是 75%、92 % ,没有 m期卵裂球 ,晚期 4 -细胞胚胎 S期卵裂球比率较低 ( 30 % ) ,m期卵裂球比率为 1 1 % ;早期和中期 8-细胞胚胎 S期卵裂球比率仍很高 ,分别是 73%、80 % ,m期卵裂球分别为 0、2 .5% ,晚期 8-细胞胚胎 S期卵裂球比率增至 6 4% ,m期卵裂球减少至 9% ;早、中、晚期桑葚胚的 S期卵裂球比率分别是 77%、72 %和 79% ,m期卵裂球的比率分别是 5%、3%和 3% ;早、中、晚期囊胚的 S期卵裂球比率分别是 78%、74 %和 77% ,m期卵裂球的比率分别是 4 %、3%和 4 %。 4℃的低温对小鼠早期胚胎的发育和 DNA合成都没有明显影响 ;4 -细胞、8-细胞胚胎和桑葚胚经低温处理及培养后其囊胚形成率和平均卵裂球数分别是 6 2 %和 ( 2 6± 6 )个、54%和 ( 2 5± 7)个、87%和 ( 34± 8)个 ;4 -细胞、8-细胞胚胎、桑葚胚和囊胚经低温处理后 S期卵裂球比率分别是 97%、77%、70 %和 74 %。

关键词：放射自显影技术 DNA合成 S期 m期卵裂球胚胎小鼠

半叶马尾藻多糖对辐射损伤小鼠巨噬细胞功能和胸腺细胞周期进程的影响

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辐射防护 2005年第4期25卷 211-215,222页

作者：孟庆勇刘志辉郑辉广东医学院分析中心湛江524023 暨南大学医学院生理教研室广州510632

通过研究小鼠胸腺细胞周期进程、巨噬细胞吞饮和分泌功能的变化,探讨半叶马尾藻多糖(SHP)对辐射损伤小鼠胸腺细胞和巨噬细胞的影响。利用常规方法和流式细胞术分别检测小鼠巨噬细胞的功能和胸腺细胞周期进程。结果发现给予小鼠5Gy60Co... 详细信息

通过研究小鼠胸腺细胞周期进程、巨噬细胞吞饮和分泌功能的变化,探讨半叶马尾藻多糖(SHP)对辐射损伤小鼠胸腺细胞和巨噬细胞的影响。利用常规方法和流式细胞术分别检测小鼠巨噬细胞的功能和胸腺细胞周期进程。结果发现给予小鼠5Gy60Coγ射线单次全身照射(剂量率为0.673Gy/min),小鼠巨噬细胞吞饮功能显著低于正常对照组。但是,在照射前给予SHP(10mg/kg～40mg/kg)组的小鼠巨噬细胞吞饮功能明显高于单纯照射组,小鼠巨噬细胞IL1分泌功能SHP(20mg/kg～40mg/kg)加照射组也显著高于单纯照射组。5Gy照射引起小鼠胸腺G0/G1期细胞百分率增高,S期和G2/m期细胞百分率减少,SHP(20mg/kg～40mg/kg)可以有效抑制辐射损伤小鼠胸腺G0/G1期阻滞和G2/m期细胞百分率下降,SHP(10mg/kg～40mg/kg)也能够预防辐射损伤小鼠S期胸腺细胞百分率的下降。说明SHP对辐射损伤小鼠胸腺细胞和巨噬细胞有保护作用。

关键词：辐射损伤细胞周期马尾藻进程细胞功能多糖 ^60Coγ射线小鼠巨噬细胞胸腺细胞分泌功能流式细胞术 G1期阻滞百分率常规方法全身照射 IL-1 保护作用胞吞剂量率 SHP 单纯 m期 G2 S期下降