检索结果-南通市图书馆

农业科学研究 2024年第3期45卷 49-54页

作者：张金金张真露石晶宁夏大学生命科学学院宁夏银川750021

SPL(Squamosa promoter binding protein-like,SPL)是植物特有的转录因子,在植物花和果实的生长发育、次生代谢、调控植物适应性等过程中起着重要作用。SPL蛋白中含有高度保守的SBP功能结构域,通过特异性结合基因的启动子元件,调控相关... 详细信息

SPL(Squamosa promoter binding protein-like,SPL)是植物特有的转录因子,在植物花和果实的生长发育、次生代谢、调控植物适应性等过程中起着重要作用。SPL蛋白中含有高度保守的SBP功能结构域,通过特异性结合基因的启动子元件,调控相关基因的表达。对已获得的枸杞pET28a-lbspl6融合蛋白进行诱导表达条件的优化,并对形成的包涵体蛋白进行纯化和复性。结果表明:诱导温度37℃、c(IPTG)=1 mmol/L诱导4 h后,lbspl6蛋白的表达量最高;原核表达的lbspl6蛋白,在各种诱导条件下的存在形式都为包涵体;通过超声破碎回收包涵体,并将沉淀在变性缓冲液中进行溶解复性,利用Ni-NTA柱亲和层析纯化蛋白,从而获得有活性的重组lbspl6融合蛋白。蛋白免疫检测结果进一步证实纯化后的蛋白为lbspl6重组蛋白。试验纯化得到的重组lbspl6蛋白为进一步深入研究枸杞lbspl6蛋白的功能奠定了基础。

关键词：枸杞 lbspl6重组蛋白蛋白质纯化蛋白质复性

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