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Improvement in Tol2 transposon for efficient large-cargo capacity transgene applications in cultured cells and zebrafish(Danio rerio)

引用

Zoological Research 2024年第3期45卷 567-574页

作者： Peng-Cheng Wang Hao Deng Rang Xu Jiu-Lin Du Rongkun Tao Department of Pediatric Cardiology Xinhua HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China Institute of Neuroscience State Key Laboratory of NeuroscienceCenter for Excellence in Brain Science and Intelligence TechnologyChinese Academy of SciencesShanghai 200031China Medical School Kunming University of Science and TechnologyKunmingYunnan 650500China Scientific Research Center Xinhua HospitalShanghai Jiao Tong University School of MedicineShanghai 200092China University of Chinese Academy of Sciences Beijing 100049China School of Life Science and Technology ShanghaiTech UniversityShanghai 200031China

Most viruses and transposons serve as effective carriers for the introduction of foreign DNA up to 11 kb into vertebrate ***,their activity markedly diminishes with payloads exceeding 11 *** the payload capacity of transposons could facilitate more sophisticated cargo designs,improving the regulation of expression and minimizing mutagenic risks associated with molecular therapeutics,metabolic engineering,and transgenic animal *** this study,we improved the Tol2 transposon by increasing protein expression levels using a translational enhancer(QBI SP163,ST)and enhanced the nuclear targeting ability using the nuclear localization protein H2B(SHT).The modified Tol2 and ST transposon efficiently integrated large DNA cargos into human cell cultures(H1299),comparable to the well-established super PiggyBac ***,mRNA from ST and SHT showed a significant increase in transgene delivery efficiency of large DNA payloads(8 kb,14 kb,and 24 kb)into zebrafish(Danio rerio).This study presents a modified Tol2 transposon as an enhanced nonviral vector for the delivery of large DNA payloads in transgenic applications.

关键词： Zebrafish Tol2 transposase Transgene large payload Synthetic biology

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