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lxrα gene downregulation by lentiviral-based RNA interference enhances liver function after fatty liver transplantation in rats

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Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International 2015年第4期14卷 386-393页

作者： Ying-Peng Zhao Li Li Jing-Pan Ma Gang Chen Jian-Hua Bai Department of Hepatobiliary and Transplantation Surgery Ganmei Affiliated Hospital Kunming Medical University

Steatotic liver grafts, although accepted, increase the risk of poor posttransplantation liver function. However, the growing demand for adequate donor organs has led to the increased use of so-called marginal grafts. Liver X receptor alpha （lxrα） is important in fatty acid metabolism and inter- related with the specific ischemia-reperfusion injury in fatty liver transplantation. This study aimed to investigate whether lxra RNA interference （RNAi） could improve the organ func- tion of liver transplant recipients. METHODS： Fifty Sprague-Dawley rats were fed with a high-fat diet and 56% alcohol. The livers of these animals had greater than 60% macrovesicular steatosis and were used as liver do- nors. The experimental donors were treated with 7×10^7 TU lxrα-RNAi-LV of a mixture injection and control donors with negative control-LV vector injection into the portal vein 72 hours before the operation. The effects of lxra-RNAi-LV were assessed by serum aminotransferases, histology, immunostain- ing, and protein levels. The transcription of lxrα mRNA was assessed by reverse transcription-polymerase chain reaction. RESULTS： Compared with controls, lxra RNAi inhibited the expression of lxrα at the mRNA （0.53±0.03 vs 0.94±0.02, P〈0.05） and protein levels （0.51±0.08 vs 1.09±0.12, P〈0.05）. lxra RNAi also decreased the expressions of sterol regula- tory element-binding protein lc （SREBP-Ic） and CD36. lxra RNAi consequently reduced fatty acid accumulation in hepa- tocytes. Compared with control animals, lxrα RNAi-treated group had lower serum alanine aminotransferase, aspartate aminotransferase, interleukin-1β, and tumor necrosis factor- alpha levels and milder pathologic damages. TUNEL analysisrevealed a significant reduction of apoptosis in the livers of rats treated with lxra-RNAi-LV, and overall survival as determined by the Kaplan-Meier method was improved among rats treated with lxrα-RNAi-LV （P〈0.05）. CONCLUSION： lxra-RNAi-LV treatment significantly down- regulated lxra expression and improve steatotic liver graft functio

关键词： fatty liver liver transplantation lxrα RNA interference ischemia-reperfusion injury

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胆酸对代谢性炎症模型大鼠炎性因子及PPARα和lxrα表达与分布的影响

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中国兽医学报 2022年第6期42卷 1241-1248页

作者：何秀玲孙苗石琳琳李培锋关红郭凤英内蒙古农业大学兽医学院农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室内蒙古呼和浩特010011 内蒙古农业大学职业技术学院内蒙古包头014109

为了探讨胆酸对代谢性炎症模型大鼠炎症的影响,揭示其调控机理,从而为宠物新型抗代谢性炎症药物的研究提供试验基础,试验用饲喂高脂饲料60 d的SD大鼠建立代谢性炎症模型。将大鼠随机分为5组,即模型组,胆酸高、中、低剂量组,阴性对照组,... 详细信息

为了探讨胆酸对代谢性炎症模型大鼠炎症的影响,揭示其调控机理,从而为宠物新型抗代谢性炎症药物的研究提供试验基础,试验用饲喂高脂饲料60 d的SD大鼠建立代谢性炎症模型。将大鼠随机分为5组,即模型组,胆酸高、中、低剂量组,阴性对照组,连续灌胃给药30 d后处死大鼠,采用HE染色法,观察肝脏组织病理学变化;采用ELISA试剂盒检测单核细胞趋化因子1(MCP-1)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)的含量;采用实时荧光定量PCR法检测巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)、白介素10(IL-10)、白介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)表达量;采用免疫组化法检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及肝X受体α(lxrα)的分布及表达。结果显示,与阴性对照组相比,模型组大鼠的肝脏组织中出现脂肪空泡以及以巨噬细胞为主的炎性细胞聚集;而给予胆酸治疗的高、中、低剂量组大鼠的肝脏细胞中细胞形态和大小均正常,且炎性细胞减少以及脂肪蓄积得到改善。与阴性对照组相比,模型组的MIP-1α及IL-8的表达量极显著升高(Plxrα受体均分布在肝脏细胞核,模型组PPARα表达量较阴性对照组极显著下降(Plxrα表达量极显著下调(Plxrα的表达,抑制脂肪生成,从而降低代谢性炎症模型大鼠的炎症反应。

关键词：大鼠胆酸代谢性炎症 PPARα lxrα

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六味降脂汤对NAFLD大鼠肝脏脂肪酸代谢及lxrα-SREBP-1c-FAS信号通路的影响

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中成药 2023年第2期45卷 406-414页

作者：全德森柯尊丽张远哲黎豫川马晶鑫刘林潇田维毅蔡琨贵州中医药大学基础医学院贵州贵阳550025 贵州中医药大学第二附属医院药学部贵州贵阳550025

目的探究六味降脂汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的干预作用及其机制。方法 42只大鼠随机分为空白组、模型组、阿托伐他汀组(0.9 mg/kg)及六味降脂汤低、中、高剂量组(5.4、10.7、21.4 g/kg),给予高脂饲料合并高脂乳剂喂养6周建立N... 详细信息

目的探究六味降脂汤对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠的干预作用及其机制。方法 42只大鼠随机分为空白组、模型组、阿托伐他汀组(0.9 mg/kg)及六味降脂汤低、中、高剂量组(5.4、10.7、21.4 g/kg),给予高脂饲料合并高脂乳剂喂养6周建立NAFLD大鼠模型,造模成功后予相应药物干预2周后,检测血清ALT、AST、SOD活性及MDA、NEFA水平,检测肝组织TC、TG水平并计算肝脏指数,HE和油红O染色观察肝组织病理学改变,RT-qPCR和免疫组化(IHC)法检测肝组织lxrα、SREBP-1c、FAS mRNA和蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肝组织存在广泛较大的脂肪滴,脂肪变性明显,血清ALT、AST活性,MDA、NEFA水平及肝组织TC、TG水平,lxrα、SREBP-1c、FAS mRNA和蛋白表达均升高(Plxrα、SREBP-1c、FAS mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01),肝组织SOD活性升高(P<0.05,P<0.01)。结论六味降脂汤具有调控肝脏脂肪酸代谢,减轻氧化应激反应,从而治疗NAFLD的作用,其潜在机制可能与抑制SREBP-1c-FAS信号通路有关。

关键词：六味降脂汤 NAFLD 脂肪酸代谢氧化应激 lxrα SREBP-1c FAS

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复合全谷豆粗杂粮的活性成分及其对胆汁酸代谢的调控

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卫生研究 2012年第3期41卷 369-373,389页

作者：谭琴翟成凯郭延波韩淑芬迟静邢花东南大学公共卫生学院营养与食品卫生学系南京210009

目的分析比较复合全谷豆粗杂粮中膳食纤维(dietary fiber,DF)、抗性淀粉(resistant starch,RS)、总黄酮和总皂甙等活性成分,了解其对大鼠粪胆汁酸(fecalbile acid,FBA)排出的影响及其调控机制。方法按国家标准及文献方法测定复合全谷豆... 详细信息

目的分析比较复合全谷豆粗杂粮中膳食纤维(dietary fiber,DF)、抗性淀粉(resistant starch,RS)、总黄酮和总皂甙等活性成分,了解其对大鼠粪胆汁酸(fecalbile acid,FBA)排出的影响及其调控机制。方法按国家标准及文献方法测定复合全谷豆粗杂粮中DF、RS、总黄酮和总皂甙的含量。44只SPF级SD大鼠随机分为阴性对照组、高脂模型组、米面组和复合全谷豆粗杂粮组,分别给予相应饲料连续喂养8周。实验开始前和结束后,代谢笼收集大鼠粪便,磷钼酸法测定FBA。RT-PCR法测定大鼠肝脏组织中胆固醇7α-羟化酶(cholesterol 7α-hydroxylase,CYP7A1)mRNA和肝X受体α(Liver X receptorα,lxrα)mRNA的表达。结果复合全谷豆粗杂粮中每100g含DF 15.3g、RS 9.03g、总黄酮0.45g和总皂甙0.24g。复合全谷豆粗杂粮组大鼠FBA排出量显著升高(PlxrαmRNA表达比其他3组显著增加(PlxrαmRNA表达的上调,有效地增加大鼠FBA的排出量,起到改善脂代谢紊乱的作用。

关键词：复合全谷豆粗杂粮膳食纤维粪胆汁酸CYP7A1 lxrα

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雄激素及其受体在肥胖、肥胖相关疾病及糖脂代谢紊乱中的作用

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生理学报 2018年第3期70卷 319-328页

作者：尹利军王晓慧上海体育学院运动科学学院上海200438

雄激素在肥胖及肥胖相关疾病如糖尿病、代谢综合征、动脉粥样硬化、高血压、心血管疾病等的发生及肥胖的糖脂代谢紊乱中的作用受到越来越多的关注。雄激素的作用主要通过雄激素受体(androgen receptor,AR)介导,AR属于核受体超家族成员,... 详细信息

雄激素在肥胖及肥胖相关疾病如糖尿病、代谢综合征、动脉粥样硬化、高血压、心血管疾病等的发生及肥胖的糖脂代谢紊乱中的作用受到越来越多的关注。雄激素的作用主要通过雄激素受体(androgen receptor,AR)介导,AR属于核受体超家族成员,在骨骼肌、肝脏、脂肪、脑等组织中均有分布和表达。低水平的睾酮和AR功能缺失能促进肥胖及其相关疾病的发生,诱导糖脂代谢的紊乱。睾酮/AR能调控几乎所有与糖脂代谢、肥胖相关疾病发生有关的途径,包括糖脂代谢关键酶和关键蛋白、核转录因子(PPARγ、lxrα、FoxO1)、炎症反应、下丘脑的瘦素敏感性、脂肪细胞的增殖和分化、线粒体功能和血管内皮细胞功能。此外,与男性不同,高水平雄激素的女性可出现肥胖及糖脂代谢的紊乱,其机制还不清楚。本文主要就雄激素和AR在男性肥胖及其相关疾病的发生以及糖脂代谢紊乱中的作用及机制作一综述。

关键词：雄激素雄激素受体 PPARγ lxrα FoxO1 脂肪和炎症因子糖脂代谢酶

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Effects of Siwei Yuganzi decoction on lxrα and CYP7A1 in hyperlipidemic rats

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Traditional Medicine Research 2019年第6期4卷 305-313页

作者： Ru-Yi Yang Hong-Bin Wang Pan-Pan Zhou Department of Integrative Medicine Affiliated Hospital of Qinghai UniversityXining 810000China Medical College of Qinghai University Xining 810000China.

Background:Hyperlipidemia(HLP)is a disorder in which lipids in the blood are disturbed due to abnormal lipid metabolism.Statins and fibrates lipid-regulating drugs prevent the generation of lipids and improves HLP,thereby reducing the likelihood of developing cardiovascular and cerebrovascular diseases.However,their adverse reactions and side effects limit a wide range of clinical applications.Tibetan medicine compound preparation Siwei Yuganzi decoction(SYD)is an adaptation of a classical prescription of the Tibetan medicine Sanguo decoction,that has been proved to have the effect of improving lipid metabolism;however,its possible mechanism remains unknown.Methods:Sixty specific-pathogen free grade Sprague Dawley rats were randomly divided into the blank control group,the HLP group,the Chinese patent medicine Xuezhikang positive control group,and the treatment groups with Tibetan SYD high-,middle-,and low-dosages respectively.Ten rats were assigned to each group.Every rat in these groups was fed with a high-fat emulsion to establish the hyperlipidemic animal model,except for those in the blank control group.Then the rats in the blank control and HLP groups were fed with 0.9%normal saline,those in Xuezhikang group were fed with Xuezhikang suspension at the dose of 0.11 g/kg/d,and those in SYD groups were fed with the SYD suspension at the dosage of 16.2 g/kg/d(high dosage),10.8 g/kg/d(middle dosage),and 5.4 g/kg/d(low dosage),respectively.After 8 weeks,the levels of serum total cholesterol(TC),triglyceride(TG),low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C),and high-density lipoprotein cholesterol(HDL-C)were detected by the ELISA.The mRNA and protein expression levels of liver X receptorα(lxrα)and cholesterol 7α-hydroxylase 1(CYP7A1)were detected using RT-PCR,western blotting,and immunohistochemistry.Results:The serum levels of TC,TG,and LDL-C in the HLP group were higher than those in the blank control group(Plxrαand CYP7A1 mRNA and proteins i

关键词： Hyperlipidemia Experimental study Tibetan medicine Siwei Yuganzi decoction lxrα CYP7A1

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川芎嗪对泡沫细胞胆固醇逆转运的影响

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中国中药杂志 2014年第7期39卷 1255-1259页

作者：祝骥滕耀红王萍儿杨贞卢德赵浙江中医药大学第三临床医学院浙江杭州310053 浙江中医药大学生命科学学院浙江杭州310053

目的:从胆固醇逆转运角度探讨川芎嗪对ox-LDL诱导泡沫细胞的干预作用。方法:采用体外培养RAW264.7,以20 mg·L-1ox-LDL诱导其转变成泡沫细胞模型,并用川芎嗪进行干预。通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况和酶比色法定量检测细胞内总... 详细信息

目的:从胆固醇逆转运角度探讨川芎嗪对ox-LDL诱导泡沫细胞的干预作用。方法:采用体外培养RAW264.7,以20 mg·L-1ox-LDL诱导其转变成泡沫细胞模型,并用川芎嗪进行干预。通过油红O染色观察细胞内脂质堆积情况和酶比色法定量检测细胞内总胆固醇和胆固醇酯的变化,并用荧光定量PCR和免疫印迹方法检测PPARγ,lxrα,ABCA1 mRNA和蛋白表达。结果:川芎嗪能降低泡沫细胞内总胆固醇和胆固醇酯,抑制脂质积累,并提高PPARγ,lxrα,ABCA1 mRNA和蛋白的表达。结论:川芎嗪通过增加PPARγ,lxrα,ABCA1基因表达,促进胆固醇逆转运。

关键词：川芎嗪泡沫细胞 PPARγ lxrα ABCA1

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基于报告基因检测的PXR、FXR和lxrα激动剂高通量筛选模型的建立

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中国药理学通报 2015年第2期31卷 289-293页

作者：庄嘉琅曾行钟国平金晶苟晓丽毕惠嫦黄民中山大学药学院药物代谢与药动学实验室广东广州510006

目的建立基于报告基因法的高通量筛选细胞模型,用来发现PXR、FXR和lxrα受体激动剂。方法利用Real-time定量PCR方法比较HEK293、Hep G2和LS174T细胞中内源性核受体PXR、FXR和lxrα的表达量,将p SG5-h PXR和p GL3-XREM-CYP3A4、p EGFP-N3... 详细信息

目的建立基于报告基因法的高通量筛选细胞模型,用来发现PXR、FXR和lxrα受体激动剂。方法利用Real-time定量PCR方法比较HEK293、Hep G2和LS174T细胞中内源性核受体PXR、FXR和lxrα的表达量,将p SG5-h PXR和p GL3-XREM-CYP3A4、p EGFP-N3-h FXR和EcRETK-Luc、p CMX-FLAG-h lxrα和p GL3-XREM-CYP3A4等质粒分别共转染到工具细胞中,优化共转染比例,并考察阳性药与萤光素酶报告基因表达强度的量效关系、模型特异性和稳定性。结果 1根据Real-time定量PCR结果,模型选用低表达PXR、FXR和lxrα的HEK293细胞作为工具细胞;2根据不同共转染比例对报告基因活性的结果,PXR、FXR和lxrα报告基因药物筛选模型的报告基因和过表达质粒比例,最终分别选择1∶1、2∶1和2∶1;3模型中,报告基因活性均与相应阳性药物(PXR/Rif、FXR/CDCA和lxrα/T0901317)呈剂量依赖性增长;4仅PXR激动剂Rif、FXR激动剂CDCA和lxrα激动剂T0901317可分别明显增加相应筛选模型的报告基因活性,分别重复5次试验后,计算得Z'值分别为0.58、0.66和0.63。结论该研究建立的PXR、FXR和lxrα激动剂高通量筛选模型,具有良好的特异性和稳定性,适用于对PXR、FXR和lxrα受体激动剂的筛选,进而开发以核受体作为药物靶点的药物。

关键词：核受体报告基因高通量筛选 PXR FXR lxrα

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甜菊醇调控巨噬细胞ABCA1蛋白表达

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食品与生物技术学报 2020年第11期39卷 88-95页

作者：李妍杨艳宇刘婷婷李月李成大连工业大学生物工程学院辽宁大连116034 营口市环境监测站辽宁营口115000

甜菊糖能够降低机体的胆固醇水平,而甜菊醇(steviol,STE)是甜菊糖在机体内的主要天然水解物。作者研究了甜菊醇对小鼠巨噬细胞J774A.1三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)的调控作用,并探讨其可... 详细信息

甜菊糖能够降低机体的胆固醇水平,而甜菊醇(steviol,STE)是甜菊糖在机体内的主要天然水解物。作者研究了甜菊醇对小鼠巨噬细胞J774A.1三磷酸腺苷结合盒转运体A1蛋白(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)的调控作用,并探讨其可能的分子机制。首先,利用MTT方法建立了甜菊醇的使用条件及浓度。采用免疫蛋白印记、细胞免疫荧光以及荧光定量PCR方法,发现在环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)的类似物8-(4-硫代氯苯基)腺苷-3',5'-环磷酸盐(8-(4-chlorophenylthio)adenosine 3',5'-cyclic monophosphate,CPT)的协作下,甜菊醇能够显著提高ABCA1在蛋白质水平和基因转录水平的表达;且甜菊醇可以显著上调ABCA1的上游调控基因肝X受体(lxrα)和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα)的mRNA表达水平和蛋白质表达水平,但对过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARγ)的表达无明显调控作用。结果表明,甜菊醇能够调控ABCA1蛋白表达的机制,可能与PPARα、lxrα的表达有关。本研究为后续治疗和预防动脉粥样硬化具有指导意义,对甜菊糖食品的应用提供了一定的参考作用。

关键词：甜菊醇 ABCA1蛋白 lxrα PPARα mRNA表达,蛋白质表达

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西农萨能奶山羊lxrα基因的克隆、序列分析及组织表达

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西北农业学报 2011年第3期20卷 8-14页

作者：王维罗军钟瑜朱越滕炎玲林先滋王桢西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室陕西杨凌712100

采集西农萨能奶山羊乳腺组织,利用RT-PCR和RACE技术分离并克隆lxrα基因的cDNA序列。其全长1 654 bp(GenBank收录号为GU332719),包括5′UTR150 bp,CDS1 344 bp和3′UTR160 bp,该基因编码447个氨基酸。经氨基酸序列分析发现,山羊lxrα与G... 详细信息

采集西农萨能奶山羊乳腺组织,利用RT-PCR和RACE技术分离并克隆lxrα基因的cDNA序列。其全长1 654 bp(GenBank收录号为GU332719),包括5′UTR150 bp,CDS1 344 bp和3′UTR160 bp,该基因编码447个氨基酸。经氨基酸序列分析发现,山羊lxrα与GenBank中牛(Bos taurus)、小鼠(Mus muscu-lus)、褐鼠(Rattus norvegicus)、猪(Sus scrofa)和人(Homosapiens)的lxrα相似性较高,均在90%以上。蛋白质结构分析表明,其蛋白质分子量为50.35 ku,等电点为6.3。具有受体特征结构域:配体结合区域(Lig-and-binding Domain,LBD)、DNA结合区域(DNA-binding Domain,DBD)和锌指蛋白C4型区域(Zinc fingerC4 type,zf-C4)。整个序列具有较强的亲水性且不含信号肽与跨膜结构,该基因定位于细胞核。此外,还通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术对lxrα基因进行组织表达分析。在所检测的西农萨能奶山羊11个组织中均有lxrα基因的mRNA存在,其中小肠组织中表达最丰富,乳腺、肝脏、脾脏、皮脂次之,心脏相对最低。

关键词：西农萨能奶山羊 lxrα 序列分析组织表达

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