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leptin基因在团头鲂成鱼各组织和早期发育中的表达分析

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华中农业大学学报 2016年第1期35卷 92-98页

作者：赵鸿昊李学华曾聪王卫民董在杰高泽霞华中农业大学水产学院/农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室/农业部淡水生物繁育重点实验室武汉430070 淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心武汉430070 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心无锡214081

应用荧光定量PCR方法检测团头鲂leptin及其相关基因—瘦素受体(leptin receptor,leptin-R)和瘦素受体重叠转录产物类似物1基因(leptin receptor overlapping transcript like-1,leprotl-1)在胚胎发育早期及成鱼各组织的表达量。结果显... 详细信息

应用荧光定量PCR方法检测团头鲂leptin及其相关基因—瘦素受体(leptin receptor,leptin-R)和瘦素受体重叠转录产物类似物1基因(leptin receptor overlapping transcript like-1,leprotl-1)在胚胎发育早期及成鱼各组织的表达量。结果显示,3个基因在团头鲂成鱼所有检测组织中均有所表达,表明3个基因在团头鲂机体中具有多重生理功能。早期发育过程中的表达量结果显示leptin-R和leprotl-1基因在胚胎阶段的表达水平变化趋势一致,而leptin在破膜后5d前一直处于较低并呈波动性变化;出膜后12d时leptin-R和leprotl-1基因表达量均达到了峰值,而leptin基因从破膜后第5天开始表达量持续上升,在第15天到达峰值,表明3个基因可能涉及到胚胎发育早期阶段的能量调控。Pearson相关分析显示3个基因在团头鲂胚胎发育早期中的表达均为显著正相关关系(P<0.05)。

关键词：团头鲂 leptin基因 leptin-R基因 leprotl-1基因早期发育组织表达模式

leptin基因第3469位点基因型对合作猪繁殖性能和体尺的影响

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畜牧与兽医 2015年第10期47卷 69-72页

作者：康永刚李明艳徐州生物工程职业技术学院江苏徐州221006 青海大学青海西宁810016

以leptin基因作为控制猪产仔性状和生长性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术在合作猪群体中进行单核苷酸多态性(SNPs)检测,分析leptin基因的遗传多样性及突变位点基因型频率与基因频率。同时,结合生长性状和母猪产仔性状记录,研究了不同基... 详细信息

以leptin基因作为控制猪产仔性状和生长性状的候选基因,采用PCR-SSCP技术在合作猪群体中进行单核苷酸多态性(SNPs)检测,分析leptin基因的遗传多样性及突变位点基因型频率与基因频率。同时,结合生长性状和母猪产仔性状记录,研究了不同基因型对产仔性状、生长性状的遗传效应。结果:通过对合作猪leptin基因SNPs分析,检测到了2个等位基因,3种基因型。leptin基因第3469位点的基因型效应对合作猪体重、体高、胸围、头长、头胎总产仔数、2胎总产仔数、2胎活产仔数、3胎总产仔数、3胎活产仔数和4胎活产仔数影响均显著(P0.05)。这表明leptin基因第3469位点的突变与合作猪的产仔数和生长性状有密切关系,leptin基因可作为控制合作猪产仔性状和生长性状的候选基因。

关键词： leptin基因合作猪产仔性状生长性状

leptin基因E2JW和E2FB位点多态性及其与新疆褐牛体尺和胴体性状的相关性研究

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Leptin基因E2JW和E2FB位点多态性及其与新疆褐牛体尺和胴体性状的...

作者：萨吉代姆·麦麦提新疆农业大学

学位级别：硕士

leptin是由下丘脑分泌的一种肽类激素,通过下丘脑调节作用于靶细胞膜上的受体,将肥胖等信号以负反馈环方式传达给大脑,因而在内分泌、血管生成、免疫功能、繁殖、骨形成、饲料转化率及生长发育等方面发挥生理作用。本研究在前期研究的... 详细信息

leptin是由下丘脑分泌的一种肽类激素,通过下丘脑调节作用于靶细胞膜上的受体,将肥胖等信号以负反馈环方式传达给大脑,因而在内分泌、血管生成、免疫功能、繁殖、骨形成、饲料转化率及生长发育等方面发挥生理作用。本研究在前期研究的基础上选取42头健康的成年新疆褐牛,采用PCR-SSCP和PCR-RFLP技术检测新疆牛背最长肌leptin基因外显子ⅡE2JW和E2FB多态性,运用SPSS软件的ANOVA过程分析ⅡE2JW和E2FB位点不同基因型与新疆褐牛体尺性状(体重、体高、十字部高、体斜长、胸围、后腿围、腰角宽、坐骨宽、髋宽)、胴体性状(眼肌面积、背膘厚度、眼肌高度、12-13QIB、BPI)、屠宰性状(胴体重、屠宰率、胴体长、胴体深、胴体胸深、腰部肉厚、肋部肉厚、肉质级别)及不同分割肉(板键、辣椒条、眼肉、里脊、外脊、霖肉、米龙)的肉品质性状(pH、持水力、蛋白质、脂肪、水分、色差L、a、b、蒸煮损失)的关联性,为新疆褐牛胴体和肉质性状筛选重要候选基因,也为指导新疆褐牛肉用新类型选育及分子标记辅助育种工作奠定基础。研究结果如下：1、leptin基因外显子Ⅱ E2JW和E2FB位点在新疆褐牛群体中均呈现多态性。E2JW有AA、BB和AB三种基因型,其基因型频率分别为0.1908、0.2857和0.5238,A、B等位等位基因频率分别为0.4782和0.5217,且B为优势等位基因。经测序发现：该位点T103C、C113T、C126G和T252A处存在突变。群体多态信息含量0.3727,属于中度多态、遗传杂合度0.4954;E2FB也有三种基因型,分别为CC、CT和TT型,其基因型频率为0.0476、0.5714和0.3809,C、T等位基因频率为0.3333、0.6667,T为优势等位基因。测序结果表明：该位点T222C处发生突变。群体多态信息含量(PJC)为0.3456、属于中度多态、遗传杂合度为0.4444。2、leptin基因外显子Ⅱ E2JW和E2FB位点多态性对新疆褐牛体尺性状显著影响。E2JW位点中AA基因型个体体高、十字部高均值显著高于BB基因型个体(P基因型个体后腿围显著高于AB型个体(P基因型个体(P基因型个体均值显著高于CC型个体(Pleptin基因外显子Ⅱ E2JW位点BB型米龙蒸煮损失显著低于AA型和AB型(P基因型个体眼肌面积均显著低于CT、TT基因型个体(P基因型个体之间无显著差异(P>0.05)。本研究结果表明leptin基因外显子Ⅱ E2JW和E2FB位点多态性显著影响新疆褐牛体尺性状和胴体性状,而与分割肉的相关性尚需在大样本基础上进一步研究验证。

关键词：新疆褐牛 leptin基因 E2JW和E2FB位点多态性体尺胴体性状

光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)leptin基因克隆及禁食-再投喂对其表达的影响

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海洋与湖沼 2017年第4期48卷 822-829页

作者：穆方申苗亮李明云侯红红李笑萌徐玉敏宁波大学教育部应用海洋生物技术重点实验室宁波315211

瘦素(leptin)是在动物摄食和能量代谢调节中具有重要作用的一种蛋白。为研究光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)中leptin基因(AfLep)的结构和功能,作者克隆了其c DNA序列全长。结果显示AfLep由1315个核苷酸组成,含1个长度为516bp的开放... 详细信息

瘦素(leptin)是在动物摄食和能量代谢调节中具有重要作用的一种蛋白。为研究光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)中leptin基因(AfLep)的结构和功能,作者克隆了其c DNA序列全长。结果显示AfLep由1315个核苷酸组成,含1个长度为516bp的开放阅读框,预测编码蛋白由171个氨基酸残基组成并具有长度为20aa的信号肽。系统进化树中AfLep与其他鲤科鱼类的leptin蛋白聚为一簇,与齐口裂腹鱼(Schizothorax prenanti)进化相关性最高。多重序列比对显示AfLep与齐口裂腹鱼leptin蛋白相似性最高(86.7%),与鲤科其他鱼类间的相似性均在80%以上。AfLep具有脊椎动物leptin蛋白的4个保守?螺旋结构,其三级结构与人leptin相似。AfLep在光唇鱼肝脏中的表达量最高,其次是脑和肾,其他组织中仅有微弱表达。实时荧光定量PCR检测显示禁食后光唇鱼肝脏AfLep表达量降低(P0.05)。上述结果表明AfLep参与了光唇鱼的摄食管理和能量代谢调控。

关键词：光唇鱼 leptin基因组织表达禁食-再投喂

猪leptin基因的SNP筛查及其与生长性状的关联分析

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华中农业大学学报 2008年第2期27卷 251-257页

作者：刘德武杜颖军张豪吴珍芳张细权杨关福华南农业大学动物科学学院广州510642

根据猪leptin基因的已知序列设计引物(序列号:U66254、AF026976),PCR扩增产物用变性高效液相色谱技术(DHPLC)和直接测序法进行单核苷酸多态性(SNP)筛查,对其中的4个SNP位点(C3469T、C3952G、C4115T和C4227T)进行基因型与生长性状的关联... 详细信息

根据猪leptin基因的已知序列设计引物(序列号:U66254、AF026976),PCR扩增产物用变性高效液相色谱技术(DHPLC)和直接测序法进行单核苷酸多态性(SNP)筛查,对其中的4个SNP位点(C3469T、C3952G、C4115T和C4227T)进行基因型与生长性状的关联分析。结果共获得35个多态位点,其中C4115T和C4227T位点在长蓝F2资源群中分别缺少1个基因型,且与各性状相关不显著;C3469T位点与猪的平均日增重存在极显著相关(P<0.01),TT型和CC型显著高于TC型;C3952G位点与猪的体长和眼肌面积等存在一定相关(P<0.1)。

关键词：猪 leptin基因 SNP 生长性状关联分析

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鸡leptin基因正确性的免疫验证

Zoological Research 2005年第2期26卷 168-173页

作者：邵西兵施振旦于迎春刘颖梁少东陈楠华南农业大学动物科学学院广东广州510642

①取20只240日龄的粤黄鸡种母鸡平分为处理组和对照组,分别在第3、31、63和84d对之接种鸡leptin重组融合蛋白(处理组)或BSA(对照组)1mL/羽。每天记录产蛋率,每10天测定采食量,每两周称重,在试验的第1、31、53、78和91d采血。结果表明Lep... 详细信息

①取20只240日龄的粤黄鸡种母鸡平分为处理组和对照组,分别在第3、31、63和84d对之接种鸡leptin重组融合蛋白(处理组)或BSA(对照组)1mL/羽。每天记录产蛋率,每10天测定采食量,每两周称重,在试验的第1、31、53、78和91d采血。结果表明leptin处理组的血浆抗leptin抗体水平和leptin水平在免疫后显著高于对照组(P0.05);处理组血浆总T3和总T4水平与对照组差异不显著(P>0.05)。②取12只50日龄的粤黄鸡后备小母鸡,平分成处理组和对照组,分别肌注含抗leptin抗体的卵黄提取液和生理盐水6mL/只,处理组在2、4、6h的累积采食量显著高于对照组(P0.05)。两个试验通过免疫重组鸡Lep tin融合蛋白,使鸡表现出leptin功能的丧失,证明目前所克隆的鸡leptin基因在家鸡中的确存在和其正确性。

关键词： leptin基因免疫采食量脂肪沉积产蛋率粤黄鸡

鸭leptin基因在大肠杆菌中的融合表达及生物学活性分析

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中国农业科学 2007年第11期40卷 2615-2620页

作者：戴汉川张晓伟龙良启伍晓雄华中农业大学动物科技学院华中农业大学动物科技学院武汉430070

【目的】研究鸭leptin在体外高效表达特点,探讨表达产物的生物学活性及其功能。【方法】构建重组鸭leptin基因原核表达菌株,重组菌株经不同浓度IPTG和不同时间诱导后,对表达蛋白进行提取、纯化、复性和浓缩,经注射昆明小鼠后,对小鼠的... 详细信息

【目的】研究鸭leptin在体外高效表达特点,探讨表达产物的生物学活性及其功能。【方法】构建重组鸭leptin基因原核表达菌株,重组菌株经不同浓度IPTG和不同时间诱导后,对表达蛋白进行提取、纯化、复性和浓缩,经注射昆明小鼠后,对小鼠的体重﹑采食量和体脂含量进行分析。【结果】鸭leptin在大肠杆菌中实现了高效特异性融合表达,融合蛋白分子量约为20kD,其中16kD为鸭leptin基因表达产物,目的蛋白在0.2mmol·L-1IPTG的诱导下,表达量最高约占菌体总蛋白的57%。重组蛋白纯化﹑复性﹑浓缩后,能够明显降低小鼠摄食量、体重和体脂含量。【结论】鸭leptin基因在大肠杆菌中进行了高效融合表达,表达产物具有明显的生物学活性。

关键词：鸭 leptin基因基因表达生物学活性

4个绵羊品种leptin基因部分片段的SNPs多态性与生长发育性状的相关性分析

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畜牧兽医学报 2008年第12期39卷 1640-1646页

作者：黄丹丽陈仁金杨章平毛永江李云龙田黛君陈亮赵晓勇扬州大学动物科学与技术学院扬州225009 宁夏畜牧工作站银川750000 中宁县畜牧推广中心中宁751200

利用PCR-SSCP技术对萨福克、陶赛特、得克塞尔及滩羊4个绵羊品种358个个体leptin基因等2、3外显子进行多态性分析,共检测到7个SNPs,其中新发现5个SNPs。测序结果表明,在外显子2上无突变。内含子2上存在A99G、G115A、C150T、C171T位点。... 详细信息

利用PCR-SSCP技术对萨福克、陶赛特、得克塞尔及滩羊4个绵羊品种358个个体leptin基因等2、3外显子进行多态性分析,共检测到7个SNPs,其中新发现5个SNPs。测序结果表明,在外显子2上无突变。内含子2上存在A99G、G115A、C150T、C171T位点。外显子3上,存在G271A;C316A;G387T位点。外显子3上的SNPs使编码的氨基酸发生变化。统计分析表明A99G、C150T和A99G+C150T位点与生长发育性状存在相关性。在A99G位点,Aa基因型初生质量、日增质量、体高、胸围和尻宽指标上均高于AA基因型,初生质量、日增质量和体高指标差异显著(P基因型日增重、体高、体长、胸围和尻宽指标均高于野生基因型,差异显著(P<0.05)。

关键词：绵羊 leptin基因 SNPs 生长发育性状

重组猪生长激素对猪脂肪组织GH-R、IGF-1、IGF-R和leptin基因表达的影响

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中国兽医学报 2004年第1期24卷 56-59页

作者：周杰赵茹茜赵志辉胥清富韦习会夏东陈杰南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室江苏南京210095

选用体质量 5 0 kg左右的去势长白×大约克公猪 16头 ,随机分为试验组和对照组 ,试验组猪每日肌肉注射重组猪生长激素 (rp GH) 4 m g/头 ,2 8d后屠宰采集背部皮下脂肪 ,用 RT- PCR方法 ,以 18S r RNA作内标 ,定量分析脂肪组织中生长激... 详细信息

选用体质量 5 0 kg左右的去势长白×大约克公猪 16头 ,随机分为试验组和对照组 ,试验组猪每日肌肉注射重组猪生长激素 (rp GH) 4 m g/头 ,2 8d后屠宰采集背部皮下脂肪 ,用 RT- PCR方法 ,以 18S r RNA作内标 ,定量分析脂肪组织中生长激素受体 (GH- R)、胰岛素样生长因子 - 1(IGF- 1)、胰岛素样生长因子型受体 (IGF- R)和瘦蛋白(L eptin)的 m RNA丰度。结果显示 ,试验猪脂肪细胞 GH- R m RNA丰度比对照猪增加了 5 0 .9% (P<0 .0 5 ) ,IGF- 1m RNA丰度增加 2 7.8% (P<0 .0 5 ) ,IGF- R m RNA丰度增加 4 8.1% (P<0 .0 1) ,而 L eptin m RNA丰度则比对照猪减少 2 8.2 % (P<0 .0 5 )。结果提示 ,生长激素不仅可以直接调节脂肪组织 ,还可能通过脂肪 GH- R介导产生 IGF- 以旁 (自 )

关键词：猪生长激素脂肪组织胰岛素样生长因子-l 瘦蛋白 GH—R IGF—1 IGF—IR leptin基因基因表达