检索结果-南通市图书馆

检索条件"主题词=LeHMGR"

共 2 条记录，以下是1-10 订阅

全选清除本页清除全部题录导出标记到"检索档案"

详细简洁

排序：

硬紫草lehmgr基因的cDNA克隆及过表达毛状根的诱导

硬紫草LeHMGR基因的cDNA克隆及过表达毛状根的诱导

引用

作者：张东霞南京大学

学位级别：硕士

紫草科植物如新疆紫草、滇紫草和硬紫草的根部可合成一类萘醌类化合物-紫草宁及其衍生物,该类化合物具有抗菌、消炎、抗肿瘤、抗HIV等活性。尽管目前紫草宁及其衍生物的生物合成途径已经基本清楚,并且已分离、克隆得到许多相关代谢酶的... 详细信息

紫草科植物如新疆紫草、滇紫草和硬紫草的根部可合成一类萘醌类化合物-紫草宁及其衍生物,该类化合物具有抗菌、消炎、抗肿瘤、抗HIV等活性。尽管目前紫草宁及其衍生物的生物合成途径已经基本清楚,并且已分离、克隆得到许多相关代谢酶的基因,然而,紫草宁及其衍生物的合成受到诸多影响因子的调控,如光信号、植物激素、无机元素、真菌诱导子等,这些因素对紫草宁及其衍生物合成调控的分子机制尚不清楚,有待进一步研究。紫草宁及其衍生物是首先由苯丙素类(phenylpropanoid)代谢途径形成对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoic acid, PHB)和由甲羟戊酸(mevalonate acid, MVA)代谢途径形成焦磷酸香叶酯(geranylpyrophosphate, GPP)这两种重要的中间前体,然后在对羟基苯甲酸香叶基转移酶(p-hydroxybenzoate:geranyltransferase, PGT)的催化作用下形成香叶基-对羟基苯甲酸(m-geranyl-p-hydroxybenzoic acid, GBA),再经过其它代谢酶的级联反应后形成的。紫草宁的合成主要发生在内质网中,然后通过胞外分泌作用运输到表皮细胞原生质体外的细胞壁中。其中一个重要的代谢中间体由甲羟戊酸(MVA)途径合成,而HMGR是甲羟戊酸途径中的第一个重要限速酶。因此,克隆和获得高表达HMGR基因的紫草毛状根具有重要的理论和应用价值。本实验根据实验室前期的转录组测序数据得到的HMGR基因核心片段,通过cDNA末端快速扩增方法(Rapid amplification of cDNA ends, RACE)得到了硬紫草lehmgr基因的全长cDNA克隆,并进一步构建了该基因的植物过表达载体lehmgr-PBI121-GFP,转化发根农杆菌ATCC15834,用外植体诱导的方法获得了lehmgr过表达的转基因硬紫草毛状根株系(lehmgr overexpression hairy root, OH),同时用野生型农杆菌ATCC15834菌株诱导硬紫草外植体获得野生型(wild type, WT)硬紫草毛状根。亚细胞定位分析认为该基因可能定位于质膜上,有待进一步研究。本研究为深入探讨lehmgr对紫草宁及其衍生物合成的调控及分子作用机制提供了实验材料。

关键词：硬紫草 lehmgr 过表达载体毛状根亚细胞定位

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

紫草lehmgr基因的CDNA克隆及过表达毛状根的诱导

紫草LEHMGR基因的CDNA克隆及过表达毛状根的诱导

引用

江苏省遗传学会第九次会员代表大会暨学术研讨会

作者：张东霞吴凤瑶陆桂华庞延军杨荣武王小明戚金亮杨永华南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室

紫草科植物如新疆紫草、滇紫草和硬紫草的根部可合成一类萘醌类化合物-紫草宁及其衍生物,该类化合物具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。紫草宁的合成受到诸多影响因子的调控,如光信号、植物激素、无机元素、真菌诱导子等。紫草宁及其衍生... 详细信息

紫草科植物如新疆紫草、滇紫草和硬紫草的根部可合成一类萘醌类化合物-紫草宁及其衍生物,该类化合物具有抗菌、消炎、抗肿瘤等活性。紫草宁的合成受到诸多影响因子的调控,如光信号、植物激素、无机元素、真菌诱导子等。紫草宁及其衍生物是由苯丙素类（phenylpropanoid）代谢途径形成对羟基苯甲酸（p-hydroxybenzoic acid, PHB）和由甲羟戊酸（mevalonate acid, MVA）代谢途径形成焦磷酸香叶酯（geranylpyrophosphate, GPP）这两种重要的中间前体,由对羟基苯甲酸香叶基转移酶（p-hydroxybenzoate:geranyltransferase,PGT）催化形成香叶基-对羟基苯甲酸（m-geranyl-p-hydroxybenzoic acid, GBA）,再经一系列代谢酶的级联反应后在内质网中形成,并通过胞外分泌作用将形成的紫草宁微粒运输到表皮细胞原生质体外的细胞壁中。其中一个重要的代谢中间体由甲羟戊酸（MVA）途径合成,而HMGR是甲羟戊酸途径中的第一个重要限速酶。因此,克隆和获得高表达HMGR基因的紫草毛状根具有重要的理论和应用价值。本实验根据实验室前期的转录组测序数据,通过c DNA末端快速扩增方法（Rapidamplificationofc DNAends,RACE）克隆得到硬紫草Le HMGR基因的c DNA全长序列,该基因ORF区为1704bp,编码567个氨基酸残基。紫草组织特异性表达分析发现Le HMGR基因在根组织中的表达量最高,茎次之,而叶片中含量最低。为了建立Le HMGR基因过表达紫草毛状根体系,构建了植物过表达载体Le HMGR-PBI121-GFP,转化发根农杆菌ATCC15834,通过外植体诱导的方法获得了Le HMGR过表达的转基因硬紫草毛状根株系（lehmgr overexpressionhairyroot,OH）,同时使用ATCC15834诱导硬紫草外植体获得野生型（wild type, WT）硬紫草毛状根。通过亚细胞定位分析发现该基因可能定位于细胞壁或者质膜上,其机制有待进一步研究。本研究为获得高效合成紫草宁及其衍生物的生物材料奠定基础,并为深入探讨Le HMGR对紫草宁及其衍生物合成的调控及分子作用机制提供新的研究策略。

关键词：紫草(Lithospermum erythrorhizon) 次生代谢毛状根紫草宁 lehmgr 过表达基因功能

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

全选清除本页清除全部题录导出标记到“检索档案”

共1页 << < 1 > >>

回到顶部

执行限定条件

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：