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LncRNA linc01194通过与IGF2BP1结合上调SOX2的表达促进子宫内膜癌的进展

LncRNA linc01194通过与IGF2BP1结合上调SOX2的表达促进子宫内膜...

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作者：黄政豪广州医科大学

学位级别：硕士

背景子宫内膜癌在女性恶性肿瘤的发病率中排名第二,子宫内膜癌的转移和侵袭能力强,是影响患者远期生存率的主要因素。虽然对于子宫内膜癌的治疗取得进展,而晚期子宫内膜癌患者的肿瘤已侵犯或转移至其他部位,这些患者的预后较差。相关研... 详细信息

背景子宫内膜癌在女性恶性肿瘤的发病率中排名第二,子宫内膜癌的转移和侵袭能力强,是影响患者远期生存率的主要因素。虽然对于子宫内膜癌的治疗取得进展,而晚期子宫内膜癌患者的肿瘤已侵犯或转移至其他部位,这些患者的预后较差。相关研究表明,长非编码RNA(lnc RNAs)在癌症中表达上调或下降,通过多途径发挥重要作用,目前,长非编码RNA 01194(linc01194)在子宫内膜癌中尚未被研究。总而言之,发现和制定有效的早期预后指标对于子宫内膜癌具有重要的临床意义。方法1.使用癌症基因组图谱(TCGA)数据库及star Base数据库,我们检索并且分析了子宫内膜癌组织中linc01194的表达水平。使用star Base数据库查找linc01194的下游蛋白。2.通过定量实时逆转录聚合酶链反应(q RT-PCR),检测子宫内膜癌细胞系(Ishikawa,HEC-1B,HEC-1A,KLE)和组织标本(正常子宫内膜组织:28例;子宫内膜癌组织:99例)中linc01194的表达。***基因敲除技术:培养Ishikawa细胞,待细胞状况良好处于对数生长期,利用Lipofectamine 3000转染si-linc01194,构建linc01194敲低的细胞库。***-8、Transwell、伤口愈合试验和细胞凋亡实验用于检测linc01194在子宫内膜癌细胞系中的生物学功能。***结合蛋白免疫沉淀技术(RIP)用于分析linc01194与胰岛素样生长因子2m RNA结合蛋白1(IGF2BP1)之间的关系。6.通过蛋白印迹实验分析linc01194的水平与IGF2BP1、性别决定区域Y盒2(SOX2)蛋白的表达水平之间的关系。7.数据分析:Graph Pad Prism 8.0软件用于绘图以及统计分析,其中,p01194在子宫内膜癌中表达升高;***01194表达水平下降,子宫内膜癌细胞的活力以及侵袭能力下降,同时促进细胞凋亡;***01194与IGF2BP1结合,并调控其表达水平;4.先前的研究表明,IGF2BP1在子宫内膜癌中通过m6A修饰促进SOX2m RNA的稳定性从而促进SOX2的表达。本研究中,linc01194表达水平下降抑制了SOX2的表达。结论linc01194可通过与IGF2BP1结合促进下游蛋白SOX2的表达,从而促进子宫内膜癌的发展。因此,linc01194可能成为子宫内膜癌早期诊断及预后预测的新生物标志物。

关键词： linc01194 子宫内膜癌 IGF2BP1 SOX2

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