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lncrna snhg12通过调控E2F5对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

中华男科学杂志 2023年第2期29卷 113-119页

作者：徐思蕾辜晓惠冯强电子科技大学医学院四川成都610051 四川省医学科学院/四川省人民医院泌尿外科四川成都610031

目的:分析lncrna snhg12通过调控E2F5对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:构建抑制lncrnasnhg12表达的PC3细胞,分RWPE-1组、DU145组、LNCaP组、PC3组,采用实时荧光RT-PCR检测lncrna snhg12、E2F5表达。并干扰E2F5表达从而对PC... 详细信息

目的:分析lncrna snhg12通过调控E2F5对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:构建抑制lncrnasnhg12表达的PC3细胞,分RWPE-1组、DU145组、LNCaP组、PC3组,采用实时荧光RT-PCR检测lncrna snhg12、E2F5表达。并干扰E2F5表达从而对PC3细胞转染,进一步分为NC组、si-NC组、si-snhg12组、si-E2F5组、si-snhg12+OE-si-NC、si-snhg12+OE-E2F5组,检测各组细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭情况。结果:与癌旁组织相比,前列腺癌组织中lncrna snhg12、E2F5表达水平升高(Plncrna snhg12、E2F5表达水平升高,且PC3组lncrna snhg12、E2F5表达水平最高(Psnhg12组snhg12表达水平降低(Plncrna snhg12表达的PC3细胞株构建成功,与si-NC组相比,si-snhg12组CyclinD1、MMP-9、OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数降低,凋亡细胞升高(Psnhg12荧光素酶活性降低(Psnhg12荧光素酶活性影响较小(P>0.05)。与si-NC组相比,抑制lncrna snhg12表达可使PC3细胞中E2F5表达、CyclinD1、MMP-9、OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数降低,凋亡细胞升高(Psnhg12+OE-si-NC组相比,si-snhg12+OE-E2F5组E2F5表达、CyclinD1、MMP-9、OD值、迁移细胞数、侵袭细胞数升高,凋亡细胞降低(Plncrna snhg12表达,可对E2F5表达进行调控,抑制前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭,并促进其癌细胞的凋亡。

关键词：前列腺癌 lncrna snhg12 E2F5 增殖侵袭迁移

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lncrna snhg12通过miR-129-5p/GTPBP4对肝细胞癌进展的促进作用

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第三军医大学学报 2021年第18期43卷 1783-1795页

作者：章诺贝沈浩黄神安陈新南昌大学第二附属医院消化内科南昌330000 南昌大学第二附属医院核医学科南昌330000

目的探讨长链非编码RNA(lncrna)核仁小RNA宿主基因12(small nucleolar RNA host gene 12, snhg12)对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)发展的调控机制。方法通过RT-qPCR检测长链非编码RNA(long noncoding RNA, lncrna) snhg12在肝癌组织和肝癌细胞系中的表达水平;分析肝癌组织中lncrna snhg12的表达水平与HCC患者临床病理参数的关系;运用MTT实验、细胞集落形成实验、Transwell实验、划痕愈合实验、裸鼠成瘤实验检测lncrna snhg12、miR-129-5p、GTPBP4在肝癌细胞活性、增殖、迁移、侵袭中的作用;采用荧光素酶报告基因、RT-qPCR、Western blot实验来评估lncrna snhg12、miR-129-5p、GTPBP4之间的互相作用。结果 lncrna snhg12在肝癌组织和肝癌细胞系中表达上调(Plncrna snhg12表达水平较高的HCC患者相比其表达水平较低的患者预后更差(Plncrna snhg12表达水平与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移存在正相关的关系;lncrna snhg12可促进HCC的细胞活性、增殖、迁移及侵袭(P129-5p在肝癌组织中表达下调,其可抑制肝癌细胞活性、增殖、迁移及侵袭(Plncrna snhg12可通过与miR-129-5p进行竞争性结合,从而促进GTPBP4的表达(Plncrna snhg12可通过调控miR-129-5p/GTPBP4轴从而促进HCC的进展。

关键词：肝细胞癌 lncrna snhg12 miR-129-5p GTPBP4

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lncrna snhg12调控miR-138-5p/HIF-1α轴改善缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤的研究

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中国免疫学杂志 2023年第12期39卷 2494-2500页

作者：魏宗强王琳茹胡文贤张娟子黄贤明李林李强青岛大学附属青岛市海慈医院血管外科中心青岛266033

目的:研究长链非编码RNA(lncrna)小核仁RNA宿主基因12(snhg12)调控miR-138-5p/低氧诱导因子-1α(HIF-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+LncRN... 详细信息

目的:研究长链非编码RNA(lncrna)小核仁RNA宿主基因12(snhg12)调控miR-138-5p/低氧诱导因子-1α(HIF-1α)轴改善缺氧/复氧(H/R)人血管内皮细胞损伤的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),随机分为对照组、H/R模型组、H/R+lncrna snhg12过表达组、H/R+miR-138-5p mimics组、H/R+共转染组、H/R+共转染阴性对照组,各转染组分别进行转染处理,除对照组外,其余各组给予5 h缺氧,再进行复氧1 h处理,诱导细胞模型,然后通过CCK-8实验检测各组细胞活力情况;通过流式细胞实验检测各组细胞凋亡情况,比较各组细胞凋亡率;通过试剂盒测量各组细胞活性氧(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)及炎症因子IL-6、IL-17、IL-18水平;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验测定各组细胞miR-138-5p及HIF-1αmRNA表达;通过免疫印迹实验检测各组细胞凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及HIF-1α蛋白表达。结果:与对照组相比,H/R模型组细胞凋亡率、细胞ROS、LDH、IL-6、IL-17及IL-18水平、细胞HIF-1αmRNA和蛋白水平、细胞caspase-9、Bax及HIF-1α蛋白水平升高(Plncrna snhg12过表达组细胞活力、细胞HIF-1αmRNA及蛋白水平升高(P0.05)。结论:lncrna snhg12可通过下调miR-138-5p表达,上调HIF-1α表达,抑制H/R诱导的HUVECs炎症与氧化应激,减轻细胞损伤及凋亡。

关键词： lncrna snhg12 miR-138-5p/HIF-1α 缺氧/复氧人血管内皮细胞损伤

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lncrna snhg12在癌症预后评估价值的Meta和生物信息学分析

LncRNA SNHG12在癌症预后评估价值的Meta和生物信息学分析

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作者：王永峰甘肃中医药大学

学位级别：硕士

目的:小核仁RNA宿主基因12（snhg12）是一种新发现的肿瘤标志物。snhg12在多种肿瘤中有异常表达,它可能影响多种癌症的发生发展。然而,关于snhg12在人类癌症中的作用机制仍不清楚。我们的研究旨在分析snhg12在泛癌中的预后价值,并揭示SN... 详细信息

目的:小核仁RNA宿主基因12（snhg12）是一种新发现的肿瘤标志物。snhg12在多种肿瘤中有异常表达,它可能影响多种癌症的发生发展。然而,关于snhg12在人类癌症中的作用机制仍不清楚。我们的研究旨在分析snhg12在泛癌中的预后价值,并揭示snhg12表达与肿瘤免疫之间的相关性。方法:1.我们搜索了数据库:EMBASE、Web of Science、Pub Med和The Cochrane Library,以确定相关性研究。使用风险比（Hazard Ratio,HR）和相应的95%置信区间（95%CI）分别评估snhg12异常表达与癌症患者生存和临床病理特征（CFS）的关联。采用STATA12进行数据合并和发表偏倚检测。2.我们利用癌症基因组图谱（TCGA）、GTEx数据库、癌细胞系百科全书（CCLE）数据库,全面了解snhg12在泛癌中的表达。***数据库中,采用Kaplan-Meier法和单因素Cox回归分析进一步评估了snhg12在各种癌症中的预后价值。4.此外,应用ESTIMATE算法,计算免疫细胞和基质细胞得分来探索snhg12与肿瘤免疫微环境（TME）的关系。5.使用CIBERSORT方法计算所有癌症患者中的22种免疫浸润细胞的比例。6.随后通过Spearman方法研究了snhg12与肿瘤突变负荷（TMB）、微卫星不稳定性（MSI）、错配修复（MMR）、DNA甲基转移酶（DNMTs）、TME、免疫细胞浸润之间的关联。7.反转录-聚合酶链反应RT-PCR检测snhg12在胃癌细胞系（HGC-27、MGC-803和AGS）以及正常胃上皮细胞（GES-1）中的表达水平。结果:1.我们的荟萃分析的结果表明,snhg12的过表达与较差的总生存期（OS）（HR=1.44,95%CI,1.33–1.56,P＜0.001）、无病生存期（DFS）（HR=1.49,95%CI,1.18–1.88,P=0.001）和无复发生存期（RFS）（HR=1.48,95%CI 1.14–1.92,P=0.003）显著相关。snhg12的过表达与肿瘤大小、高的TNM分期、淋巴结转移、远处转移、高分化显着正相关。2.在TCGA数据库中,进一步评估泛癌中的snhg12表达水平,发现snhg12在大多数肿瘤中高表达。***12过表达的患者在BLCA、LUAD、BRCA、HNSC、LUSC、LUAD中预后较好,在ACC,KIRC,LIHC,HCC预后较差。***12的异常表达与多种癌症中的TMB、MSI正相关,且与MMR相关基因、DNMTs、TME和免疫浸润密切相关。5.在胃癌中,snhg12的表达与TMB、MSI呈正相关,与基质细胞、免疫细胞以及总的免疫微环境评分显著负相关,与IPS评分显著负相关。表明snhg12表达预测免疫微环境,以及胃癌患者免疫治疗效果。***-PCR检测表明:与正常胃上皮细胞相比,snhg12在胃癌细胞系中呈高表达。7.通过GSE70880芯片筛选出差异表达的基因,和靶基因取交集,提取snhg12在胃癌中调控的靶基因10个mi RNA和31个m RNA,构建snhg12的ce RNA网络。结论:根据我们的荟萃分析,在癌症患者中,snhg12的过表达与较差的OS、DFS、RFS有关。此外,生物信息学分析表明,snhg12在多种癌症中显著上调,并且与预后密切相关。snhg12与TMB、MSI、TME和免疫细胞浸润有关,可能调节癌症中肿瘤免疫和TME,从而提供基于免疫的抗癌策略。因此,snhg12可用作肿瘤标志物和治疗靶点。snhg12可以用来提高癌症诊断,发现潜在的治疗目标,并改善预后。将定期临床检查与snhg12表达评估相结合,将为患者提供了有针对性的预后和更多的治疗选择。

关键词： lncrna snhg12 癌症预后 meta分析生物信息学分析

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lncrna snhg12在急性脑梗死中的临床分析及其相关机制研究

LncRNA SNHG12在急性脑梗死中的临床分析及其相关机制研究

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作者：卫增震大连医科大学

学位级别：硕士

目的:1、分析血清中lncrna snhg12的表达在急性脑梗死(ACI)患者早期诊断、病情判断和预后预测中的作用以及与ACI患者血清炎症因子表达水平的相关性;2、探究lncrna snhg12通过调控人类脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞增殖、凋亡以及血管形成... 详细信息

目的:1、分析血清中lncrna snhg12的表达在急性脑梗死(ACI)患者早期诊断、病情判断和预后预测中的作用以及与ACI患者血清炎症因子表达水平的相关性;2、探究lncrna snhg12通过调控人类脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞增殖、凋亡以及血管形成相关因子参与ACI病理过程的相关机制。方法:本研究分为两部分。一、临床研究部分:纳入2018年10月至2019年12月至泰州市人民医院卒中中心就诊的ACI患者60例,为ACI组,选取30例同期健康志愿者作为健康对照组,采用荧光实时定量反转录聚合酶链反应(RT-q PCR)法检测并统计分析ACI组和健康对照组患者血清中lncrna snhg12表达水平差异。利用受试者工作曲线(ROC)分析lncrna snhg12对ACI的诊断价值。ACI组患者入院后依据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评估其神经功能缺损程度,并在其发病后第30天参考格拉斯哥预后评分(GOS)进行预后评价。应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法分别检测两组研究对象血清中炎症因子:C-反应蛋白(CRP),白介素-6(IL-6)、白介素8(IL-8)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达差异。分析lncrna snhg12与炎症因子表达水平、NIHSS评分及GOS评分之间的相关性。二、细胞实验部分:研究对象是人类脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)。收取ACI患者与健康人的血清,利用RT-q PCR法检测ACI患者血清培养组、健康人血清培养组和空白对照组三组培养的HUVECs细胞中的lncrna snhg12表达,并进行统计分析。HUVECs细胞根据不同转染方法,分为以下五组:snhg12模拟物组(pc DNA3.1-snhg12组)、模拟物阴性对照组(pc DNA3.1组)、小干扰RNA-snhg12组(si RNA-snhg12组)、小干扰RNA阴性对照组(si RNA-NC组)和空白对照组(Control组),采用CCK8细胞增殖实验和流式细胞术分析各组细胞增殖和凋亡的情况,评估不同lncrna snhg12表达水平对HUVECs细胞增殖和凋亡的影响。应用RT-q PCR、蛋白质印迹法(Western blot)方法检测五组HUVECs细胞中的血管内皮生长因子(VEGF)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)在m RNA及蛋白水平方面的表达,并进行统计学分析。结果:1、ACI患者的血清中lncrna snhg12水平与健康对照组相比升高明显(5.86±2.31 VS 2.04±1.11),Plncrna snhg12的曲线下面积(AUC)为0.949,95%置信区间(CI):0.908～0.989。2、ACI组患者血清中CRP、IL-6、IL-8及TNF-α的表达水平较健康对照组均明显增高,具体数值为:CRP(11.34±4.1)VS(6.20±2.51);IL-6(11.20±3.82)VS(6.49±2.57);IL-8(27.08±8.91)VS(20.23±4.61);TNF-α(54.84±14.45)VS(44.09±6.13),Plncrna snhg12的表达和患者的NIHSS评分为负相关(r=-0.331,Psnhg12表达与CRP(r=-0.457,P0.05)及IL-8(r=0.048,P>0.05)表达无相关性。ACI患者血清中CRP的表达与患者入院时NIHSS评分为正相关性(r=0.422,P0.05)、IL-8(r=0.252,P>0.05)及TNF-α(r=0.246,P>0.05)的表达与患者入院时NIHSS评分无相关性。ACI患者血清中CRP的表达与GOS评分呈负相关性(r=-0.369,P0.05)、IL-8(r=-0.178,P>0.05)和TNF-α(r=-0.237,P>0.05)的表达与GOS评分无相关性。3、ACI患者血清培养组细胞中lncrna snhg12的含量与健康人血清对照组及空白对照组相比,显著上调(Psnhg12组与pc DNA3.1组及Control组对比,HUVECs的细胞增殖率显著提升(Psnhg12组与si RNA-NC组及Control组对比,HUVECs的细胞增殖率下降明

关键词：急性脑梗死 lncrna snhg12 炎症因子细胞凋亡

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长链非编码RNA snhg12在脑胶质瘤中的表达及功能研究

长链非编码RNA SNHG12在脑胶质瘤中的表达及功能研究

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作者：蒋世一南京医科大学

学位级别：硕士

背景:胶质瘤来源于脑和脊髓胶质细胞的癌变,是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤。近年来尽管在手术及联合放化疗等治疗手段上有了明显提高,但胶质瘤的预后情况仍不理想,平均生存期只有12～15个月。因此寻找新的有效的诊断指标和治疗... 详细信息

背景:胶质瘤来源于脑和脊髓胶质细胞的癌变,是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤。近年来尽管在手术及联合放化疗等治疗手段上有了明显提高,但胶质瘤的预后情况仍不理想,平均生存期只有12～15个月。因此寻找新的有效的诊断指标和治疗手段显得尤为重要。长链非编码RNA(lncrna)是一种长度超过200nt的RNA分子,它们缺乏蛋白编码的潜能。近几年大量研究表明lncrna能通过多种机制调控基因的表达,从而在细胞增殖、细胞周期和凋亡、侵袭转移等多种生物学进程中发挥重要的作用。长链非编码RNAsnhg12已被发现在骨肉瘤、结直肠癌、肝细胞癌等肿瘤中高表达,并具有促癌作用,而在胶质瘤中snhg12的表达情况和生物学功能尚不清楚。目的:研究长链非编码RNA snhg12在胶质瘤组织中的表达及在胶质瘤细胞U251和U87中发挥的生物学功能,并探讨可能的作用机制。方法:分析中国脑胶质瘤基因组计划数据库(CGGA)和脑肿瘤分子(REMBRANT)数据库中snhg12在不同级别胶质瘤组织中的表达数据,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测27例胶质瘤组织和5例正常脑组织中snhg12的表达情况,运用CGGA和REMBRANT数据分析snhg12的表达水平与胶质瘤患者临床预后的相关性。将靶向snhg12的小干扰RNA(siRNA)运用脂质体介导法转染胶质瘤细胞U251和U87,下调snhg12的表达水平,并通过实时荧光定量PCR检测下调效果。利用CCK-8实验研究snhg12对细胞增殖的影响,利用transwell实验探索snhg12对细胞侵袭和迁移能力的影响,通过流式细胞仪检测snhg12对胶质瘤细胞周期的影响。通过基因本体(GO)分析和通路富集(pathway)分析获得snhg12相关差异基因的生物学功能和信号通路。通过Western blotting实验检测转染后细胞内CDK4、CDK6、Vimentin和MMP-9蛋白的表达。利用生物信息学软件miRcode和CGGA数据库分析与snhg12负相关的microRNAs,并使用实时荧光定量PCR和双荧光素酶报告基因实验验证snhg12与miR-181b-5p的相互作用。结果:lncrna snhg12在胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常脑组织,并且表达量随着胶质瘤等级的增高而增高,胶质瘤患者中高表达snhg12提示预后不良。抑制snhg12的表达量后胶质瘤细胞U251和U87的增殖、侵袭和迁移能力明显下降,并且细胞周期进程受到阻滞。snhg12可能与胶质瘤细胞的DNA损伤修复、细胞外基质调控、细胞黏附、细胞周期和有丝分裂等生物学进程有关,抑制snhg12的表达量后细胞周期和迁移相关蛋白指标CDK4、CDK6、Vimentin和MMP-9的表达均有下降。MiR-181b-5p的表达量与snhg12呈负相关,miR-181b-5p mimics可以明显抑制lncrna snhg12-WT的荧光素酶活性。结论:长链非编码RNA snhg12在胶质瘤组织中的表达明显高于正常脑组织,并且表达量与胶质瘤的恶性程度有关。snhg12能促进胶质瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和周期进程,这种促癌基因的作用可能是通过抑制miR-181b-5p的表达水平以及调控CDK4、CDK6、Vimentin和MMP-9蛋白的表达实现的。因此,lncrna snhg12有望成为胶质瘤治疗的新的靶点。

关键词：胶质瘤 lncrna snhg12 增殖侵袭迁移 miR-181b-5p

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