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内蒙古医学杂志 1988年第1期 13-14+67页

作者：范毅军王广钧王越先内蒙古自治区医学院

收集L·F·B染色阳性肝癌,肝硬化、肝炎肝活检标片18例。经醛复红、地依红、HBsAg,PAP证实4例肝炎后肝硬化,2例肝癌中有乙型肝炎病毒包涵体,余10例门脉性肝硬化和2例慢性活动性肝炎胞浆内有L·F·B单独阳性包涵体,认为是NANB病毒包涵体... 详细信息

收集L·F·B染色阳性肝癌,肝硬化、肝炎肝活检标片18例。经醛复红、地依红、HBsAg,PAP证实4例肝炎后肝硬化,2例肝癌中有乙型肝炎病毒包涵体,余10例门脉性肝硬化和2例慢性活动性肝炎胞浆内有L·F·B单独阳性包涵体,认为是NANB病毒包涵体。并认为L·F·B染色时NANB肝炎病毒包涵体具有特异性。此外,经电镜观察证明,在一例肝硬化病例的肝细胞装中见有NANB肝炎病毒样颗粒,进一步证实L·F、B染色对NANB型肝炎病毒包涵体的特异性。

关键词：肝炎肝疾病肝组织 NANB luxol fast blue 病毒包涵体肝硬化

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Early brainstem hemorrhage progression:multi-sequence magnetic resonance imaging and histopathology

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Neural Regeneration Research 2023年第1期18卷 170-175页

作者： Xi Guo Jia-Ke Xu Xin Qi Yang Wei Cheng-Wei Wang Hao Li Lu Ma Chao You Meng Tian Department of Neurosurgery and Neurosurgery Research Laboratory National Clinical Research Center for GeriatricsWest China HospitalSichuan UniversityChengduSichuan ProvinceChina Department of Integrated Traditional and Western Medicine West China HospitalSichuan UniversityChengduSichuan ProvinceChina Department of Rehabilitation People’s Hospital of KaramayKaramayXinjiang Uygur Autonomous RegionChina West China Brain Research Center West China HospitalSichuan UniversityChengduSichuan ProvinceChina

According to clinical statistics,the mortality of patients with early brainstem hemorrhage is *** this study,we established rat models of brainstem hemorrhage by injecting type Ⅶ collagenase into the right basotegmental pontine and investigated the pathological changes of early brainstem hemorrhage using multi-sequence magnetic resonance imaging and histopathological *** found that brainstem hematoma gradually formed in the injured rats over the first 3 days and then reduced after 7 *** edema that occurred was mainly of the vasogenic *** complete myelin sheath structure was found around the focus of the brainstem *** integrity and continuity of nerve fibers gradually deteriorated over the first 7 *** degeneration was mild in the first 3 days and then obviously aggravated on the 7^(th)*** cytokines,interleukin-1β,and tumor necrosis factorαappeared on the 1st day after intracerebral hemorrhage,reached peak levels on the 3^(rd)day,and decreased from the 7^(th)*** findings show the characteristics of the progression of early brainstem hemorrhage.

关键词： brainstem hemorrhage diffuse tensor imaging diffusion-weighted imaging Fluoro-Jade C staining hematoxylin-eosin staining interleukin-1β luxol fast blue rat model T2-weighted imaging tumor necrosis factor-α

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Three-dimensional reconstruction of human spinal cord based on histological serial sections

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Neural Regeneration Research 2008年第7期3卷 697-700页

作者： Guangming Lü Huiqun Wu Lemin Tang Xiao Han Dafeng Ji Xiaosong Gu Department of Anatomy Institute of Neurobiology Jiangsu Province Key Laboratory of Neural Regeneration Medical School of NantongUniversity Nantong 226001 Jiangsu Province China Laboratory of lmage Engineering Medical School of Nantong University Nantong 226001 Jiangsu Province China

BACKGROUND： It is not possible to reconstruct the inner structure of the spinal cord, such as gray matter and spinal tracts, from the Visual Human Project database or CT and MRI databases, due to low image resolution and contrast in macrosection images. OBJECTIVE： To explore a semi-automatic computerized three-dimensional （3D） reconstruction of human spinal cord based on histological serial sections, in order to solve issues such as low contrast. DESIGN, TIME AND SETTING： An experimental study combining serial section techniques and 3D reconstruction, performed in the laboratory of Human Anatomy and Histoembryology at the Medical School of Nantong University during January to April 2008. SETTING： Department of Anatomy, Institute of Neurobiology, Jiangsu Province Key Laboratory of Neural Regeneration, Laboratory of Image Engineering. MATERIALS： A human lumbar spinal cord segment from fresh autopsy material of an adult male. METHODS： After 4% paraformaldehyde fixation for three days, serial sections of the lumbar spinal cord were cut on a Leica cryostat and mounted on slides in sequence, with eight sections aligned separately on each slide. All sections were stained with luxol fast blue to reveal myelin sheaths. After gradient dehydration and clearing, the stained slides were coverslipped. Sections were observed and images recorded under a light microscope using a digital camera. Six images were acquired at x25 magnification and automatically stitched into a complete section image. After all serial images were obtained, 96 complete serial images of the human lumbar cord segment were automatically processed with ＂Curves＂, ＂Autocontrast＂, ＂Gray scale 8 bit＂, ＂Invert＂, ＂Image resize to 50%＂ steps using Photoshop 7.0 software. All images were added in order into 3D-DOCTOR 4.0 software as a stack, where serial images were automatically realigned with neighboring images and semi-automatically segmented for white matter and gray matter. Finally, simple surface and

关键词： luxol fast blue reconstruction serial sections surface three-dimensional visible human project volume

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人和大鼠脊髓显微结构连续切片图像的计算机三维重建研究

人和大鼠脊髓显微结构连续切片图像的计算机三维重建研究

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作者：吴辉群南通大学

学位级别：硕士

目的:利用人和大鼠脊髓组织连续切片,结合三维重建工具软件对人、正常大鼠脊髓显微结构进行三维重建,并对重建的结构进行观察和分析。方法:(1)对人腰髓节段的连续冰冻切片直接贴片,进行luxol fast blue (LFB)染色,采集切片图像并进行图... 详细信息

目的:利用人和大鼠脊髓组织连续切片,结合三维重建工具软件对人、正常大鼠脊髓显微结构进行三维重建,并对重建的结构进行观察和分析。方法:(1)对人腰髓节段的连续冰冻切片直接贴片,进行luxol fast blue (LFB)染色,采集切片图像并进行图像拼接,Photoshop7.0软件对图像进行“图像灰度化”、“反相”、“对比度调整”、“图像缩小”等后处理,3D-DOCTOR4.0软件进行表面重建和体重建。(2)制作正常SD大鼠颈髓节段包埋蜡块,于颈髓标本四周进行外定位标记,Leica石蜡切片机进行连续横断切片,每切三张,用CANON数码相机对蜡块中的颈髓标本及其外定位标记进行拍照,获得连续切片图像。所得图像进行排序,裁切,转换为灰度图像和背景不均匀校正后,利用3D-DOCTOR软件对每张图像上的颈髓,颈髓灰质,定位孔进行边缘提取,利用定位孔对连续图像进行自动配准,三维表面重建后在PC机上进行任意角度观察,切割和测量。(3)制作正常成年SD大鼠脊髓连续横断切片、贴片后,进行LFB染色、拍片,获得大鼠脊髓皮质脊髓束连续切片图像。在Photoshop软件环境下完成切片图像的配准、分割、灰度化。利用3D-DOCTOR软件进行阈值分割并对大鼠脊髓、脊髓灰质、双侧皮质脊髓束结构进行三维重建,在PC机上对重建结构进行任意角度的观察,切割和测量。结果:(1)利用3D-DOCTOR软件重建出腰髓节段,可以自由观察腰髓的结构,并进行测量。另外还可以选择任意切面切割腰髓节段,观察并测量剩余部分的结构。(2)利用3D-DOCTOR软件重建出大鼠颈髓节段,可以自由观察颈髓的结构,并进行测量。另外还可以选择任意切面切割颈髓节段观察并测量剩余部分的结构。(3)利用大鼠脊髓连续切片重建出C1-S4节段大鼠脊髓,在PC机上对其进行任意角度的观察和切割观察,大鼠皮质脊髓束于大鼠C1-S4节段走行于大鼠脊髓后索内,紧贴灰质中间带后方,呈逐渐变细的类圆柱状形态。结论:(1)利用人腰髓连续切片可以进行人体脊髓的三维重建,并进一步对脊髓内部结构进行三维可视化研究。(2)利用石蜡包埋和“硬”定位技术可以获得颈髓节段连续横断切面图像,进行三维重建并对重建结构进行自由观察和测量。(3)利用大鼠脊髓的连续LFB染色切片,结合计算机三维重建技术能够进行大鼠皮质脊髓束的三维重建,并提供测量数据。

关键词：虚拟人连续切片表面重建 luxol fast blue 3D-DOCTOR 脊髓三维重建石蜡切片皮质脊髓束脊髓损伤大鼠

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大鼠皮质脊髓束的应用解剖学研究

大鼠皮质脊髓束的应用解剖学研究

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作者：刘苏南通大学

学位级别：硕士

第一部分皮质脊髓束在大鼠脊髓内的精确定位目的：确定大鼠皮质脊髓束在延髓和脊髓白质内的走行和精确定位。方法：选用成年SD大鼠，采用luxol fast blue(LFB、)染色法和protein kinase Cγ(PKCγ)特异性抗体免疫组织化学染色法在冠状... 详细信息

第一部分皮质脊髓束在大鼠脊髓内的精确定位目的：确定大鼠皮质脊髓束在延髓和脊髓白质内的走行和精确定位。方法：选用成年SD大鼠，采用luxol fast blue(LFB、)染色法和protein kinase Cγ(PKCγ)特异性抗体免疫组织化学染色法在冠状面、矢状面、横断面三种不同切面上对正常大鼠皮质脊髓束进行解剖定位。结果：在延髓锥体中，LFB染色标记的深蓝色的有髓纤维经锥体交叉至脊髓颈、胸、腰、骶段后索腹侧，与周围淡染的纤维易于区别;PKCγ阳性反应产物呈棕色，分布于延髓腹侧面的锥体中，在延髓锥体下部绝大部分交叉到背侧面，在脊髓白质内沿后索腹侧下行，至脊髓的骶尾段。同时延髓和脊髓背角神经元中也有PKCγ免疫阳性物质存在，在脊髓前索和外侧索未见有PKCγ阳性反应产物。LFB阳性纤维和PKCγ免疫阳性反应产物在延髓锥体和脊髓后索内的定位分布与大鼠皮质脊髓束在延髓和脊髓中的位置和走行相一致。结论：运用LFB染色和PKCγ特异性抗体免疫组织化学染色可以清晰对正常大鼠皮质脊髓束进行精确解剖定位，为进一步研究皮质脊髓束的损伤和功能重建提供形态学基础。第二部分大鼠皮质脊髓束半横段损伤模型的建立目的：成功制作大鼠皮质脊髓束半横断损伤模型。方法：选择性切割大鼠延髓左侧锥体，建立大鼠皮质脊髓束半横断损伤模型，采用斜板实验进行行为学检测，运用LFB染色法、生物素化葡聚糖胺(BDA)神经示踪法和PKCγ免疫组织化学染色法对模型进行形态学评判。结果：皮质脊髓束损伤组大鼠术后右侧前后肢瘫痪，斜板实验显示运动功能受限;LFB染色可以看出损伤部位左侧皮质脊髓束无luxol fast blue浓染神经纤维束;BDA神经示踪法结果显示在锥体交叉平面，仅见一束BDA阳性反应产物经右侧交叉至左侧，在脊髓后索的左侧半下行至骶尾段，而在损伤平面以下，未见有BDA阳性反应产物经左侧锥体交叉至右侧，在整个脊髓后索的右侧半未见有BDA阳性反应产物。PKCγ免疫组织化学染色结果发现延髓锥体右侧半有一束PKCγ阳性反应产物经右侧交叉至左侧，脊髓后索腹侧部左侧半有PKCγ阳性反应产物，而脊髓后索腹侧部右侧半未见有PKCγ阳性反应产物。结论：选择在延髓切断一侧锥体制作皮质脊髓束半横断损伤模型，定位准确，重复性好，结果可靠，是研究皮质脊髓束的可塑性和神经轴突再生的理想动物模型。BDA神经束路示踪法和PKCγ免疫组织化学染色法可作为皮质脊髓束半横断损伤模型的形态学指标。第三部分大鼠皮质脊髓束半横断损伤后皮质脊髓束超微结构的变化目的：观察皮质脊髓束半横断损伤后皮质脊髓束超微结构的变化。方法：选择性切割大鼠延髓左侧锥体，建立皮质脊髓束半横断损伤模型，模型制作后4d、14d、28d，采用透射电镜观察受损皮质脊髓束超微结构的变化。结果：皮质脊髓束半横断损伤后，受损皮质脊髓束髓鞘和轴索发生肿胀，形态不规则。随着时间的延长，溃变进行性加重，受损皮质脊髓束主要表现为髓鞘破坏、溶解及轴索脱髓鞘病变、胞浆浓缩、细胞器增多及空泡样变性。脊髓颈、胸、腰段受损皮质脊髓束的溃变比损伤部位严重。结论：皮质脊髓束半横断损伤后，受损皮质脊髓束中的髓鞘和轴索发生进行性溃变。

关键词：皮质脊髓束 protein kinase cγ 免疫组织化学 luxol fast blue 皮质脊髓束半横断损伤生物素化葡聚糖胺 PKCγ 皮质脊髓束超微结构半横断损伤溃变髓鞘

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